Способ определения биохимической потребности в кислороде

(19) 01) А Зш С 01 Б ЗЗ 4 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТРЫТ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(46) 3012,83, Бюл. 9 48 (72) Ю.Ю. Кулис, К.В. Кадзяускене, Р.А. Виджюнайте и Л.А. Баранаускайте (71) Институт биохимии АН ЛитССР (53) 616.07(088,8)(56) 1. Руководство по изучению биологического окисления полярографическим методом. М., 1 Наука", 1973.2. Патент США Р 3542662,: кл. 6 01 И 27/46, 1976 (прототип) ., ,(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОХИМИЧЕСКОЙ ПОТРЕБНОСТИ В КИСЛОРОДЕ природных вод путем электролизаконтрольндй пробы воды в присутствии биологически активного агента,иммобилизованного на катоде, с последующим определением уменьшения катодного тока после введения исследуемой пробы и расчетом потребности вкислороде, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью возможности осуществления способа для вод с различными загрязнениями органическогопроисхождения, в качестве активногоагента используют суспензию активного ила или дрожжей Яассйагощусезсегеч 1 зае.Изобретение относится к биохимиии может быть использовано для определения степени загрязнения воды.Известен способ определения биохимической потребности.в кислородеполярографическим методом путем аналитического определения нейтральныхвеществ или ионов на основе измерения кривых сила тока - потенциална электродах различного типа (1 .Известен также способ определенияконцентрации кислорода при электролизе исследуемого раствора в 0,1 МФосфатном буфере при рН 7,0-7,2 вприсутствии глюкозооксидазы, измерение катодного тока и по уменьшению последнего определения биохимической потребности в кислороде(БПК) (2) .Недостатком известных способов является невозможность многократного 20использования для определения БПКвод с различными загрязнениями,трудности в стандартизации и.автоглатизации измерений.Цель изобретения - возможность 25осуществления способа для вод с различными загрязнениями органического происхождения.Поставленная цель достигаетсятем, что в способе определения бйохимической. потребности в кислородеприродных вод путем электролизаконтрольной пробы воды в присутствиибиологически активного агента, иммобилизированного на катоде, с последующим определением уменьшения катодного тока после введения исследуемой пробы и расчетом потребности вкислороде, при этом в качестве активного агента используют суспензиюактивного ила или дрожжей Яасспаголусез сегеч 1 зае,Способ осуществляют следующим образом.Суспензию, содержащую 1 мг сухойбиомассы активного ила или дрожжей 45в 0,02 мл 0,1 М фосфатного буферарН 7,5 с 0,1 М КС 1 наносят на мембрану катода (.-0,68) проточного амперометрического электрода.Через микрокамеру катода со ско 50 ростью О,б мл/мин прокачивают буферный раствор при 25-ЗООС. Растворы термостатируются автоматически при прокачивании через теплообменникпроточного раствора через электрод в течение 15-20 мин, устанавливается стационарный ток (ло) . После этого буФер заменяют раствором одного из субстратов в том же буфере. Буферные растворы прокачивают в течение 60 10 мин до установления нового стационарного уровня , затем прокачивают буфер без "убстратов в течение 10 мин и регистрируют прежнее значение стационарного тока (ц) . 65,о Глюкоза+глют амат 0,1105 11,05 0,2083 20,83 0,4047 40,47 0,4761 47,61 0,5060 50,60 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 Глюкоза+лактат 0,05 0,164 0,292 0,441 0,460 0,460 16,41 29,23 44,10 46,.04 46,04 0,1 0,2 0,3 0,4 Глютамат+лактат 0,102 9,175 0,360 Ог 440 0,450 1020 17,50 36,00 44,00 45 ю 00 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 Из табл. 1 видно, что при повышении концентрации субстратов, возрастает величина уменьшения катод-, ного тока, что в свою очередь, соответствует повышению БПК. Таким обраОстаточный ток электрода определяют, прокачивая через микрокамеру в течение 1 ч буФер, из которого при помощи азота удаляют кислород. Степень биохимической потребности в кислороде выражают соотношением величины начального катодного тока (и.) и катодного тока электрода в присутствии субстрата (1) и величины начального катодного тока . 1 х 100.лоП р и м е р 1. Зависимость биохимической потребности в кислороде от состава и концентрации смесей органических субстратов определяют при 25 С в 0,1 М фосфатном буфере рН 7,2 с 0,1 М КС 1.Йспользуют суспензию активного ила. Результаты проведенных опытов приведены в табл. 1.1064198 Продолжение табл, 2 Сточнаявода Концентрацияглюкозы, мМ БПК, % Сточнаявода Концен-.трацияглюкозы, мМ БПК Ъ 0,174 17,4 0,11 Неочищенная, разбавленная 100.раз 20 0,189 18,9 0,13 Составитель Ю. ПеровТехред Т.Маточка Корректор М, Шароши Редактор М, Янович Заказ 10514/45 Тираж 873 ПодписноеВНИИПИ Росударственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушокая наб., д, 4/5 т тщФилиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 зом, в процессе измерения катодного тока можно определить БПК в растворах.П р и м е р 2. Для исследования используют суспензию дрожжей Яассйаговусез сегеу 1 вае.Результаты определения БПК в сточных водах микробиологической промышленности приведены в табл. 2.Т а б л и ц а 2 Очищеннаяна аэротенках,разбавленная в5 раз Предлагаемый способ позволяет определить БПК для вод с различными загрязнениями органического происхождения, расширяя диапазон действия известного способа, нетрудоемок и не требует дорогостоящего оборудования.