Способ качественного определения цикутотоксина

Номер патента: 1048405

Автор: Дмитриченко

ZIP архив

Текст

ОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 1048405 Н 9 З(5 О а 01 И 31/2 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ 3448879/23- 02.06.82 15.10.83. Б М .Дмитрич.М ий государ ститут 087(088.8) ерский Я,Х ческие ре тотоксина. .25-27,71) ици 53) 56) твенный ме Иркутск ский ин 54324.1. Лемб .Д. Хими ии цику 1944, с Балахакции идентиффармацияф кац Об идентификации и судебно-химичес нформационное пис .81, с.4-5 (прото веха ядовитоой зкспертимо М 71/О,Мерип) . го пр зе. И 16.0 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И О(НРЫТИ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) (57) СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГДЕЛЕНИЯ ЦИКУТОТОКСИНА путемки анализируемой пробы химичреагентом о т л и ч а ю щ итем, что, с целью повышения чувствительности, специфичности и упрощенияспособа, анализируемую пробу предварительно обрабатывают 0,05-0,15 н.раствором соляной кислоты, в качестве химического реагента используют1,5-2,5-ный раствор сульфата церия(1 У) при объемном соотношении анализируемой пробы раствора сульфатацерия (1 У), равном 2-1:1, с последующим определением полученных кристаллов микрокристаллоскопическимспособом. есульфата церия (1 ч.) при объемномсоотношении анализируемой пробы ираствора сульфата церия (1 У), равным2-1:1, с последующим определениемполученных кристаллов микрокристаллоскопическим способом,редварительная обработка анализируемой пробы раствором соляной кислоты и затем раствором сульфатацерия (1 Ч) позволяет провести специфическое и чувствительное качественное определение цикутотоксина висследуемом образце. Такое определение достигается тем, что в результатеосуществления способа образуетсяпродукт реакции - кристаллы характерной формы сферолиты из призм иигольчатых кристаллов, форма которых наблюдается под микроскопом.Проведение микрокристаллоскопической реакции на цикутотоксин обеспечивает воэможность идентификацииего н смеси с другими веществами.Установлено, что другие яды, такиекак нуредал, морфин, стрихнин и кокаин, не мешают образонанию кристаллов характерной формы для цикутотоксина.Предварительная обработка анализируемой пробы 0,05-0,5 н. раствором соляной кислоты необходимадля реакции взаимодействия химического реагента сульфата церия(1 Ч) с цикутотоксином. Отсутстниепредварительной обработки анализируемой пробы О,05-0,15 н. растворомсоляной кислоты вызовет лишь кристаллизацию химического реагента,следонательно идентификация цикутотоксина будет ненозможной,Использование 0,05-0,15 н.раствора соляной кислоты является достаточным для последующего получениякристаллов - продукта взаимодействияцикутотоксина с сульфатом церия (1 У)Использование большей концентрациисоляной кислоты является нецелесообразным, так как возможен гидролиэ цикутотоксина и кристаллы характерной формы не образуются.Использование в качестве химического реагента 1,5-2,5%-ного раст-,вора сульфата церия (1 Ч) позволяетполучить его устойчивое соединениес цикутотоксином при характернойформе кристаллон. 30 40 Изобретение относится к аналитической химии, в частности к токсико-химическому анализу, и можетбыть использовано в бюро судебномедицинской экспертизы для идентификации цикутотоксина, относящегосяк классу полиинов,Известны способы качественногоопределения цикутотоксина путемвзаимодействия его с химическим реагентом, таким как реэорцин, пиро- Окатехин или пирогаллол 1 3.Однако данные реакции не обладают чувствительностью и специфичностью, так как резорцин, пирокатехини пирогаллол дают окрашенные соединения с любим окислителем и дажекислородом воздуха, причем окраскаполучаемых соединений не устойчива.Наиболее близким к предлагаемомуянляется способ определения цикутотоксина хроматоспектрофотометрическим путем. Предварительно измельченные растительные остатки обрабатывают диэтилоным эфирои, фильтруют,упаринают и полученный остатокрастворяют н этаноле, Этанольныйраствор хроматографируют н тонкомслое сОрбента. Цикутотоксин обнаруживают, обрабатывая хроматограммусерной кислотой или раствором щелочи (10-ный едкий кали в 50-номэтиловом спирте с последующим нагреванием н течение 2-3 мин при100-105 С или ныдеркинанием хроматограммы в течение 2-3 мин в парахиода. Цикутотоксин проявляется н З 5ниде темно-коричневого пятна, другие полиины Веха ядовитого при данных условиях обработки приобретаюткоричневую окраску ("2Однако известный способ малоспецифичен, так как обнаружениецикутотоксина проводят после проявления хроматограммы по появлениюцелого ряда пятен одинаковой коричневой окраски, цикутотоксин в предложенной системе растворителей - диэтиловый эфир:петролейный эфир - имеет наиболее низкое значение ВГ,что делает его определение неконкретным. Кроме того, укаэанный способ.обладает довольно низкой чувствительностью, что делает его малопригодным для проведения токсико-химического анализа. Открываемый минимумцикутотоксина по известному способусоставляет всего 50 мкг. 55Цель изобретения - повышениечувствительности, специфичности иУпрощение способа.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу качественного определения цикутотоксинаанализируемую пробу обрабатывают0,05-0,15 н. раствором соляной кислоты, в качестве химического реагента используют 1,5-2,5 Ъ-ный раствор 65 Использование 1,5-2,5-ного раствора сульфата церия (1 У) является оптимальным для образования кристаллов, так как меньшая концентрация данного химического реагента значительно удлиняет время кристаллизации (до 10 ч), большая концентрация приводит к. образованию мелких кристаллов с менее характерной формой при загрязнении поля зрения в микроскопе кристаллами самогоЗаказ 7924/51 Тираж 873 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретенийи открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП фПатентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 химического реагента - сульфата церия (1 Ч).Оптимальный вариант кристаллизации достигается при соотношенииреагентов 2;1 или 1:1.Увеличение объемной части химического реагента в указанном вышесоотношении мешает качественномуопределению цикутотоксина вследствиеего параллельной кристаллизации,В результате осуществления предлагаемого способа получаются кристаллы характерной формы - сферолитыиэ призм и игольчатых кристаллов,бесцветные, больших размеров.Чувствительность данного способахарактеризуется открываемым минимумом, который равен 0,4 мкг припредельном разбавлении 1;20000. Визвестном же способе открываемыйминимум равен 50 мкг, а предельноеразбавление 1;200,П р и м е р .1. Навеску 0,10 г цикутотоксина растворяют н мерной колбе на 100 мл н 96-ном зтиловом спирте и доводят объем до метки Один миллиметр полученного исходного раствора переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят объем до метки 96-ньм зтилоным спиртом. Одну каплю полученного разбавленного раствора цикутотоксина наносят на предметное стекло и добавляют одну каплю 0,05 н, растнора соляной кислоты. Затем к обработанной пробе добавляют одну каплю 1,5-ного раствора сульфата церия (1 у). Результат проведенной реакции качест. венного определения цикутотоксина наблюдают через 3 ч по характерной форме кристаллов - сферолиты иэ призм и игольчатйх кристаллов при наличии мелких кристаллов химического реагента - сульфата церия (1 У), отдельные прямоугольники или бесФорменные сростки иэ них. П р и м е р 2. На предметное стекло помещают 2 капли исследуемого раствора цикутотоксина,одну каплю соляной кислоты 0,10 н.концентрации и одну каплю 2,0-ного раствора суль,Фата церия (1 У). Наблюдают 1 ормукристаллон под микроскопом через 3 ч. П р и м е р 3. На предметноестекло помещают одну каплю исследуемого раствора цикутотоксина, однукаплю 0,15 н. раствора соляной кислоты и одну каплю 2,5-ного раство-ра сульфата церия (1 У). Характернуюформу кристаллов наблюдают под микроскопом через 2 ч.Во всех случаях качественногоопределения цикутотоксина по предлагаемому способу образуются крис 15таллы характерной формы - сферолиУты иэ призм и игольчатых кристаллов, бесцветные, больших размеров.Более четкая кристаллизацияидет при соотношении 2,0-ного раствора сульфата церия (1 У) и раство 20 ра цикутотоксина 1:1 и солянойкислоты 0,10 н. концентрации.Таким образом, предлагаемый способ обладает высокой специфичностьюи чувствительностью. Открываемый25 минимум цикутотоксина по предлагаемому способу составляет 0,4 мкг,при предельном разбавлении 1:20000.В известном же способе открываемыйминимум не менее 50 мкг при пре 30 дельном разбавлении 1:200.1Высокая специфичность способаобеспечивается подбором условий ипроведением микрокристаллоскопической реакции. Так, образование сфе 35 ролитон из призми игольчатых кристаллов при взаимодействии с раствором сульфата церия (1 Ч) характернотолько для одного вещества - цикутотоксина, в то время как изнестный4 О способ дает не специфичные скрашивания с любым органическим соедиНением.Способ значительно проще известного, общедоступен и может быть при 45 менен в любой аналитической лаборатории. Способ не требует специального оборудования и подготовки специалистов, используемые реактивы

Смотреть

Заявка

3448879, 02.06.1982

ИРКУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

ДМИТРИЧЕНКО МИХАИЛ МОИСЕЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 31/20

Метки: качественного, цикутотоксина

Опубликовано: 15.10.1983

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1048405-sposob-kachestvennogo-opredeleniya-cikutotoksina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ качественного определения цикутотоксина</a>

Похожие патенты