Способ получения белковых изолятов

(19) И 1) 51) С 12 й 1/О ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Ъщ,ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ(56) 1. Патент Японии Ио 48-17119,кп. 36 (2) Р 72, 1973.(54) (57) 1.СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЦЛКСВЫХ ИЗОЛЯТОВ из дрожжей, предусматривающий обработку органическимирастворителями, экстракцию белковых .веществ водным раствором электролитови их осаждение в изоэлектрической точкес последунзцим отделением и сушкой осадка, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения качества конечного. продукта, дрожжи дезинтегрируют, осажденные в изоэлектрической точке сухие белковые вещества подвергают обработке органическими растворителями, при этом их сначала обрабатывают нижней равновесной фазой гетерогенного растворителя, содержащего этиловый или изопропиловый спирт, гексан и воду, в соотношении белкового продукта к растворителю, равном 1-(2-4), полученную суспензию обрабатывают верхней равновесной фазой того же растворителя в соотношении нижней фазы, к верхней, равном 1:(1,5-4) .2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что обработку сухих, вР белковых веществ нижней равновесной фазой гетерогенного растворителя проводят в течение 15-30 мин, а обработку полученной суспензии верхней равновесной фазой - в течение 1-6 ч, 1 1005Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения белковых иэолятов, не со держащих липидов.Известен способ получения белковыхиэолятов, предусматривающий обработкуорганическими растворителями, экстракцию белковых веществ водным растворомэлектролитов и их осаждение в изоэлектрической точке с последующим отделением 10и сушкой ЦПо известному способу биомассу сначала обрабатывают органическими растворителями, затем водным раствором электролига извлекают белковые вещества, полученный экстракт для удаления солей инизкомолекулярнык соецинений поцвергаютгель-фильтрации, после чего белковыевещества осаждают в изоэлектрическойточке, оадок отделяют и высушивают, 20Недостатком известного способа является высокое содержание липидов в изолятах, составляющее 1%.Цель изобретения - повышение качестваконечного продукта. 25Это достигается тем, что в способеполучения белковых изолятов из дрожжей,дрожжи дезинтигрируют осажденные в изоэлектрической точке сухие белковые вещества поцвергают обработке органическими растворителями, при этом их сна-,чала обрабатывают нижней равновеснойфазой гетерогенного растворителя, с одержащего этиловый или изопропиловыйспирт, гексан и воду, в соотношении белкового продукта к растворителю равном35(2-4), полученную суспензию обвабатывают. верхней равновесной фазой тогоже растворителя в соотношении нижнейфазы к верхней равном 1; (1,5 - 4).40Обработку сухих белковых веществ нижней. равновесной фазой гетерогенногорастворителя целесообразно проводить втечение 15-30 мин, а обработку полученной суспензии верхней равновесной45фазой - в течение 1 - 6 ч.Способ осуществляют следующим обра.эомЙезинтеграт биомассы, выращенной на этанолеобрабатывают раствврам электро лита для извлечения белковых веществ, раствор, содержащий извлеченные белковые вещества, отделяют от твердой фазы и высушивают до влажности 3- 10%, Сухой белковый изолят для его очистки 55 от липидов обрабатывают при перемешива-нии в течение 15-30 мин нижней (воцной) равновесной Фазой гртерогэйного растиворителя, содержащего этиловыйили иэопропиловый спирт, гексан и воду.Соотношение между белковымизолятоми растворителем должно составлять1: (2-4), Взаимодействие гидрофильногобелкового изолята с нижней фазой экстрагента обеспечивает равномерное суспендирование белкового порошка в растворителе, а также распад крупных частиц сухого продукта, что существенно увеличивает удвльную поверхность контакта фазОбработку проводят 15-30 мин, затемк образовавшейся суспензии белковых частиц в нижней фазе при перемешивании добавляют верхнюю фазу экстрагента в соотношении, нижней и верхней фаз, равном1 : (1,5-4),В результате такой обработки происходит интенсивное извлечение липидов изсуспензии белкового порошка, смоченноговодной фазой, в гидрофобную гексановуюфазу экстрагента. Обработку продоакаюг1-6 ч, после чего смесь разделяют нагексановую фазу, содержащую извлеченные липиды, и белковый изолят, смоченный водной фазой. При необходимостиособо полного извлечения липидов, обработку можно повторить несколько раз,Процесс может быть осуществлен такжепротивоточно при встречном движениибелкового изолята, предварительно смоченного нижней фазой, и верхней равновесной фазы экстрагента. При этом получают белковый изолят с содержанием остаточньос липидов 0,01-0,2 %.П р и м е р 1, Суспензию дрожжей,выращенных на этаноле, содержащую 3%,сухих веществ, в течение 30 с обрабатывают азотом под давлением 90 ат,а затем сбрасывают давление до атмосферного.В результате получают цезинтеграт, из которого водным раствором КОН при рН 7,5-8 экстрагируют белковые веще- ,ства. Извлеченные белковые веществаосаждают йз раствора в изоэлектрической точке при рН 4-4,5 и высушивают на распылительной сушилке 40 г сухого порошкообразного белкового продукта, содержащего, %: влаги 5,3, белка 76 и ли- . пидов 6,1 обрабатывают в течение 30 минпри перемешивании нижней фазой гетерогенного растворителя состава, (вес. %) нэопропанол 39,2; гексан 47,8; вода13, причем нижняя фаза этого растворителя имеет следующий состав, вес. %: иэопропанол 60,5, гексан 11,2, вода 28,3, Весовое соотношение белкового продуктаСоставитель Т. Мелентьева Редактор Л. Письман Техред М.Гергель Корректор А. Повх Тираж 523 Подписное. ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд, 4/5Заказ 7994/1 филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 10084 нижней фазе равно 1:2, температура 18- 20 фС. Полученную суспензию последова тельно в 6 ступеней обрабатывают верхней равновесной фазой того же растворителя в соотношении нижней фазы к верхней, рав-. ;нам 1:1,6. При этом верхняя фаза на каждой ступенй имеет состав, вес, % . изопропанол 23,О; гексан 73,8; вода 2,6,время обработки на каждой ступени 1 ч. В результате полученный белковый 10 изолят содержит 0,01% липидов.П р и м е р 2. 40 г сухого белковго продукта, полученного согласно приме- ,ру 1 и содержащего %: влаги 3,5, белка 84 и липидов 5,8, обрабатывают в тече ние 20 мин при перемешивании нижней фазой гетерогенного растворителя состава вес. %: атанол 39,2, гексан 47,8 вода 13,0,причем нижняя фаза этого раствориг теля имеет состав.ф вес, %: этанол 72,5; гексан 3,2; вода 24,3. Весовое соотношение белкового продукта к нижней фазе равно 1:4 температура 18-20 вС. Полученную суспензию посщ,довательно : в 6 ступеней обрабатывают верхней равно- д 5 веской фазой того же растворителя в соотношении нижней фазы к верхней равном 1:2,2. При атом верхняя фаза на , каждой ступени имеет состав, вес. %: эта 61 4нол 3,8; гексан 96,0; вода 0,2,времи.обработки на кщкдой ступени 10 мин.В результате получают белковый иэолят,содержащий 0,12% липидов П р и м е р 3.40 гсухогобелкового, продукта полученного согласно приьЬ ру 1 и содержащего вес,%: влаги 8,2, белка 82;8 и липидов 8,8 обрабатывают при перемешивании в течение 18 мин нижней фазой гетерогенного растворителя состава, вес. %: этанол 18, 48, генсан 77, 67, вода 3, 88, .причем нижняя фаза этого растворителя имеет состав, вес. %: этанол 73,0, гексан 7,8, вода 19,5. Весовое соотношение белкового, продукта в нижней фазе равно 1:3, температура процесса 18 - 20 С, Нйучененую суспенэию обрабатывают верхней равновесной фазой того же растворителя в соотношении нижней фазы к верхней, равном 1: 4. При этом верхнюю фазу подают рпротивотоком суспенэии, время обработки 4 ч. В результате полу чают белковый изолят, содержаший 0,2 % липидов.Предлагаемый способ поэволяет получить белковые иэоляты с низким сойержанием липидов.