Состав геля для электрофорезамышечных белков

Союз Советских Социалистических РеспубликОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ о 11817591(61) Дополнительное к авт, свид-ву(22) Заявлено 24,07.79 (21) 2833352/30-15 я)м, кл,зС 01 й 33/48 О 01 й 33/12 О 01 й 27/26 с присоединением заявки Нов Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытийДата опубликования описания 300381(54) СОСТАВ ГЕЛЯ ДЛЯ ЭЛЕКТРОФОРЕ ИЫШЕЧНЬЕ БЕЛКОВиохйо ети Изобретение относится к б мии, конкретно к области электроф р ческого разделения белков.Известен гель-носитель для элек" трофоретического разделения белков, содержащий крахмал и буферный раствор. Для разделения животных белков гель-носитель готовят на буферном растворе, состоящем из смеси двух буферных растворов, один из которыХ содержит трис-(оксиметил)-аминометан и лимонную кислоту, а другой, так называемый электродный, содержит борную кислоту и гидрат окиси лития 1 ). а чных белков ят на буферем мочевину вным компоненхмал, так как днеобразукицим Осн кра ствеществом 2 ь, приготов" ала,являетсяделения мышечих млекопитаюе разделение Однако гель-носител ленный на основе крахм мало пригодным для ра ных белков рыб и морс щих, т.е. в данном ге белков недостаточно.Для разделения мо крахмальный гель гот ном растворе, содерж и меркаптоэтанол.том геля является именно он является цель изобретения - улучшение раз"деления белков и получение достаточно полного белкового спектра.Поставленная цель достигаетсятем, что состав геля дополнительносодержит альгинат натрия при следующем соотношении компонентов, вес.:Крахмал11,0 ,- 14,0Альгинат натрия, 0,180- 0,190Буферный раствор ОстальноеП р и м е р 1. Для электрофорети"ческого разделения мышечных белковмикижи (5 а 1 ео ауМ 1 зз), дальневосточ 15 ной сардины (агд 1 порз задах ае 1 апозй 1.сй), лахтака (Ег 1 дпаспцз ЬогЬасцз поцс 1 сцз) испольэовали гельноситель, содержав 1 ий,вес.:Крахмал . 1120 Альгинат натрия О, 180Буферный раствор ОстальноеБуферный раствор с рН, равным 8,65,представляет собой смесь двух буферных растворов, один из которых25 содержит 0,867 трис-(-оксиметил)- аминометан и 0,15 лимонной кислоты,другой содержит 1,18 борной кислоты и 0,29 гидрата окиси .лития,причем эти растворы взяты в соотноше 30 нии 1:0,19,817591 формула изобретения Составитель А. МакаровРедактор М. Лысогорова ТехредН,Майорош, Корректор С.ШекмарлФЮ Заказ 1337/59 Тираж 907 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, й, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Гель-носитель приготовляют следующим образом.В 1 л буферного. раствора растворяют вначале навеску альгината натрия в течение суток при комнатной температуре, затем добавляют навеску крахмала, размешивают и заваривают в колбе над открытым пламенем при постоянном перемешивании. После ,того, какгель закипит, из колбы отсасывают воздух для удаления пузырьков.воздуха из смеси с помощью 10 водоструйного насоса. Приготовленную смесь заливают в ванночки для остывания и созревания на 10-12 ч. После этого гель готов к работе.При вышеуказанных концзнтрациях 15 крахмала и альгината в геле происходит резделение белков на максимальное количество фракций, но фореграмма получается не достаточно четкая.П р и м е р. 2. Для электрофо О ретйческого разделения мышечных белков сардины, лахтака и микижи испольэовали гель, содержащий вес.:Крахмал 14Альгинат натрия О, 190БУФерный раствор ОстальноеГель такого состава также позволяет получить достаточно полный спектр белковых фракций,При более высоких концентрациях крахмала и альгината натрия гель 30 приобретает более высокую вязкость и скользкость, что вызывает трудности в работе с ним.П р и м е р 3. Оптимальный состав геля для электрофоретического 35 разделения мышечных белков, вес.:Крахмал 14Альгинат натрия 0,188Буферный раствор ОстальноеПри таких концентрациях крахмала 40 и альгината натрия гель обладает достаточно большой разделяющей спо" собностью и удобен в работе. Получаемюе Фореграммы четкие, хорошо читаемые. ЭфФективность разгонки оценивается визуально по количеству четких фракций в анодной и катодной частях электрофоретического спектра.По числу белковых Фракций разрешающая способность электрофореза после введения в гель альгината натрия при разгонке мышечных белков микижи и лахтака повысилась на 30, при разгонке мышечных белков сардины на 50, за счет более тонкого разделения в анодной части электро-форетического поля, а также за счет того, что часть белков приобретает способность двигаться к минусовому полюсу и образует спектр в катодной части фореграммы.Использование геля для электрофореза с добавлением альгината натрия позволяет на 30-50 повысить разрешающую способность эЛектрофореза мышечных белков рыб и млекопитающих и открывает новые воэможности для генетических и биохимических исспедований животных белков. Состав геля для электрофореза мышечных белков, содержащий крахмал и буферный раствор, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью улучшения разделения белков, состав. геля дополнительно содержит альгинат натрия при следующем соотношении компонентов, вес.:Крахмал 11,0 -14,0 Альгинат натрия . 0,180- 0,190 Буферный раствор Остальное Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. 5 вЬ 1 еь О.81 оспеа , 61,1955, р. 629-641.2. Юане й. У. апд Ва 1 доеп й,.8 осп. е 1 Ворпуь, Адйа, 47, 1961,р. 225"239.