Способ определения выраженностиклеточного иммунитета

793566 точных пластов равняется 3,0 сл;1 ри 1 соэффициенте достоверности разницы 12,5 (Р(0,001), Эта разница характеризует ло;1 аление миграции клеток под злияннсм кокл 10 шного антигеня, чО свидетельств ет о разв 11 тин клеточного иммунитета у мыш 11, иммунизирозанной коклюшной вакциной.Предлагаемый способ определения клеточного иммунитета обладает значитель ными преимуществами по сравнению с;1 ззестными способами. Простота зсех опеваций при осуществлении способа позволяет снизить трудоемкость опытов и сократить время на их подготовку. Постановка реакц 11 и не треб;ет специально нолготозленно:0 персонала. Концентрация клеток на лле стандартных по размеру камер поэзо; яет определять линейные размеры клеточных пластов и обеспечивает получение стат 11- 20 стически Достоверных и воспроизволимыхрезультатов при минимальной степени нетения миграции. Это дает возможность сократить количество наблюдений, позы- сить их информативность, получить значи тельную экономию исходных материалов(клеточная ззвесь, питательная среда, анти 30 Формула изобретения Способ опрелеления выраженности клеточного иммунитета путем культизирования взвеси исслелуемых иммунокомпетелт ных клеток с антигеном с последующимопределением миграционной способности клеток, отличающийся тем, что, целью упрощения способа, взвесь;1 сследуемых клеток с янтигеном культивируют 3 40 щелевидных камерах 1 - б ч в горизонтальном положении, зятем кямерям придают наклонное положение под углом 10 - 15 и прололжагот культивирование ло 18 ч и по разности длин сформировавшихся клеточ ных пластов з опыте и в контроле определя 1 от выраженость клеточного иммунитета. Источник информации, принятый зо знимание при экспертизе:50 1, Методы изучения клеточного иммунитета, Под ред. Блума и Беннета. - М., 1974,9 Составпель С. Малютина,с,сакт 01) Т, Слюкин 11 Текс;1 А. 1 СамЗакан 1761/199 11 асс Лв 13111 Г 10 Поиск Государственного комитета113035. Москва, .Ж,Тип, Харьк. фил. пред, Патент подавления м 11 грации и наличие клеточного;1 м мунитета.Время горизонтальной экспозиции выбирают от 1 ло 6 ч, так как оседание и прилипание клеток, напэимер спленоци,"Оз, происхолит уже через 1 ч культ".1 ирования на горизонтальной плоскости, однако известно, что фактор, полавляюгций миграцию макрофагов, начспнает активно продуцироваться через 6 ч культивирования клетсгчной взвеси. Наклон камер под углом 10 - 15 в достаточной степени обеспечивает строгую направленность миграции клеток. Чрезмерное увелгнченис этого угла нецелесообразно, так как потребует уменьшения количества среды в камерах и увеличения воздушной прослойки, что неблагоприятно отразится на условиях культивирования клеток.П р и м е р. Берут мышь, пммунизированну 1 о коклюшной вакциной в дозе 1,5 млрд. м 11 кробных тел нутр 11 брюн 1 иншь Мышь обескровливают декапитацией и пз селезенки выделяют клеточну 1 о взвесь обсцепринятым способом. После лвухкратного отмывания в гралуированной центрифужной пробирке клеточную взвесь доводят ло 10,оной концентрации, В опыте используют 8 щелевидных камер. В четыре камеры зносят по 0,1 11 л среды 199 с 5 о/, бычьего сыороточного альбумина (контроль), з другнс четыре камеры - по 0,1,11,1 той исе срелы с добавлением коклюшного растворимого антпгена, обработанного ультэазвуком, в конечной лозе 100,цкг/11,г. Затем о все камеры вносят по две капли (0,04 пгниг) клеточной взвеси. Края основания устройства смазывают вазелином и герметически закрываюг крышкой. Устройство помещают в термостат при 37 С и культивируют 3 ч в горизонтальном положении. Затем устройству придают наклон 15 и продолжают культивирование в термостате до 18 ч. По окончании культивирования крышку снимают, помешают устройство пол микрофот в горизонтальном положении и, проецируя поочередно дно камер на экран, опрелелеляют ллин клеточных пластов при увеличении 16 " в сантиметрах. Длина клеточных пластов в контрольных камерах составляет 4,0; 4,0; 4,5; 4,5 (средняя 4,2+0,17), з опытных камера.с 7,0; 7,0; 7,15; 7,5 (средняя 7,2:0,17). Разница в средней длине кле. ышникова Корректор И. ОсиповскаяТира к 705 ПодписноеСССР по дсласи изобретенип и открь 1 тийРаушская наб., д. 4/5