Способ получения биомассы микроорганизмов

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 1747886 Союз Советск ихСоциалистическиеРеспублик(22) Заявлено 09.11.78с присоединением заявк 21) 2683129/28-1 12 сударвтввнный ке 1 внтет СССР 23) Прио 1 эигет -Опубликовано 15,07,80. Бкэллетень %26 Дата опубликования описания 18,07,80(53) УДК663.18 (08 по делан нзебретенн н открытий Н, Сергеева, Н. Р. Озолиня, Б, М. Арокая, В. К, Бауман и М. К. Валнниеце 72) Авторы изобретения 3, Н. Крейцберг,О. П. Низк дового Красного Знам АН Латвиискои СС древесины тнтут. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1Изобретение относится к микробиологичес. кой промышленности, в частности к получению биомассы микроорганизмов, утилизируюших гидролизный литнин.Известен способ,согласно которому лигно. содержашие отходы целлюлозной промышленности подвергают окислительной деструкпии озоном. Образуюшиеся в результате такой обработки углеродные субстраты используют в качестве питательной среды для вырашиваиия микроорганизмов 111.Однако технология окислительной деструк. ции лигнина по данному способу сложна и малопроизводительна.Ближайшим техническим решением по тех нической суцвости и достигаемому эффекту является способ получения биомассы микроорганизмов, предусматриваюший обработку этих микроорганизмов в определенных условиях с последуюшей адаптацией их путем пересева на питательную среду, содержашую источник углерода.Согласно этому способу микроорганизмы генетически иэменякт таким образом, чтобы л спор чашк дели. среду . одно ся олюло ся сложи Целью соба пол разрушать Поста вл качестве тации исисто при длк 71) Заявитель Орд ОМАССЫ МИКРООРГАНИЗМ енные мутанты были способны образоь энзимы, разрушающие преимушественигнин. Мутанты получаю путем облучениянапример, ультрафиолетовым светом вах Петри в течение 5 мин. Через две непроизводят отбор жизнеспособных послеения спор и засев их на питательную ., содержащую соли и целлюлозу. Послео месяца культивирования производитбор мутантов, не разрушающих цел.зу 121.недостаткам известного способа относит.ость технологии получения мутантов,изобретения является упрошение споучения микроорганизмов, способныхпреимущественно лиги ин,енная. цель достигается тем, что вмикроорганизма, поллежашего адаппользуют дереворазрушаюший грибопэусеа ЬудпоЫеа 0251, а в качественикауглерода - гидролизный лигнин,этом адаптацию проводят в 5 стадий,льностью по 10 - 15 суток каждая,.придователъном увеличении гидролизного747886 4отношению к гидролизному лигнину. Содержание сырого протеина в биомассе составило17,5%. 25 45 Составитель В. ЗайцеваТехред А. Куликовская Корректор Г. Назарова Редактор Н, Кусова Тираж 522 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская набд. 4/5 Заказ 4181/16 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 43лгпнина в питательной среде на 20 Я к каж.дой последующей стадии при температуре,6 .36 С,П р и м е р. В лабораторных условияхадаптацию гриба Рооопогоусез Ьудпойез 0251проводили в чашках Петри, куда наливали30 мл огаризованной питательной среды, со.держащей необходимое количество солодовогоэкстракта, затем добавляли гидролизныйлигнин в нужном количестве для каждойступени адаптации. Содержание чашек Петрипокрывали целлофановой пленкой, стерили.зовали двухкратно в течение 45 мин при0,7 атм и затем инокулировали грибомРо 9 опогпусез ЬудпоЫез 0251 как описано вы.ще. Время каждой ступени адаптации 1015 дней, температура 26-36 С, После окон.чания каждого срОка произрастания биомассугриба снимали с пленки, высушивали, взве.шивали и определяли процент разрушениялигнина. В процессе адаптации степень деструкции гйдролизного лигнина от ступени к ступени увеличивается, повышается активностьлакказы и псроксидазы, возрастает количество мицелия гриба.,На последней ступениадаптации в отсутствии солодового экстракта,когда гидролизный лигнин является единственчым источником углерода, он разрушаетсяпа 21,7%, что в 3,5 раза больше, чем на первой ступени адаптации. Выход биомассы гриба на последней ступени адаптации составляет139,1,% по отношению к количеству, получен.ному на среде без липшна (нулевая ступень),Для получения биомассы гриба, выращен.ного на гидролизном лйгнине, в лабораторных условиях в 1-л колбу Зрленмейера кативали 150 мл щггательной среды, содержащийиз расчета на 1 л питательной среды 20 ггидролизного лигнина, 2 г МН)гНРОф, 2 гглюкозы, 0,2 г КНРО, 0,6 г КН,РО, 0,5 гМуВОф 7 НО; 0,001 г ЬЛп 804 ф 4 НрО, 0,002 гСАБО 5 Н,О и 0,001 г тиаминхлорида. Среду в колбе стерилизовали двухкратно паромв .продолжении 45 минут при 0,6 атм. После-стерилизации в колбу помещали кусочки адаптированного гриба Роропогпусез Ьудпо 3 дез 0251культивировали его 10-15 дней при темпера.туре 26 - 36 С. Выход биомассы гриба послепроизрастания за зто время составил 24% по 5Биологическое действие полученной биомассы гриба проверялось путем добавления ее в количестве 3% к рациону цыплят. Такое ие количество гидролизных дрожжей, которые обычно используют в кормлении цыплят в качестве источника животного белка и вита минов группы В, добавляли к рациону цыплят для контроля. Полученные результаты показали, что биомасса гриба Ропоповусез Ьудоодез 0251, выращенная на гидролизном лигнине, может быть использована вкачестве белково. витаминной добавки к рациону цыплят.По сравнению с известным способом предлв.гаемая технология получения адаптированных, к гидролизно,лу лигнину штаммов отличается проетотой и не требует сложного оборудова.ния.; Формула изобретения Способ получения биомассы микроорганизмов,предусматривающий обработку этих микроорга.низмов с последующей адаптацией их путемпересева на питательную среду, содержащуюисточник углерода, о т л и ч а ю ш, и й с ятем, что, с целью упрощения способа., в качестве микроорганизмов, подлежацкх адаптации, используют дереворазрушаюший грибРояопоп 1 усез Ьузпо 1 дез 0251, а в качестве.источника углерода - гидролизный лигню,при этом адаптацию проводят в 5 стадий,длительностью по 10-15 суток каждая, припоследовательном увеличениигидролизноголигнина в питательной, среде на 20% к каж.дой последующей стадии при температуре26-36 С,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Патент США Мо 3737374, М. кл. С 12 В 1/00, опублик. 1973. 2. Патент США Иф 3962033, М,кл. С 12 В 1/00, опублик, 1975.