Способ количественного определения натриуретического фактора

Союз Советскнх Соцнапнстнческнх республннОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ в 631821 данаиаюрФФь К АВТОРСКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ(43) Опубликовано 05.11. 78 ид.в 82278/28-1 51) М. Кл Я 01 К ЗЗ/16 осударстоеннкй номнтеСовета Мнннстроо СССРоо делам нэобретеннйн отнрытнй етень %4Дата опубликования описания 05,11.. Иванов Черновицкий государственный медицинский институт 1) Заявител НИЯ) СПОСОБ КОЛИЧЕСВЕННОГО ОПР НАТРИУРЕТИЧЕСКОГО ФАКТОРА5 Изобретение относится к медицине иможет быть использовано для изученияроли натриуретнческого фактора в регуляции водно-солевого обмена в организме человека и животных.Известен способ количественного одределения натркуретического фактора путемвведения тестируемого материала в кнкубааиоощю срейу 111.Однако известный способ обладаетнизкой чувствительностью. тоЦелью изобретения является повышение чувствительности способа,Эта пель достигается тем, что в. инкубационную среду помещают изолированный отрезок тонкой кнцжи, вывернутый и тзавязанный с двух концов, н выдерживают его при температуре 36-374 ЭС в течение 55-60 минут, взвешивают, послечего в среду добавляют тестируемый мвтериал, выдерживают в нем 30-35 ми- фнут, повторно вэветпивают н по изменениювеса определяют количество тестируемого материала, по которому судят о количестве натриуретического фактора,Способ осуществляют следующим образом.Жквоткых эа 18-22 часа до начала ек сперимента лишают пищи, воду не ограничивают. После деквпитвции изолируют отрезок тощей кюпки длиной 4-5 см (от одного животного, можко взять:нес.колько отрезков кишки), Отрезок кишки выворачивают, после чего завязывают с обоих коннов. Образовавшийся, вывернутый кишечный мешочек помещают для инкубацнк в раствор следующего состава, мм/л:МаСВ -1353 КС 0-4,5 т СаСсо 2,5;о,18 т)1 аНСО,0; Мв 1,84;вНРО 0,46; глюкоза - 12, при рН 7,4 температуре 37 С и постояннойваэрации среды. Всасывательную функцию тощей кишки оценивают по изменению ве са вывернутого мешочка через 30 минут после добавления исследуемого материала, Прк определении количества натриуреткческого фактора в исследуемом материале готовят 3-4 таких препарата ки шечника. К каждому отрезку кишки через 1 час после начала инкубапки в цитательной среде добавляют исследуемый материал ,плазму крови) в количестве от 0,01 до 0,2 мл на 10 мл йнкубапионной среды, в зависимости от предполагаемого количества натриуретического фактора, у а затем производят повторное вэвешква.кие. После опыта вывернутый мешочек высушивают до постоянного веса. Расчет иэменения веса препарата (прибавку или убыль) производят на 1 г веса сухой ткани кишки. По полученным результатам строят график иа миллиметровой бумаге. На осн ординат откладывают иэ меневик в весе в мг/г (прибавку или уменьшение) после добавлении нсследуе у мого материала, на осн. абсцисс - количество тестируемого материала, За 1 ки шечную единицу действия натриуретичес-, кого фактора принимают тако его коли- чество, которое полностью блокирует ма- а сыванке жидкости отрезком кишкк, Это количество соответствует пересечению графика с осью абсцисс. Количество на триуретнческого фактора выражают в ки вечных едкккиек действия.в 1 мл тестк В руемого материала (киа.ед./мл), для ето го расчет производят по формуле".я,где К количество иатриуретического 36 фактора, кнш.ед./млгМ фф величина н кз графкхщ, Ъ оличество иатрняитнческк о "ектю ра в плазме крови ннтактиых крыс, опре деленное данным способом, составляет 3 6,0 + О;42 киш.вд./мл, у крыс после увелнчения объема внеклеточной жидкости путем введения в вену иэотщщческого солевого расгвщщ в количестве 3от ве40 са тела количество натркуретического фактора составляет 15,6 + 1,12 киш, ед.lмл, т,е, наблюдается его увеличение, Количество натриуретического фактора в плазме крови интактных кроликов, определенное предлагаемым способом, сос тавляет 8,60,99 киш.ед./мл, у кроликов после увеличения объема внеклеточной жидкости аналогичным способом количество натрнуретического фактора составляет 22;4 + 1,86 кнш.ед./мл.Предлагаемый способ обеспечивает простотуисследования, быстроту, аоста- точную информативность и возможность количественного выражения.Формула изобретенияСпособ количественного определения натриуреткческого фактора путем введе нка тестируемого материала в инкубапиои.иую среду, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с пелыо повышении чувствительности способа, в инкубационную сре ду помещеот изопироващый отрезан тавкой кишки, вывернуоий к эаваэаиный с двухТв в течение 55-60 минут, взвешивают, по сле чего в среду добавляют тестируемый материал, выдерживают в нем ЗО 35 ми нут, повторно взвешивают и по изменению веса определяют количество тестируемого материала, по которому судит о количестве натриуретического фактора.Источники информации, принятые во ваманне прн экспертизе;1. Иванов Ю. И., Гапон Л. И. Пате физиология, 1974, 2, с. 65-67.Составитель С, МалюткаРедактор О. Иванова Техред Н. Андрейчук Корректор М. ДемчнкЗаказ 6335/43 Тираж 1070 ПодписноеБНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушскаи, наб., д, 4/8Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4