Способ получения анти-антигемоцитарной сыворотки

биЙ,.; -1л О П И С А Н И Е 1 и)565621ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ботов Советских Социалистических Республкк1 К 39/00 Государственный комитет ССВРелам изобретений и вткрытнй43) Опубликовано 30.01.79. Бюллетень45) Дата опубликования описания 30.01.79(72) Авторы изобретения ас, М. А. Бабянскас и П, А, Заянчка Институт зоологии и паразитологии АН Литовской СС 1) Заявител ПОЛУЧЕНИЯ АНТИ-АНТИ ГЕМОЦИТАРНО СЪ ВО РОТ К И О Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к защите растений от насекомых-вредителей.С целью повышения активности водо- растворимых белков против насекомых- вредителей по предлагаемому способу антиген берут из клеток тела насекомого и вводят их животным, из крови которых получают антигемоцитарную сыворотку для последующего введения ее в тело насекомого, и из клеток тела насекомого выделяют затем анти-антигемоцитарную сыворотку.Предлагаемый способ основан на новом ;принципе, который заключается в использовании иммунохимических свойств насекомых. В качестве антигена используют клетки гемоциты насекомых ба 11 ег 1 а тпе 11 опеа 1., которые вводят подкожно белым крысам 4 раза с интервалом 5 дней. Во время каждой инъекции вводят по 0,2 мл 50% -ной суспензии гемоцитов. Первую иммунизацию проводят подкожно, вводя каждой крысе по 0,2 мл 50%-ной суспензии в смеси с 0,04 мл адъюванта Фрейнда. Последующие иммунизации проводят внутримышечно, вводя по 0,2 мл 50%-ной суспензии в смеси с 16666 и. е. пенициллина для предотвращения возможного инфекционного процесса. Перед первой иммунизацией берут кровь для определения наличия у крыс естественных антител против гемоцитов гу.сениц. Спустя 7 дней после последней им мунизации крысы обескровливаются. Полученную антисыворотку инактивируют при 56 С в течение 30 мин и хранят при 20 С.В результате получают ряд антигемоцитарных сывороток. Титр гемоцитоаглютининов 10 1:256 - 1:2048.Полученную антигемоцитарную сыворотку вводят гусеницам 6. тпе 11 опе 11 а 1 в период их развития Ч - Ъ 1 возрастов однократно в дозе 0,25 - 0,50 мкл каждой. Че рез 24 ч. после инъекции удаляют гемолимфу и пищеварительный тракт. Затемтело гусениц промывают физиологическим раствором 0,8% -ного хлористого натрия в дистиллированной воде.20 Для получения анти-антигемоцитарнойсыворотки гусениц гомогенизируют и разбавляют физиологическим раствором в соотношении 1; 1. Полученную массу многократно замораживают и оттаивают с целью разрушения клеток. Затем в течение 15 мин центрифугируют при 8000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость (анти-антигемоцитарную сыворотку) хранят при - 20+ 2 С,565621 Ф ор мула изобретения Составитель В. КосовеиРедактор Е. Месропова Техред А. Камышникова Корректор И, Позняковская Заказ 2632 1 Изд. Ьа 139 тираж 680 Подписное 1.ПО Государственного комитета СССР по делам изооретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская яаб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 Надосадочная жидкость - нти-антигемоцитарная сыворотка имеет светло коричневый цвет со слабо выраженным запахом, присущим запаху гусениц Сз, гпе 1 опе 1 а 1; кожных реакций при попадании на тело человека не вызывает.При попадании в тело насекомого антиантигемоцитарная сыворотка повышает патогенные свойства бактерий, что подтверждается микроскопическим анализом при усилении роста энтомопатогенных бактерий Вас, йцг 1 препз 1 з. Способ получения анти-антигемоцитарной сыворотки, отличающийся тем,5 что, с целью повышения активности водорастворимых белков против насекомых-вредителей, антиген берут из клеток тела насекомого и вводят их животным, из кровикоторых получают аптигемоцитарную сы 10 воротку для последующего введения ее втело насекомого, и из клеток тела насекомого выделяют затем анти-антигемоцитарную сыворотку,