Способ получения трихотецина

ОП ИСАНИЕ б 2891ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советскии Социалистических РеспубликН АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕДЬСТ ид-ву олннтельное к а(51) М. Кл й 15/О с присоединением заявкиГосударственный ноцитет Совета Министров СССР по девам изооретений н открытий72) Авторы изобретения хина, рацка Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологическ средств зашиты растений и бактериальных препаратов(71) Заявител 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИХО етение относится к микробиоыщленности и может быть иля получения препаратов, испборьбе с болезнями возделыви леса,тно производство препарата огич Изоб пол зовано демых врастенийИзве емых хотое дефицитное и доре 111. пользуюевое сыр тина, ис яшее Известен способ получения трихоцетина, при котором посевной материал выращивают на предварительно отобранном и сваренном пщене. Зля биосинтеза используют посевную среду, содержащую сахарозу, аммоний сернокислый, калий фосфорнокислый двухзам шенный, хлористый калий, кукурузный экстракт, молочную кислоту. Зля ферментации в среду, кроме перечисленных компонентов, вводят глицерин 21.Этот способ, однако, требует сложного приготовления посевного материала, использования в посевной и ферментационной средах дефицитного и дорогостоящего пищевого сырья, кроме того, процесс ферментации длителен. 25 Целью изобретения является упрощение приготовления посевного материала, удещеление сред и сокращение срока фермента Поставленная цель достигается тем, что сухой посевной материал готовят на сухих хлопьях геркулеса, инокулят выращивают на среде из гидролизных дрожжей, а ферментацию ведут на среде, содержащей кукурузную муку, хлористый магний, мел, глицерин, азотнокислый аммоний и двухзамешенный фосфорнокислый калий.П р и м е р, Сухой посевной материал в виде конидий гриба Тт сН 01 Нес 1 отп авеотп Ь получают путем выращивания на хлопьях геркулеса. Для этого 10 - 15 г хлопьев геркулеса, просеянных через сито с ячейками 4 мм, помешают в флаконы емкостью 250 мл и дважды сгерилизуют с интервалом в 24 час при 1 атм в течение 1 час. Затем флаконы с хлопьями геркулеса засевают 5 мл жидкой культуры гриба (вегетативный мицелий), предварительно выращенный на среде, содержащей,%: сахарозы 0,75-1,5; кукурузного экстракта 0,755289184220 об/мин при 26-27 С в течение 72 о96 час,Активность культуральной жидкости определяют методом диффузии в агар с использованием в качестве тест-культуры г ц ьа г 1- Отп тпотп 1111 огтпе.При использовании щтамма активностькультуральной жидкости при выраыивании напредлагаемых средах достигает 450-600мкг/мл, в то время как при выращиваниина средах, взятых за прототип, она составляет 250-360 мкг/мл Способ получения трихотецина, включающий выращивание гриба ТгсЬоОес 1 отп го 5 еотп Ь.на жидкой питательной среде, содержащей глицерин и фосфорнокислый калий,о т л и ч а ю ш и й с я тем, что, сцельюупрощения приготовления сухого посевногоматериала, удешевления питательной средыи сокращения срока ферментации, сухой материал готовят на хлопьях геркулеса, инокулят выращивают на гидролизных дрожжахс концентрацией 0,5-1,2%, а в ферментационную среду вводят 0,7-2,0% кукурузноймуки, 0,02-0, 1% азотнокислого аммония,0,01-0,04% хлористого магния и 0,0150,04% мела.Источники информации, прнятые во внимание при экспертизе;1. ьбосЬитг, , 1949, 44, 1-4(прототип),2. "Лабораторно- производственный регламент получения трихотецина." Московскийгосударственный университет им, М. В.Ломоносова, биологический факультет, 1969 г.(аналог). 1,5; КН 2 РО -0,05-0,2 ( М Н ю ) 60 -0,02-0,15 в течение 30-36 час на качалке со скоростью вращения 1 60-220 об/минПосле засева флаконы тщательно встряхивают и помещают в термостат с темпеоратурой 26-27 С на пять-семь суток дополучения ярко-оранжевых фпыляших" хлопьев сплошь покрытых конидиями гриба.Затем флаконы с конидиями гриба сушатв вакуум-сушильном шкафу при 25-27 Сои остаточном давлении 8-10 мм рт,ст.в течение одних-полутора суток.Подученным сухим посевным материаломзасевают колбы емкостью 750 мл, содержаших по 200 мл жидкой питательной среды, Формула изобретенияВ каждую колбу вносят по одной бактериологи 16ческой ложечке посевного материала, Жидкаяпитательная среда, используемая в колбах,содержит 0,5-1,2% гидролизных дрожжей в1 л водопроводной воды, рН 5,2-5,4, стерилизована при 1 атм в течение 1 час. Выращивают гриб в колбах на указанной средев течение 30-36 час на качалке с 160220 об/мин при 26-27 С,Выращенным вегетативным мицелием (инокулятом) засевают ферментационные колбы фемкостью 750 мл, содержащие 200 мл жидкой питательной среды, следующего состава,%: кукурузной муки 0,7-2 глицерина, 0,752, КН РОу 0,15-0,25, Ир 10 0,01-0,04,Й Нч М О0,02-0,1, мела 0,01 5-0,4,Йспользуемую в ферментационных колбахпитательную среду готовят следующим образом: все перечисленные выще компонентысреды растворяют в водопроводной воде, устанавливают рН 5,7-5,9 и стерилизуют при 351 атм в течение 1 час,Колбы засевают из расчета 5% вегетативного мицелия к объему ферментационнойсреды. Гриб выращивают на качалке с 160 Составитель С. КудрявцеваРедактор Д. Пинчук Техред М. Левицкая Корректор С. БолдижарЗаказ 5299/1 27 Тираж 723 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по дедам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб д, 4/5 Филиал ППП "Патентф, г, Ужгород, ул, Проектная, 4