Способ выделения синтетических нуклеозидмонофосфатов

Номер патента: 505640

Авторы: Кошкина, Ремизова, Фаворская

ZIP архив

Текст

111505640 Союз Советских Социалистических РеспубликОЛИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(43) Опубликовано 05.03.76, БюллетеньГосударственный комитет Совета Министров СССР о делан изобретений,открытий 5) Дата опубликования описания 14.06,7. М, Кошкина, Л. А. Ремизов рдена Ленина и ордена Трудового Красно рственный университет им. А, А. Жданова 54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СИНТЕТИЧЕСКИХ НУКЛ ЕОЗИДМОНОФОСФАТОВИзобретение относится к способу разделения и очистки нуклеотидов, в частности к способу выделения синтетических нуклеозидмонофосфатов (НМФ), позволяющему быстро получить препаративные количества НМФ, необходимых для проведения медико-биологических исследований.Известный способ выделения НМФ ионообменной хроматографией на сефадексе довольно сложен.С целью упрощения процесса предлагается синтетические препараты НМФ с высоким содержанием минеральных солей делить на катионообменниках на основе сефадекса в Н+- форме, проводя элюирование дистиллированной водой.Обычно используют 5 Е- или СМ-сефадекс Спри соотношении 140 - 150 мг разделяемой смеси на 80 в 1 г сефадекса,Разделяемая смесь может содержать максимум 28 - 30% НМФ, 4 - 45% одинакового по гетерооснованию нуклеозидфосфата и 68 - 80% минеральных солей (хлоридав и фосфатов),Предлагаемым способом ей загрузке 100 - 140 мг за 3 - 15 о выделить в чистом виде 30 - 40 го,продукта в виде водного одержащего минеральных солеП р и м е р. Очистка го препапри общ час можн мг целева сраствора, ней.синтетическо 1) Заявитель Ленинградский Знамени госурата дезоксицитидинмонофосфата (ДЦМФ).ДЦМФ, полученный фосфорилированиемдезоксицитидина 4-кратным избытком хлор- окиси фосфора, по дакным тонкослойной хроматографии на ДЕАЕ-целлюлозе (0,6 - 0,8 мэкв/г) в системе 0,02 н. соляная кислота содержит 17% ДЦМФ, 4% дезоксицитидиндифосфата (ДЦДФ) и 79% минеральных солей (хлориды и фосфаты).10 Очистку проводят на 5 Е-сефадексе в Н+- форме на колонке 63 ХЗ см, элюируя водой при скорости 3 мл/мин и объеме фракции 3,6 мл.Навеску (140 мг) ДЦМФ растворяют в 15 2 мл дистиллированной воды, наносят на колонку, промывают поверхность геля 2 Х 1 мл воды, заполняют колонку растворителем и начинают элюирование. Сначала собирают 240 - 250 мл элюата, содержащего ДЦДФ и минеральные соли. С фракции, имеющей оптическую плотность 0,500 (по спектрофотометру), начинают собирать ДЦМФ. Когда оптическая плотность раствора, пройдя через бесконечность, снизится до 0,500, сбор элюата, содержащего ДЦМФ, заканчивают. Общий объем элюата, содержащего ДЦМФ, составляет 170 мл. Время разделения (от момента загрузки колонки) 3 час. Собранный элюат обрабатывают раствором аммиака до слабощелочной зО реакции, упаривают в ротационном испарите505640 Таблица 1 ле при 10 - 15 С/5 - б лсм и сушат остаток ввакуум-эксикаторе над Р 20 з. Вес сухого остатка 23,8 лсг,Содержание в пробе, О/о Количество пробы,наносимой на колонку,лсгнуклеозид- минеральныхдпфосфата солей Очищаемый 5 НМФ Количественное определение выделенногоДЦМФ проводят на спектрофотометре СФА. В аналогичных условиях очищают цитидинмонофосфат (ЦМФ), аденозинмонофосфат (АМФ) и гуанозинмонофосфат (ГМФ). Состав смеси, наносимый на колонку, приведен в табл. 18 , 1,Спектрофотометрические характеристики выделенных НМФ, приведены в табл. 2. Таблица 2Формула изобретения на катионообменниках на основе сефадекса в Н+-форме, проводя элюирование дистиллированной водой.15 1. Способ выделения синтетических нуклеозидмонофосфатов ионообменной хроматографией на сефадексе, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса, синтетические препараты нуклеозидмонофосфатов с высоким содержанием минеральных солей делят 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют ЬЕ- или СМ-сефадекс Спри соотношении 140 - 150 лсг разделяемой смеси на 80 - 100 г сефадекса. Составитель А. КостТехред А, Камышникова Редактор Т. Шарганова Корректор В. Гутман Заказ 563/815 Изд.257 Тираж 576 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Ратсшская наб., д. 4/5

Смотреть

Заявка

2019338, 29.04.1974

ЛЕНИНГРАДСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. А. А. ЖДАНОВА

КОШКИНА ИРИНА МИХАЙЛОВНА, РЕМИЗОВА ЛЮДМИЛА АЛЕКСАНДРОВНА, ФАВОРСКАЯ ИРИНА АЛЕКСЕЕВНА

МПК / Метки

МПК: C07D 239/00

Метки: выделения, нуклеозидмонофосфатов, синтетических

Опубликовано: 05.03.1976

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-505640-sposob-vydeleniya-sinteticheskikh-nukleozidmonofosfatov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения синтетических нуклеозидмонофосфатов</a>

Похожие патенты