Способ получения биомассы

САН ИРЕТЕН ИЯ 30 Союз СоветскихСоциалистическиРеспублик Е Н Т У К(22) Заявлено 11 23) Приоритет 1 4.73 (21) 1903593/2804.72 (32) 16825/72, 1 я (33) дарственныи камитетета Министрае СССРделам изобретенийи открытий 3) Великобрита Опубликован) УДК 663.14(088,8) 5 г. Бюллетень3 та опубликования описания 05.0 2) Авторы изобретев ИностранцыШаффот и Клод Раймон Маги(Франция)ностранная фирмаПетролеум Компани ЛимитедВеликобритания) Жан-Амадрик дю 1) Заявител Дз итиш 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕ ИОМАССЪ Морфология на При выращивании на 2 г/л дрожжевого экстр 5 г/л пептона и 20 г/л а лонии с гладкой, тонкой верхностью. При вырап 1 боранда псевдомицелия тв ер до 1" среде, со акта, 10 г/л гара, образ бело-кре ивании па а не образуесреде держаще 1 глюкозы ются ко овой по гаре сей т. Болееотносится к микробиологичености, а именно к выращиварожжей на углеводорода Изобретениеской промышленнию кормовых днефти,Известен способ получения биомассы путем выращивания дрожжей вида Сапйда горсаз в условиях аэрации в питательной среде, содержащей в качестве источника углерода прямоцепочечные углеводороды с содержанием в молекуле больше 10 углеродны атомов, источник азота и необходимые минеральные соли, с последующим выделением биомассы из культуральной жидкости.С целью интенсификации процесса и возможности осуществления его в непрерывном режиме в неасептических условиях предлагают из вида Сапйда гор 1 са 1 з использовать штамм СВ М 6373.Штамм хранится в центральном музее культур грибов в Дельте, Голландия.Новый штамм имеет описанные ниже признаки,80% колоний гладкие иг 1 н слегка скрученные, Менее 20% скручены.Морфология на жидкой среде.При выращивании в трубкаМоно в жидкой 5 среде, содержащей 10 г/л гл 1 окозы, 5 г/,л пеитона, 2 г/л дрожжевого экстракта и дистиллированную воду, клетки штамма яйцеобразные, иногда почти круглые, 34% клеток име.ют размер 5 Х 10 мк, 66% - 10 Х 10 мк.1 д На среде, содержащей 100 г/л газойля,1,84 г/л фосфорной кислоты, 1,16 г/л лори- стого калия, 0,078 г/л гидроокиси магния, 0,024 г/л сульфата магния, 0,08 г/л сульфата железа, 0,004 г/л сульфата меди, 0,158 г/л 5 сульфата цинка, 1,8 г/л серной кислоты, 0,15г/л дрожжевого экстракта и водопроводную воду, клетки штамма имеют яйцеобразну 1 о форму, иногда почти круглую, ири этом 38% клеток имеют размеры 5 Х 5 мк, 54% 2 Э 5 Х 10 мк и 8% - 10 Х 10 мк.При выращивании в течении более 15 суток в сосудах с аэрированием и перемешиванием морфология клеток остается неизменной. К концу этого выращивания штамм име- ет более 52. псевдомицелия.Размножение происодит только почкованием.Биоимические особенносп 1:сбракивает гл 1 окйзу, Га лактозу, сапрозу, зо мальтозу, трегалозу;Заказ 8212 Изд. ЬЪ 1821 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР ио делам изобретений н открьгп й 113035, Москва, Ж, Раушскан наб., д. 4/5МОТ. Загорский филиал 3не сбраживает лактозу, мелибиозу, рафинозу, целлобиозу, генулин;усваивает глюкозу, галактозу, сахарозу,мальтозу, мелибиозу, трегалозу, ксилозу,крахмал, сс-метплглюкозид, сорбозу, 1-арабинозу, этанол, Р-маннит, рибит, ацетат, сухугенат;плохо усваивает лаптат, уитрат, пируват;не усваивает лактозу, мелибиозу, рафинозу, целлобиозу, инулин, Р-рибозу, рамнозу,Р-арабинозу, эритрит, галактит;усваивает мочевину;пе усваивает нитрат калия, желатин;усваивает - гексадекан, и-парафиньг изгазейля.Максимальная температура для роста40 С, оптимальная температура 32 С, температура хранения 15 - 25 С, Максимальнаяскорость роста на газойле 0,35.Пример 1. Периодическое выр ащивание,Штамм СВ 6373 выращивают в ферментере с рабочим объемом 1 л. Сосуд аэрируютс помощью трубчатого барботера, перемешивание ведут лопастной мешалкой.Состав среды, г/л: НзРО 4 1,84; КС 1 1,16;Мд(ОН)2 0,078; Мп 504 0,024; Ре 304 7 Н 200,08; Хп 504 7 НзО 0,158; Сц 504 5 Н 20 0,0004;дрожжевой экстракт 0,015; водопроводная вода.рН среды 4,5.Единственный источник углерода - газойль, полученный из Иранской нефти соследующими характеристиками: уд. вес 0,865;температура текучести + 10 С; содержаниепарафина 18 вес, в/в.115 мл газойля добавляют на каждый 1 лсреды. Ферментацию начинают добавлением1 г/л культуры штамма СВ 6373, выращенного на газойле; и ведут ее при аэрировании соскоростью 400 об. ч. Температура процесса32 С, рН поддерживают равным 4,5 добавлением водного аммиака, который также служит источником азота. Ферментацию прекращают через 15 ч,Результаты приведены нижеШтамм СВ 6373Фаза задержки, чЭкспоенциальпая фаза, ч 6Скорость роста, мг/л 0,3Бес биомассы через 15 ч, г/л 10,0Пример 2. Непрерывное неасептическое одпостадийное выращивание,Штамм СВ 6373 непрерывно выращиваютв ферментере в условиях (среда, температура, аэрация, перемешивание), приведенных впримере 1. Фермептер работает неасептическп 4в течение 717 ч. Скорость разбавления 0,2.Средняя производительность составляет 11,9г/л ч.Пример 3, Непрерывное неасеп 5 тическое двухстадп й ное выр ащивапие.Штамм СВ 6373 выращивают в ферментерес рабочим объемом б,б м в среде, состав которой приведен в примере 1.1 О Источником углерода служит газойль,полученный из Иракской нефти, имеющейследующую характеристику: уд. вес 0,865;температура текучести +10 С; интервал кипения 300 - 380 С; содержание парафинов15 18 вес во,На каждый литр водной питательной среды берут по 150 мл газойля в смеси и этусмесь подают в ферментер с расходом 1650 л/ч.В ферментере поддерживают температуру20 30 С и рН 4,2 при непрерывном добавлениигазообразного аммиака. Аэрацию ведут соскоростью 120 об/ч с применением вихревогоперемешивания.Непрерывно отводят весь продуктовый по 25 ток, т. е. 1650 л/ч и его пропускают во второй фермептер с рабочим объемом 12,6 м. Кпродуктовому потоку в 1650 л добавляют2500 л/ч свежей воды и смесь направляют вовторой фермептер, где поддерживают темпе 30 ратуру 30 С; аэрацию ведут с расходом80 об/ч с помощью вихревой мешалки. Работу ведут непрерывно со скоростью разбавления 0,33. Ферментеры работают пеасептически.35 Из второго фермептера непрерывно отводят продуктовый поток 4,150 л/ч (в нем содержится 8 г/л сухих дрожжей) и его декантируют.Затем дрожжи отделяют от отработанной4 О среды и промывают изопропанолом для удаления остаточных углеводородов. Способ получения биомассы путем выращивания дрожжей вида Сапд 1 да 1 гор 1 са 11 з в условиях аэрации в питательной среде, содержащей в качестве источника углерода прямоцепочечные углеводороды с содержанием в молекуле больше 10 углеродных атомов, источник азота и необходимые минеральные соли, с последующим выделением биомассы из культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса и возможности осуществления его в непрерывном режиме в пеасептических условиях, пз вида Сапд 1 да 1 гор 1 са 11 з используют штамм СВ ЛЪ 6373.