Способ исследования крови

Клаее 30 а,1.; АВТОРСНОЕ СВИДЕТЕЛЬСТВО НА ИЗОБРЕТЕНИЕ Г) Т 7,егоплпл с.и ййб С И А Н особа исследования видетельству И. И. Да я 1935 года (спр. о пе илина, заявленномурв.181280).ано 31 ,юля 1936 года. й.е 9 в у29 ноябр О выдаче авторского тельста опуб,ти В настоящее время предложено несколько способов счета кровяных пластинок (тромбоцитов), но большинствоиз них, как не удовлетворяющие требованию точности, не получило широкого распространения, Из наиболеечасто применяемых способов нужноупомянуть лишь о способе Фонио (Гопко)с модификацией его по Неффу (ХоеИ)и способе Раденбурга(йаЬйепЬцгр),Исследование по способу Фонио отнимает очень много, времени, требуетдовольно большого лабораторного навыка и все же не дает гарантии в достаточной точности подсчета. Модификация по Неффу сокращает, поавда,довольно значительно время исследования, но еще менее точна, чем ори.гинальный способ, и потому не можетбыть рекомендована.Методика Раденбурга, состоящая вразведении крови в смесителе Зон-мраствором цитрата натрия в пропорции 1:200, очень проста, но требуеточень длительной тренировки, так кактромбоциты в растворе лимоннокислого натрия несколько сморщиваются,.не имеют окраски и при близком соприкосновении с эритроцитами могутбыть не замечены,Предлагаемый способ отвечает двумосновным требованиям: сделать подсчеттромбоцитов точным и легко осуще-,ствимым даже для мало опытного ла-бораторного работника.Подыскание более подходящих жид-,костей основного раствора для сохрачо пения тромбоцитов и красителя произведено путем испытания целого ряда веществ, По испытании в качестве основных растворов хлористого натрия, лимоннокислого натрия, щавелевокислого натрия, фтористого натрия, сернокислой магезии, лимоннокисло о лития и др, выбор остановлен на поваренной соли. В качестве красящих веществ были испытаны эозин, метиленовая синь, конго красная, аурамин, раствор Люголя, красная кровяная соль, желтая кровяная соль, фуксин, маладитовая зелень и др., в результате чего выбрана, как резко выраженная протоплазматическая краска, малахитовая зелень, относящаяся к группе диаминотрифенилметановых красок, которые включаются в ряд розанилиновых красок.Жидкость для подсчета тромбоцитов должна быть следующего состава:2,о-й водный раствор повареннойсоли - 53 см, 1/о-й водный раствор милахитовой зелени в слР.Изготовленную жидкость необходимо фильтровать через бумагу. Жидкость при стоянии осадка краски не дает.Надо заметить, ч го при таком соотношении составных частей жидкости достигается наилучшая видимость тромбоцитов. При этом особенно важно точно изготовлять 1%-й раствор малахитовой зелени.Ход исследования, В смеситель для эритроцитов до метки 0,5 быстро набирается кровь, а затем насасывается до метки 101 предлагаемая жидкость.Наполнив смеситель, его слегка встряхивают. К счету можно приступитьчерез 5 минут после взятия крови. Смеситель взбалтывается 1 минуту для получения р авномерной взвеси форменныхэлементов Камера заряжается и оставляется стоять 3 минуты. Затем при.ступают к счету. Тромбоциты можносчитать в течение 45 минут от началавзятия крови.Для счета мы пользовались камерои Тома-Оейсса. Тромбоциты подсчитьваются в 10 или 15 больших квадратах (5 больших квадратов равны 80маленьким), Вычисление общего числатромбоцитов в 1 лм" производится также, как и при подсчете эритроцитов.Счет осуществляется легко, так кактромбоциты в камере распределяютсяравномерно (при быстром взятии крови), они большей величины, чем привзятии крови по американскому способуи, кроме того, интенсивно окрашеныв зеленый цв:т, Эритроциты получаютслегка зеленов:чый о 1 тенок и могутбыть сосчитаны здесь же в первые20 минут. Далее наступает частичноеих растворение,Возможность одновренного счисленияэритроцитов также является преимуществом способа.В некоторых случаях гипертромбзцитоза находящиеся в группах пластинкитесно соприкасаются друг с другом,что затрудняет подсчег.Если вызвать сморщивание пластинок,то промежутки между ними увели 1 и-,ваются, и подсчет облегчается, что приводит к заключению, что в этом случае целесообразнее использовать кровьс раствором лимоннокислого натрия,несколько сморщивающего пластинки,прибавив к нему малахитовую зеленьдля окраски последних.При такой модификации метода Раденбурга тромбоциты хорошо окрашиваются в зелень 1 й цвет, вследствиесморщивания лежат порознь и могутбыть легко сосчитаны даже при резковыраженном гипертромбоцитозе.Жидкость при этом приготовляетсяех 1 ешроге по следующему рецепту:,3%-й водный раствор лимоннокислогона 1 рия - 38 объемных частей (лучше ,пользоваться 3,5% - 4% - 4,5% - 5%-мирастворами), 1%-й водный раствор малахитовой зелени - 1 объемная часть,Практически жидкость приготовляется так, При работе однокубиковойпипеткой в колбочку вносятся 3,8 гллимоннокислого натрия, Сюда же до бав ляется 0,1 см малахитовой зелени.Смесь пропускается через бумажныйфильтр.С полученной комбинированной жид.костью производится исследование,Счет начинают через 15 минут послевзятия крови, Зона счета - 30 минут.Подсчет эритроцчтов, при одном омент ном взятии крови, можно произвести в первые 15 - 20 минут, далееэритроциты начинают частично растворяться, что можно проследить, наблюдая появление теней.Предлагаемая методика обладает большой точностью, онапроста и доступна,значительно ускоряет подсчет тромбоцитов, по сравнению с исследование:.:по Фонио, делает подсчет их болеелегко осуществимым, по сравнениюс таковым при выполнении анализа иоспособу Раденбурга. Преимуществомпредлагаемой методики является такжевозможность счисления эритроцитовпро одномоментном взятии крови,При резко выраженных гипертромбо.цитозах наиболее целесообразно производить счет тромбоцитов по видоизмененному методу Раденбурга,Предмет изобретения.1, Способ исследования крови, отличающ;йся тем, что для окраски тромбоциов применяют раствор хлористого натрия и малахитовой зелени,2. Прием выполнения способа по п. 1, отличающийся тем, что раствор для окраски тромбоцитов состоит из 53 частей 2%.го раствора хлористого натрия и 1 части 1%-го раствора малахитовой зелени.3. Видоизменение способа по пп. 1 и 2, отличающееся тем, что для окраски тромбоцитов применяют смесь из 38 о ъемов 3%-го водного раствопа лимоннокислого натрия и 1 объема 1%- о раствора малахитовой зелени,