Способ получения препарата орнитозного гемагглютинина

) Заявлено с присоединением заявки М -Приоритет -осударствениый комитетСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий. А. Вишняков Заявитель Лснинградский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ОРНИТОЗНО ГЕМАГГЛ ЮТИ Н И НАНадосадочный слой,ходное количество гемаг 25 будитсля орнитоза, в от целой аллантоисной жи ют, охлаждают до 0 С в батывают р-пропиолакт 1; 30001: 4000 (коне Зз держивают сугки при 4жащин все псина и 10 з в возт 07 втакже измерям льде и обрасоотношснни азведснис), вы 72 час при содер глютин пичие о дкости тающс оном в чное р С илиИзобретение относится к области медицины и может быть использовано для диагностики заболеваний группы пситтакоза-венерической лимфогранулсмы-трахомы.Известен способ получения препарата орнитозного гсмагглютинина путем заражения куриных эмбрионов возбудителем орннтоза, отсасывания аллантоисной жидкости и ее двукратной обработки в течение 1 часа при 37 С р-пропиолактеном в разведении 1: 2000.С целью повьннения активности и стабильности препарата аллантоисную жидкость охлаждаот до 0 С, обрабатывают р-пропиолактоном в соотношении 1: 3000 - 1: 4000 к ее обьему и выдерживают в течение 1 - 5 суток при температуре от - 20 до +4 С.П р и м е р 1. Заражают 8 - 9-днсвныс развивающиеся куриные эмбрионы (КЗ) в аллантоисную полост желточным мешком КЭ, инфицированным возбудителем орнитоза или пситтакоза, в разведении 1: 100. Через 5 дней инкубации при 37 С куриные эмбрионы помещают на 12 час в рефрижератор при 4 С, 1 таралслльно делают посев для контроля на наличие посторонней бактериальной флоры.Чсрсз 48 час пробирки со стерильной аллантоисной жидкостью центрифугируют при 3000 об,мин в течение 15 мин с целью удаления клеточных элементов и слизи, Лллантоисную жидкость сливают, измеряют ее общее количество (объем) и охлаждают в тающем льде до 0 С.Разведение р-пропиолактона делают на0,01 М фосфатном буферном растворе с 0,850 в МаС рИ - 7,0, также охлажденном до 0 С,в соотношении 1; 100, который добавляют к обьсму обрабатываемой охлажденной жидкости в соотношении 1: 20 - 1: 30 так, чтобы конечная концентрация р-пропиолактона до стигала соотношения 1:2000 - 1:3000. Послетщательного смешивания в течение 3 - 5 мнн в тающем льде сосуд с аллантоисной жидкостью помещают в комнатный рефрижератор, поддерживающий температуру в пределах 2 б 4 С, на 3 - 5 дней, Затем препарат подвергаютлиофильной сушке или хранят при - 20 С.П р и м с р 2, Способ получения и обработки аллантоисной жидкости отличается тем, что общий слив ее цснтрифугируют прн 20 10000 - 13000 об/мин в течение 1 - 1,5 часпри 0 С в центрифуге ЦЛР.465423 4концентрацией его в 2 - 4 раза. Гемагглютипирующая активность лиофилизированныхпрепаратов не изменилась в течение года,5 Предмет изобретения Способ получения препарата орнитозногогемагглютинина путем заражения куриных эмбрионов возбудителем орнитоза, отсасыва ния аллантоисной жидкости, обработки ее1-пропиолактоном и лиофилизации, отличаюи 1 ийся тем, что, с целью повышения активности и стабильности препарата, аллантоисну 1 о жидкость охлаждают до 0 С, обрабатывают 15 1 з-пропиолактоном в соотношении 1: 3000 -1: 4000 к ее объему и выдерживают в течение 1 - 5 суток при температуре от - 20 до +4 С,Составитель С. МалютинаТехред 3. Тараненко.едактор Е. Дайч Корректор О. Тюрина Заказ 4362 Изд. М 1325 ЦНИИПИ Госуда 1)ствепного комитета по делам изобретений Москва, Ж, РаушскавМОТ, Загорский филиал 3- 20 С, подвергают лиофильной сушке и хранят при - 20 С,Осажденный возбудитель может быть использован для приготовления различных вирусных препаратов (антигенов, аллергена, вакцин),Все пробы контролируются на наличие живого возубдителя путем внутрицеребрального введения 0,03 мл препаратов белым мышам 57 гр. с последующим через 7 дней слепым пассажем, Срок наблюдения за животными 14 дней, По отсутствию гибели животных и возбудителя в мазках-отпечатках судят о стерильности препаратов.Титр гемагглютинина в препаратах (после обработки Р-пропиолактоном и лиофильной сушки) снижался по сравнению с исходной Тираж 529 11 одписное Совета Министров СССРи открьпийпаб., д. 4/5