Питательная среда для культивирования aspergillus foetidus — продуцента ферментов

присоединением заявкиГосударственный комитет Совета Министров СССР па делам изобретений и открытийБюллетень26 Дата опубликования описания 18.12(71) Заявите Всес зный научно-исследовательский институт биосинт белковых веществ(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯАЯРЕК 611.ШЯ ГОЕТ 1 Р 1)Я - ПРОД УЛ ЬТИ ВИ РОВАН ИЯ ЦЕНТА ФЕРМЕНТО при 32 - 36 С. представляет соб ды, проросшей ми Готовую культ 5 ливают водой в к весу абс. сухо дут в течение 40 отжимают до вл собирают и испо 10 деления фермент теин азы. Выделение пр ем этиловым сп смеси 70 - 72%,15 Полученный ос рованием при 300 Ниже приведен литических и п полученных с при 20 тательной среды иепара иртом проводяри конц сажденитрации в Изобретение относится к микробиологической промышленности,Известна питательная среда для культивирования Азрегр 11 цз 1 ое 1 Ыцз - продуцента ферментов, содержащая пшеничные отруби, свекловичный жом и минеральные соли.С целью интенсификации биосинтеза протеолитических ферментов, в частности кислой протеиназы, в предлагаемой среде пшеничные отруби и свекловичный жом содержатся в количествах соответственно равных, %: 87 - 74 и 10 - 20, из минеральных солей используют нитрат натрия в количестве 3 - 6%.Сущность изобретения заключается в следующем.Выращивание плесневого гриба Азрегр 11 цз 1 ое 1 Ыцз проводят на питательной среде, содержащей пшеничные отруби 87 - 74%, свекловичный жом 10 - 20% и нитратные соли щелочных металлов 3 - 6%, в течение 48 час Выросшая культура гриба ой остатки питательной срецелием.уру гриба измельчают и засоотношении 1: 2,5 - 1: 3,5 й культуры. Экстракцию ве - 60 мин, после чего массу ажности 60 - 62%, фильтрат льзуют для дальнейшего выного препарата кислой продок отделяют центрифугиоб/мин. таблица активности пекторотеолитических ферментов, вменением предложенной пиизвестных,Состав среды, ,4 ед/г ед/г от контроля от контроля 10 - 20 свекловичного жома 86 - 76 пшеничных отрубей 4 ИаИО,10 - 20 свекловичного жома 86 - 76 пшеничных отрубей 4 КИОз9 - 21 свекловичного жома 91 - 79 пшеничных отрубей 9 - 21 свекловичного жома 91 - 79 пшеничных отрубей 6 ИаХО,300 90000 37,2 3,08 288 86240 35,6 2,96 54200 180 75,0 6,04 70000 230,3 33,8 2,72 При изменении состава питательной среды (среда Мя 3) подавляется биосинтез пектолитических ферментов и усиливается биосинтез кислой протеиназы, активность которой увеличивается на 80%. При оптимизации питательной среды (среды 1, 2), т. е. добавлении нитратных солей щелочных металлов в количестве 3 - 5%, резко увеличивается активность кислой протеинозы (96240 в 1000 ед/г, т. е. на 288 - 300%) и резко снижается активность пектолитических ферментов, При увеличении концентрации нитратных солей щелочных металлов до 6/о, активность кислой протениозы снижается до 70000 ед/г,П р и м е р (контроль) . 25 г свекловичного жома, 74 г пшеничных отрубей и 1 г серно- кислого аммония смешивают, увлажняют 120 мл воды до влажности 60%. Увлажненную питательную среду помещают в колбу на 1 л и стерилизуют в течение 60 мин, при 1 атм. Простерилизованную питательную среду охлаждают до 37 С и засевают 10 мл водной суспензии конидий гриба. Засеянную питательную среду перемешивают и раскладывают в кюветы по 200 г (толщина слоя 3 см), Выращивание проводят в течение 38 - 40 час при 28 - 32 С.Готовую культуру гриба измельчают и заливают водой в количестве 320 мл, экстрагируют в течение 60 мин. По окончании экстракции массу отжимают до влажности 62%, фильтр ат собирают. Выделение ферментного препарата проводят этиловым спиртом при концентрации в смеси 73,5%. Полученный осадок отделяют центрифугированием при 3000 об/мин.Активность кислой протеиназы в культуре составляет 30000 ед/г, а ферментном препар ате - 290000 ед/г. П р и м е р 2. 15 г свекловичного жома,81 г пшеничных отрубей и 4 г КаИО, смешивают, увлажняют 120 мл воды до влажности 60%. Увлажненную питательную среду 5 помещают в колбу на 1 л и стерилизуют в течение 60 мин при 1 атм. Затем среду охлаждают до 37 С и засевают 10 мл водной суспензией конидий гриба.Засеянную питательную среду перемеши вают и раскладывают в кюветы по 200 г(толщина слоя 3 см). Выращивание проводят в течение 48 час при 32 - 36 С. Готовую культуру гриба измельчают и заливают водой в количестве 210 мл. Экстракцию про должают в течение 60 мин, после чего отжимают до влажности 62 О/О, фильтрат собирают и используют для выделения препарата.Выделение ферментного препарата проводят этиловым спиртом при концентрации в 20 смеси 71/,. Полученный осадок отделяютцентрифугированием при 3000 об/мин.Активность кислой протеиназы в культуресоставляет 90000 ед/г, ферментном препарате - 93 8000 ед/г.25 Предмет изобретения Питательная среда для культивирования 30 Азрегр 11 цз 1 ое 1 Ыцз - продуцента ферментовсодержащая пшеничные отруби, свекловичный жом и минеральные соли, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью интенсификации оиосинтеза протеолитических ферментов - 35 кислой протеиназы, пшеничные отруби исвекловичный жом содержатся в количествах соответственно равных, вес, %: 74 - 87 и 10 - 20, из минеральных солей используют нитрат натрия в количестве 3 - 6.