Способ получения фермента на носит

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социапистицеских Респубттик(32) Приоритет -Опубликовано 05,02,74, Бюллетень5Дата опубликования описания 29 Л.75,(51) М. Кл. С 120 13/10С 07 д 7/02 Гасударственный комитет Совета Министров СССР оо делам изобретений и открытий(71) Заявитель Таллинский политехнический институт(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТА НА НОСИТ Изобретение относится к производству ферментных препаратов, а именно к способам получения фермента на носителе.Известный опособ получения фермента наносителе, предуаматривающий приготовление расвворов фермента с мономером и катализатора, смешивание этих распворов с последующей полимеризацией полученной смеси, не обеопечивает получения фермента на носителе в виде гранул.Для получения фермента на носителе в видегранул в предлагаемом способе смесь перед полимеризацией подвергают вибрации, а полимеризацию осуществляют в не смешивающемся с водой растворителе, например вазелиновом масле, при освещении.При этом полимеризацию осуществляют внепрерывном потоке, например, в колонке, внутренняя стенка которой обработана кремнеорганичеаким соединением.Вибрацию смеси осуществляют в процессеподачи ее на полимеризацию через вибрирующий капилляр.Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.Готовят расвворы фермента с мономером икатализатора и затем полученные растворы смешивают. Полученную смесь подвергают последующей полимеризации в не смешивающемся с водой растворителе, например вазелиновом масле, при освещении,Для предотвращения,преждевременной полимеризации исходной смеси растворов пос ледние готовят раздельно и смешивают непосредственно перед подачей на полимеризацию.При этом полимеризацию осуществляют внепрерьовном потомаке, например, в стеклянной колонкевнутренняя стенка которой обрабо тана кремнеорганичеоким соединением. Обработка таким соединением предотвращает прилипание материала к стенькам колонки, а освещение обеспечивает необходимую скорость полимеризации.15 Для получения однородных микрогранултребуемого размера реакционную смесь подвергают вибрации, которую осущесввляют в процессе подачи ее на полимеризацию через вибрирующий капилляр.20 В качестве исходных ферментов применяютгидролазы, оксидоредуктазы или трансферазы. Носитель получают из растворимых в,воде электронейтральных, иатионных или анионных мономеров, содержащих достаточное количе ство бифункцпонального смешивающегоагента.Прим е р. Для связывания пнвертазы в полиакриламидный гель в установке непрерывного действия готовят растворы: мономеров и 30 фермента путем смешивания 5 объемов раст414301 Составитель А. Бражникова Техред Т, Ускова Корректор И. Позняковская Редактор Л, Гончарова Заказ 809/7 Изд.457 Тираж 456 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретенийи открытий. Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Полиграфическое объединение Полиграфист Управления издательств, полиграфии и книжной торговли Мосгорисполкома. Москва, ул. Макаренко, 5/16, вора инвертазы с активностью 100 международных единиц в 1 мл и 5 объемов смешанного раствора 18,6% акриламида и 1,4% 1 ч-метилен-бис-акриламида; и катализаторов - из 0,5 ч. надсернокислого аммония, 0,5 ч. диметиламинопропионитрила, 0,02 ч, рибофлавина в 10 ч. раствора.Все растворы готовят в 0,05 М ацетатном буфере,Приготовленные растворы подают с одинаковой скоростью в смеситель, а полученную реакционную омесь через вибрирующий капилляр в стеклянную, колонку, внутренняя стенка которой обработана кремнеорганическим соединением.В ту же колояку вводят вазелиновое масло со скоростью, превышающей в 10 раз скорость ввода реакционной смеси.Образующаяся в верхней части колонки эмульсия стекает через интенсивно освещаемую колонку, проходя освещенную зону в течение 3 - 5 мин.Из нижней части коловки поступает суспензия полученньгх микрогранул фермента в масле, которые затем отделяют от масла центрифугированием и промывают петролейным эфиром или раствором поверхностно-активного вещества. Активность полученного фермента определяют в потоке раствора сахарозы при 30 С, при этосом она равна 30 ед/ил, что соответствует выходу 78",о от теоретического.5 Микроскопическая проверка полученныхгранул подтверждает их сферичность. Пр едм ет изобретения1. Способ получения фермента на носителе, 10 предусматривающий приготовление растворовфермента с мономером и катализатора, смешивание этих растворов с;последующей полимерпзацией полученной смеси, отличающийся тем, что, с целью получения фермента на носи теле в виде гранул, смесь перед полимеризацией подвергают вибрации, а полимеризацию осуществляют в не омешивающемся с водой распворителе, например вазелиновом масле, при освещении.20 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что полимеризацию осуществляют в непрерывном потоке, например, в колонке, внутренняя стенка которой обработана кремнеорганичеоким соединением.25 3, Способ по пп. 1 - 2, отличающийся тем,что вибрацию смеси осуществляют в процессе подачи ее на полимеризацию через вибрирующий капилляр.