Способ контроля содержания в хлорелле

Союз Советских Социалистических Республик. Кл. А 011 т 13/00С 12 Ь 108 иоритет Комитет ло делам изобретений и открыти лри Совете Министров СССРпубликовано 20,1 Ч,1973. Бюллетень20ата опубликования описания 29.Л.1973 582.263 АвторыизобретенияЗаявители г А, М. Синюхин и М. К, Кундзиньтитут биологии АН Латвийской ССР и Всесоюзный научноисследовательский институт лекарственных растений СПОСОБ КОНТРОЛЯ СОДЕРЖАНИЯ В ХЛОРЕЛЛЕОТСОДЕРЖАЩИХ ПОЛИСАХАРИДОВ В ПРОЦЕССЕВЫРАЩИВАНИЯ лочке хлореллы измеряют коэффициент па. ляризации отобранных клеток хлореллы и по калибровочной кривой судят о величине накопленных азотсодержащих полисахаридов. В зависимости от этой величины вводят коррективы в технологический процесс, а именно при падении коэффициента поляризации в суспензию вводят дополнительные порции источников азотистого обмена и углеводородного питания.Перед измерением коэффициента поляризации клеток хлореллы из них следует удалить минеральные соли путем введения лимонной кислоты с последующим выведением ее центрифугированием, промывкой и установлением необходимой плотности клеток хлореллы центрифугирова нием.Предлагаемый способ обеспечивает объективность и точность контроля.На чертеже представлена калибровочная кривая зависимости выхода азотсодержащих полисахаридов от коэффициента поляризации,Предл дующим Из со лей отб суспенз было п массыществляется сл дорос.объем можно сырой новых Изобретение относится к микробиологии.Известны способы контроля содержания вхлорелле азотсодержащих полисахаридов привыращивании, предусматривающие отбор клеток во время выращивания и последующее 5наблюдение за их морфологическими изменениями, а также наблюдение за интенсивностью фотосинтеза и естественной люминесценции клеток.Однако при выращивании хлореллы с целью получения из нее азотсодержащих полисахаридов эти способы неприемлемы, ибоморфологические изменения не находятся впрямой зависимости от максимального накопления азотсодержащих полисахаридов, а интенсивность фотосинтеза не отражает первичных изменений в физиологическом состоянии клеток, приводящих к изменению в накоплении азотсодержащих полисахаридов. Естественная люминесценция указывает на состояние хлореллы, а не на жизнеспособностьклеток,Предлагаемый способ основан на том, чтомежду коэффициентом поляризации клетокхлореллы и способностью накапливать азотсодержащие полисахариды наблюдается определенная зависимость,Согласно предлагаемому способу для обеспечения возможности максимального накопления азотсодержащих полисахаридов в обо агаемый способ особразом.судов для культивирования вирают пробу клеток, причеми должен быть таким, чтобылучить достаточное количествохлореллы для покрытия плат379233 ражают изменения состояния хлореллы в первичной обратимой фазе, поэтому, получив значение этого коэффициента, корректируют технологический процесс, т, е. при пеобходи мости увеличивают приток в питательнуюсреду источников азота и углерода.Возрастающее при этом значение коэффициента поляризации свидетельствует об увеличении жизнеспособности хлореллы и уве личении выхода азотсодержащих полисахаридов.Максимальный выход азотсодержащих полисахаридов соответствует коэффициенту поляризации, лежащему в пределе 9 - 11.15 При дальнейшем увеличении коэффициентаполяризации выход азотсодержащих полисахаридов не возрастает. Предмет изобретения201. Способ контроля содержания в хлореллеазотсодержащих пол исахаридов в процессе выращивания, предусматривающий отбор живых клеток хлореллы, отличающийся тем, что, 25 с целью объективности и точности контроля,измеряют коэффициент поляризации отобранных клеток хлореллы и по калибровочной кривой судят о величине накопленных азот- содержащих полисахаридов.30 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что,перед измерением коэффициента поляризации из клеток хлореллы удаляют минеральные соли.3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, 35 что удаление минеральных солей из клетокхлореллы осуществляют путем введения в них лимонной кислоты с последующим выведением ее, например, центр ифугированием, промывкой и установлением необходимой плот ности клеток хлореллы центрифугированием. Выход,Составитель М. АндрееваРедактор М. АникееваТехред Л, БогдановаКорректор Н, Аук/ 2 5 1 5 б 7 8 У Типография, пр. Сапунова, 2 пластинчатых электродов в измерительной ячейке,В суспензию вводят лимонную кислоту в коли;сстве достаточном для доведения рН ее до 3,5 и взбалтывают в течение 1 мин. Вслед за этим суспензию центрифугируют в течение 1 мин при 2500 д. Жидкость декантируют, осадок суспендируют дистиллированной водой до объема 0,5 л и центрифугируют вторично.Осадок суспендируют бидистиллятом и переносят в центрифужные пробирки, служащие также измерительной ячейкой. Центрифугирование проводят при 3500 д, доводя плотность осадка до постоянного значения, в центрифуге с термоизоляцией.Затем измерительную ячейку с осадком помещают в ультратермостат, поддерживая температуру с точностью до -0,1 С на уровне средней температуры вырашивания хлореллы,В термостате ячейку затемняют. Затем измеряют коэффициент поляризации подготовленной пробы клеток хлореллы, Измеряют электрические параметры хлореллы по компенсационной схеме, позволяющей проводить измерения коэффициента поляризации па 10 - 12 точках частотного диапазона в пределах 10 мин.По полученному значению с помощью калибровочной кривой, приведенной на чертеже, определяют выход азотсодержащих полисахаридов,При коэффициенте поляризации равном 1,4 - 2,2 выход азотсодержащих полисахаридов составляет около 1,0 о/е, при коэффициенте поляризации равном 4,0 - 7,2 выход азот- содержащих полисахаридов составляет 2,1 - 2,6 , т. е. увеличивается в два раза и более.Изменения коэффициента поляризации отЗаказ 1827/Н Изд. Ло 1459 Тираж 523 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий прн Совете Министров СССРМосква, Ж-З 5, Раушская наб., д. 4/5