Способ экспрессной диагностики холерных вибрионов

Гф 2,ОП ИСАЯ ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СветскикСоциалистическихРеспублик о 1371804(51)М. Кл з С 12 Я 1/04 Государственный комитет СССР оо делам изобретений н открытий(54) СПОСОБ ЭКСПРЕССНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРНЫХВИБРИОНОВ Находящиеся в исследуемом материале холерные вибрионы при своем дви.жении сталкиваются с эритроцитаья, сенсибилизированными специфическим гамма-глобулином, и прикрепляются к ним, Адсорбировавшиеся вибрионы, пытаясь оторваться от эритроцита; совершают при этом резкие, типичные для вибрионов, движения и увлекают за собой эритроциты. Изобретение относится к медицине,Известен способ экспрессной диагностики путем нанесения материала, содержащего ьякроорганизмы, на предметное стекло, добавления эритроцитов, сенсибилизированных специфическим гамма-глобулином, и визуального учета реакции.Однако обнаружить холерные вибрионы указанным способом можно только в чистой культуре, при наличии посторонней подвижной микрофлоры диагностика невозможна.Целью изобретения является разработка способа, позволяющего иденти фицировать холерные вибрионы в присутствии посторонней микрофлоры без выделения чистой культуры.Достигается это тем, что учет результатов реакции проводят под фа зово-контрастным микроскопом по наличию специфической реакции антигенантнтело, морфологии и подвижности вибрионов.П р и м е р. Готовят препарат лиофилизированных формализированных эри" троцитов барана, не сенсибилизированных (контрольных) и сенсибилиэированных гамма-глобулином, выделенным из холерной О-сыворотки (опытных). На предметное стекло наносят петлей диаметром 4 мм каплю 0,5-ной взвеси в физиологическом растворе зритроцитов, сенсибилизированных специфическим газета-глобулином. В каплю эритроцитов вносят петлю исследуемого материала (нативные испражнения, вода,пленка с первого пептона), перемешивают и покрывают стеклом.На этом же стекле ставят контроль, который представляет собой раздавленную каплю из смеси контрольных эритроцитов и исследуемого материала.Подготовленный препарат помещают во влажную камеру при 37 С на 10 мин, а затем просматривают под микроскопом, используя фазово-контрастное устройство371804 Формула изобретения Техред А. Вабинец Корректор М. Коста Редактор Е. Месропова Тираж 531 ,Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская, наб., д. 4/5Заказ 8642/49 Филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 При обнаружении 2-3 подвижных эритроцитов с адсорбировавшимися на них вибрионами дают заключение о наличии в исследуемом материале холерных вибрионов.Заключение основывают на совокупности трех признаков: наличие специфической реакции антиген-анти- тело, морфология вибриона, подвижность вибриона.В контрольном препарате обнаруживают эритроциты, спокойно плывущие во взвешенном состоянии или неподвижные. Холерные вибрионы или посторонние бактерии, сталкиваясь с несен сибилизированными эритроцитами, не адсорбируются на них. Чувствительность предлагаемого способа при исследовании нативных нефильтрованиых испражнений, зараженных холерными вибрионами, 1 мпн. микробных клеток в 1 мл. Результаты анализа с помощью предлагаемого способа получают через 10-15 мин от начала исредования подозрительного материала.С первой пептонной воды холерные вибрионы обнаруживают предлагвевим способом через 6 ч при наличии в посевной дозе испражнений 1000 микробных клеток. В воде холерные вибрионы обнаруживают при концентрации 100 тысяч микробных клеток в 1 мп.При подращивании чувствитель-. ность повыаается.Препарат лиофилизированных эритроцитов, сенсибилизнрованных гаммаглобулином, может храниться в течение полутора лет при 4 О С без снижения активности. Способ экспрессной диагностикихолерных вибрионов путем добавленияк сследуемому материалу эритроцитов, сенсибилизированных специфическим гамма-глобулиноы, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью идентификации холерных вибрионов в присутствии посторонней микрофлоры,учет результатов реакции проводятпод фазовоконтрастным микроскопом д пс наличию специфической реакцииантиген-антитело, морфологии и подвижности вибрионов.