Способ получения моноили дифосфатов (урацилил)или (пуринил)диоксиалканов

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советских Социалистицеских Республик(22) Заявлено 10.06.70 (21) 1446324/2 Кл.е С 07 О 239/28С 07 О 473/00 С 07 Р 9/09 заявкис присоедине Государстеенный комитетСоаета Министрое СССРпа делац изобретенийн отирытий) Дата опу икова ния описания 29,11.7) Заявител Институт органическогосинтеза АН Латвийской ССР ЛИ ДИОФОСФАТОВ М, - (УРАЦИЛИ КСИАЛКАНОВ Изобретение относится к способу полученияновых органических соединений, которые могутбыть рассмотрены как отдаленные аналоги природных мононуклеотидов. Полимеризация или поли.конденсация этих соединений приводит к получению модельных олигомеров, структура которыхнапоминает строение нуклеиновых кислот. Подобнопоследним, такие модельные олигомеры способныобразовывать вторичные структуры или гибридизироваться между собой с образованием комплексов,обладающих сходством с двухнитчатой спиральюприродных или синтетических (полученных фермеитативной полимеризацией мононуклеотидов)нуклеиновых кислот,Новые моно и дифосфаты М, (урацилил)- иЙ. (пуринил) -диоксиалканов получены путемфосфорилирования исходных Й 1 - (урацилил) - ий (пуринил) - диоксиалканов. Целевые продуктывыделяют известными приемами,П р и м е р 1. К 30 мл стандартного раствора 1пиридиновой соли цианзтилфосфата добавляют10 мл безводного пиридина и упаривают досуха при30 С ( и в дальнейшем упаривание и отгонку растворителей проводят при температуре 30 С) в вакууме,Операцию повторяют три раза. Затем к остат(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНО ИЛИ Н, - (ПУРИНИЛ)- 9 - (1,4- диоксибутил) - пурина и 15 мл безводного пиридина, Смесь упаривают досуха в вакууме, растворяют в 180 мл безводного пиридийа, добавляют раствор 8,2 г (0,04 моль) дицикло. гексилкарбодиимида в 10 мл безводного пиридина и выдерживают при комнатной температуре двое суток, За это время вьщеляется обильный осадок дициклогексилмочевины,К реакционной массе, не отфильтровывая дициклогексилмочевину, добавляют 4 мл воды и оставляют стоять в течение 1,5 час, Образовавшуюся массу упаривают в вакууме досуха, добавляют80 мл воды и еще раз упаривают в вакууме. Операцию повторяют, добавляя 20 мл воды, К остатку добавляют 200 мл 4 Н ИОН и кипятят 45 мин, ох.лаждают и выдерживают при 0 С в течение 1,5 час.Выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат про.пускают через ионообмнную смолу Ооччех 50 (Нф) и элюируют водой, Злюат уцаривают в вакууме до 100 мл; выпавший белый хлопьевидный осадок (0,6 г), представляющий собой 6 амино - 9 - (1,4- дифосфатбутил - 2) - пурин, отфильтровывают.Прибавляя раствор гидрата окиси бария доводят рН фильтрата до 6,5, выпавший осадок фосфата332727 Составитель Л. Пснясва Тсхрсд Н. Андрсйчук корректор П.МакаРевич Редактор О. Левина Заказ 016/53 Тираж 553 Подписное П 11 ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 1 3035, Москва, Ж, Раушская наб.,д.4/5фипиап ППППатент", г. Ужгород, ув. Проектная.4 Эбария центриф 11 гируют. рН фильтрата после центрифугирования суспернатента доводят до 7,5 и осаждают дополнительно 0,3 г 6 - амино . 9 - (1,4 .дифосфатбутил - 2) пурина двукратным объемомэтанола. Общий выход 35,5%.Наидено,%: С 28,58; Н 5,15, й 18,06; Р 1 б,17.С,нй,саРВычислено, %: С 28,20; Н 3,94; й 18,26; Р 18,26УФ-спектр: смаке 262 мм (0,1 и. йаОН); смаке261 мм (0,1 Н. НС)рКа, 3,2; Кай 7,0,П р и м.е р 2. К 50 мл раствора пирндинневой.соли 8 - цнанэтилфосфата в пиридвю (50 моль)добавляют трижды по 50 мп абсолютно сухогопиридина (высушен над пщридом кальция) н последний отгоняют в вакууме,К высушенному раствору добавляют раствор 1,бг (7,5 моль) й, - (1,4- диоксибутил - 2)тимина в пиридине и высушивают реакционную смесь, добавляя трижды по 50 мл абсолютно суха о пиридина и упаривая его в вакууме, Ообавдяют раствор 37,5 г (182 моль) дициклогексинкарбо лиимида в 30 мл пиридина и реакционную смесь выдерживают трое суток при периодическом встряхивании на качалке. Добавляют 30 мп Воды, выдерживают сутки при комнатной температуре, выпавшую дициклогексилмечевину отсасывают н промывают на фильтре 90 мл пнридина, Объединенный раствор уларивают в вакууме на ротационном вжарителе, затем добавляют 400 мл пиридина и 450 мл 9 й Н 40 Н и нагревают 3 час нри 100 С.Раствор упарнвают в вакууме на ротационном. испарнтеле, остаток растворяют в 150 мл воды и добавляют водный раствор 17,24 г ацетата бария. Выпадает осадок, Реакционную смесь выдерживают 4сутки при температуре от 0 С до,+5 С, осадок: 1.отсасывают и промывают на фильтре водой,Кобщему водному раствору объемом 250 млдобавляют двухкратный объем этанола (500 мл).Вьптавший Осадок Отсасываютчи Осадок 1, содержащий фосфат бария и дифосфат й, . (1,4-диоксибутил 2) тимина растворяют в воде сдобавлением катионита Оовах 50 в Н+ форме,цорН 3 и пропускают через колонку с катионитомОоччех-.50 в йа+ форме, элюируя водой, Элюатобессоливают пропусканием через колонку с гелем 3 ерлалдех б,.Элюируют водой, элюат упаривают в вакууме илиофилизуют. Получают 1 г йа соли дифосфата й1 (1 4- диоксибутил - 2) тимина.Осадок И, содержащий ацетат бария, ди- и мо.нофосфаты й 1 - (1,4 - дйоксибутил) . тимина,растворяют в воде и пропускают последовательночерез колонки с Ооеехв йа+ форме и Яер 1 ал21 дех 6-10.Элюатц, содержащие дифосфат (В.0,23) имонофосфаты (ВФ 0,46), собирают отдельно, упари.вают и лиофилизуют, Общий выход дифосфата40%, монофосфатов 30%.2 Формула изобретения Способ получения моно- или дифосфатов й 1ЗО -(урвцилил) - или йч - (пуринил) . диоксиалканов,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что й 1 - (урацилил)илий 9 - (пуринил) - диоксиалканы подвергают взаимодействию с фосфорилируницим агентом с последующим выделением целевого продукта известны.ми приемамн,