Способ фракционирования сыворотки крови

Реопублик Зависимое от авт. свидетельстваЗаяглепо 28.Х 1.1966 ( 1114910/30 МПК А 611 с 17/00 с присоединением заявки УПриоритет Комитет по делам аобретеннй и открьпий при Совете 3 Янннотрое СССР: гибли ". ": .:е торыобретения аявител СОБ ФРАК 11,ИОНИРОВАИИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ крови свиней - 1: 0,850,Перед осаждением температура сыворотки крови и раствора гипосульфита натрия должна быть 17 - 19 С. Через 40 - 60 лаан после объединения сыворотки крови с 3,18 М раствора гипосульфита натрия смесь, содержащую флокулят гамма-глобулина, подают на супер- центрифугу (СГОили СГО). Эту операцию, как и все прочие, проводят при комнатной температуре. Производительность центрифуги СГО:не более 160 л/час, на центрифуге СГОне более 80 лчас.Затем сырой осадок гамма-глобулина извлекают из ротора центрифуги и разделяют на партии,по 1,0 - 1,5 кг. Каждую партию сырого осадка заворачивают в сверток при помощи трех - четырех слойной технической хлопчатобумажной ткани и помещают под пресс на 24 - 48 час, Затем растворяют осадок гамма-глобулина в обессоленной апирогенной воде, Перед растворением необходимо определить концентрацию белка в осадке п,взвесить весь осадок.После этого проо количества воды по водят расчет необходпмогформулеР (В - 6) Известен способ фракционирования сыворотки крови путем осаждения гамма-глобу липовой фракции раствором сернокислого натрия.Предлагаемый способ отличается тем, что осаждение гамма-глобулиновой фракции из сы воротки крови проводят водным раствором гипосульфита натрия. Этот способ технологически прост, ограничивает возможность соосаждения посторонних фракций, позволяет быстро удалить примесь осадителя из полу ченной фракции белка или же оставить этот осадитель в,виде примеси, не требует дорогостоящей аппаратуры (например, холодильныхустановок).Гипосульфит натрия, взятый в качестве оса дителя, безвреден для организма, хорошо растворим в воде, растворы его стабильны.Способ фракцпонирования сыворотки крови по предлагаемому способу состоит в следующем. 20В эмалированную емкость (200 - 250 л) загружают сыворотку крови в объеме 100 л и при умеренном помешивании приливают 3,18 М раствор гппосульфита натрия со скоростью 8 - 12 л/,чин. 25Для осаждения гамма-глобулина из сыворотки крови крупного рогатого скота конечное объемное соотношение сыворотки и раствора гипосульфита натрия должно составлять 1: 1; для осаждения гамма-глобулина из сыворотки Зо В - концентрация белка в осадке в % Р - вес осадка в кг;296572 Предмет изобретен ия Составитель В. ТумаковаРедактор Н. С. Старостина Техред Л, В. Куклина Корректор Л. А, Царькова Заказ 1229/8 Изд.379 Тираж 473 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж.35, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 б - избранная концентрация гамма- глобулина в %;Л - необходимое количество растворителя (воды) в л,Необходимое количество консерванта (фенола) можно рассчитать по формулеФ= (2) где Ф - количество фенола (в кг), которое необходимо добавить к растворителю (воде), чтобы в итоге конечная концентрация фенола в препарате составляла 0,5%.В отмеренном количестве воды, предназначенной для растворения осадка, сначала растворяют рассчитанное количество фенола, после чего в данной фенолизированной воде растворяют осадок.Полученный в результате предшествующих операций раствор гамма-глобулина сначала фильтруют через бумажную мезгу в фильтре Нутче под вакуумом. Затем препарат фильтруют через стерилизующие пластинки фильтра Зейтца под положительным давлением. Каждую серию стерильного раствора гаммаглобулина, выдерживают в темном месте прикомнатной температуре 2 - 3 месяца.После выдерживания препарата освобож даются от выпавшего осадка путем декантирования и разливают препарат в флаконы, которые,предварительно были простерилизованы. Флаконы герметизируются резиновымипробабками10 Расфасованный препарат контролируется настерильность, пирогенность, концентрациюбелка, гипосульфита натрия и примеси другихбелковых фракций сыворотки крови. Способ фракционирования сыворотки крови,включающий осаждение белковых фракций 20 путем добавления к сыворотке крови водныхрастворов неГтральных минеральных солей, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности гамма-глобулиновой фракции, в качестве нейтральной минеральной соли бе рут водный раствор гипосульфита натрия.