Способ получения d-циклосерина

Союз Советских Социалистических Республик, свидетельстваКл, ЗОН аявлепо 12.Х 1.963 ( 864163/ нением заявкирисо МПК А 611"УДК 615 779 9(08 ор Ков 1 итет по делаге зобсетений и открыти при Совете Министров СССР. Яхонтова, С. А, Жуковская, Б, 11, ору Д. Карце Всесоюзный научно-исследовательский институт аитибиотико явител ЛУЧЕИИЯ г/-ЦИКЛОСЕРИНА СПОС Известны способы получения антибиотика 4-циклосерина из культуральной жидкости путехг ионообменной сорбции. Указанные способы сложны н не позволяют:получать антибиотик удовлетворительного качества с высо,ким выходом.С целью повышения выхода и улучшения качества целевого продукта культуральную жидкость попеременно обрабатывают гидратом окиси кальция и фосфорной кислотой при рН около 8,5 - 9,5, а затем осаждают ионы кальция при рН примерно,8 - 8,5 тринатрийфосфатом.Ионообменную сорбцию антибиотика из нативного раствора проводят при конечном зчачении рН 4,2 - 4,0 сильносшитым сульфокатионитом в водородной форме.Для получения гг-циклосерина к культу- ральной жидкости при медленном перемешивании попеременно добавляют гидрат окиси кальция в виде известкового молока и фосфорную кислоту. Гидрат окиси кальция взодят в количестве 12 кг на 1 лга культуральной жидкости, а фосфорную кислоту в таком количестве, чтобы поддерживать рН раствора на уровне 8,5 - 9,5. По окончании обработки рН раствора должен быть 7,8 - 8,2. Затем в смесь вводят тринатрийфосфат в количестве, необходимом для полного осаждения кальция (1 - 3 кг на 1 лга культуральной жидко. Значение рН раствора при этом 8,2 - 8,5.таком значении рН смесь выдерживают3 - 40 лгин и фильтруют со скоростью 60 гг/час на 1 лге. К прозрачному нативному раствору добавляют такое количество сильносшптото катионита в водородной форме, чтобы снизить рН раствора до 4,0 - 4,2. При этом находящийся в растворе в виде катионов и биполярных ионов цпклосерин сорбпруется, а другие низкомолекулярные более слабые органические основания (недиссоципрованные) остаются в растворе. Органические основания большого молекулярного веса не сорбируются сильносшитым сульфокатионптом вследствие сигового эффекта.Злюцию циклосерина осуществляют воднымраствором аммиака. Злюат осветляют кислым активированным углем и упаривают. К водному концентрату добавляют смешпвающийся О с водой органический растворитель, охлаждают и доводят уксусной кислотой до нейтральной реакции, В результате выделяется кристаллический гг-циклосерин.П р и м е р. К 4,55 л культуральпой жидко сти с активностью 2900 /лгг при медленномперемешивании добавляют 54 г СаО в виде известкового молока, поддерживая рН среды на уровне 8,5 - 9,0 добавлением фосфорной кислоты. После окончания добавления СаО О устанавливают рН 7,8, добавляют 14 г трп 1.Редактор Байнова Заказ 1013 ЛЗ Тираж 530 Подписное ЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 натрийфосфата и выдерживают 30 ли 1 к, За. тем культуральную жидкость отфильтровывают со скоростью 60 л/час на 1 лг-, получая 4,55 л прозрачного нативного раствора с активностью 2440 у/лгл и рН 8,3. Выход на стадии предварительной обработки 84,5%.К 4,55 л нативного раствора добавляют 124 г (на сухой вес) сильно поперечносвязанного сульфокатионита КУ, содержащего 20 оо дифенилбензола, Катионит берут в водородной форме. Сорбцию проводят при перемешивании 1 час. Катионит поглощает 9260000 у циклосерина, что составляет 84,5 з/о от его содержания в нативном растворе.Промытый обессоленой водой катионит помещают в дистиллированную воду (100 - 150 лгл на 100 г смолы) и при перемешпвании добавляют концентрированный водный аммиак до установления рН 10.5. После часового перемешивания катионит отделяют и повторно осрабатывают аммиаком. Оба элюата объединяют, обоаоатывают кислым активировапным углем (5/с от ооьема элюата) и упаривают в вакууме при 25 С, Получают 66 лгл концентрата с содержанием 122000 т/лл, к которому добавляют 330 лгл смеси равных ооъемов этилового и изопропилового спиртов. Водноорганический раствор фильтруют, охлаждают до 2"С и при перемешивании добавляют уксусную кислоту до нейтральной реакции. Выпавший кристаллический циклосерин отфильтровывают, промывают этиловым спиртом и сушат над пятиокисью фосфора. Получают 4,93 г кристаллического а-циклосерина с активностью 980 у/,иг (98% чистоты), что составляет 43,6% от содержания в нативном расТ 0 творе и 36,8% от содержания в культуральной жидкости. Предмет изобретения1. Способ получения д-циклосерина из куль.15 туральной жидкости путем ионообменнойсорбции, отличающийся тем, что, с целью по.вышения выхода и улучшения качества целевого продукта, культуральную жидкость попеременно обрабатывают гидратом окиси 20 кальция и фосфорной кислотой при рН около8,5 - 9,5, а затем осаждают ионы кальция при рН примерно ,8 - 8,5 тринатрийфосфатом.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтоионообменпую сорбцию антибиотика из на тинного раствора проводят при конечном значении рН 4,2 - 4,0 сильносшитым сульфокатио питом в водородной форме,