Способ подготовки биологической ткани к гистологическому исследованию

)5 ЗОБ САНИ Т ЕЛ ЬСТ ий инст т. Основ икой, М гистологииМедицина ВКИ БИОЛОГИЧЕОГИЧЕСКОМУ ИСанГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(56) Волкова О. В. и дрс гистологической техн1982, 193,54) СПОСОБ ПОДГОТСКОЙ ТКАНИ К ГИСТСЛ ЕДОВАНИЮ Изобретение относится к биологии и медицине, в частности анатомии,Цель изобретения - получение сохр ных срезов с большой площади.Способ осуществляют следующим образом,Сердца с предварительно налитым рентгеноконтрастной застывающей массой крбвеносными сосудами фиксировано в .10 О, нейтральном формалине. После замораживания в холодильнике до.минус 7 С отдельные куски расчлененного по зонам сердца примораживают водой с помощью двуокиси углерода к столику замораживающего микротома. Затем производят оттаивание верхнего слоя примороженного куска плоским металлическим равномерно подогреваемым теплоносителем с температурой до плюс 4 С и через пограничный слой толщиной не более 500 мкм между замороженной и оттаявшей частями производят раЗрезание при шаге микровинта микротома в 2000 мкм, 1000 мкм и 500 мкм. Процедура оттаивания и срезывания повторяется(57) .Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Цель - получение сохранных срезов с большой поверхности ткани. Цель достигается тем, что замороженные срезы до минус 7-10 перед приготовлением срезов прогревают на толщину среза до 0 плюс 2 С. Срезы, полученные таким образом, не трескаются, не сминаются, что важно особенно при изготовлении толстых срезов предварительно иньецированной рентгеноконтрастными веществами до получения пакета срезов всей толщины органа или ткани,П р и м е р 1, Препарат сердца с предварительно налитыми застывающей рентгеноконтрастной массой артериальными сосудами фиксируют в 10нейтральном формалине 50 суток, После определения по произведенным макроангиограммам количества и топографии бассейнов кровоснабжения и крупных артериальных магистралей с их разветвлениями препарат сердца расчленяют на одиннадцать кусков и замораживают равномерно в холодильнике до минус 7 С, Эти куски водой примораживают двуокисью углерода к столику большого замораживающего микротома. После оттаивания верхних слоев плоским теплоносителем с температурой до 40 С производят разрезание через пограничный слой, толщина которого около 500 мкм, Повторяя циклы размораживание-разрезание при ходе микровинта в 500, 1003, 2000 мкм получают без сминания и крошения пакеты срезов равномерной толщины в 500, 1000 и1802311 Составитель Л,СтебаеваТехред М,Моргентал Корректор Н.Король Редактор Заказ 846 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 2000 мкм, необходимой для рентгеновской микроангиографии.П р и м е р 2, Препарат селезенки с предварительно налитыми застывающей рентгеноконтрастной массой артериальными сосудами фиксируют в 10 нейтральном формалине 50 суток, Затем, после определения по произведенным макроангиограммам количества и топографии бассейнов кровоснабжения и крупных артериальных магистралей с их разветвлениями замораживают равномерно в холодильнике до минус 7 С, Эти куски поочередно фиксируют водой к столику большого замораживающего микротома примораживанием двуокисью углерода. После оттаивания верхних слоев плоским теплоносителем с температурой до 40 С производят разрезание через пограничный слой (между замороженной и оттаявшей частями с температурой около 0,2 С), толщина которого около 500 мкм, Повторяя циклы размораживание-разрезание при ходе микровинта микротома в 500,1000 и 2000 мкм получают без сминания икрошения пакеты срезов равномерной толщины в 500, 1000 и 2000 мкм, необходимой5 для рентгеновской микроангиографии. Длина срезов: 3,59 см, ширина срезов; 1,54см.Способ позволяет получить качественные, сохранные срезы больших поверхно"0 стей с биологической ткани.Формула изобретенияСпособ подготовки биологической ткани к гистологическому исследованию путемее замораживания и приготовления срезов"5 на криостате с последующей фиксацией иокрашиванием, о т л и ц а ю щ и й с я тем.что, с целью получения сохранных срезов сбольшой площади, замораживание проводят до температуры минус 7 - 11 С, а перед20 приготовлением срезов ткань на толщинусреза подогревают до 0- плюс 2 С,