Штамм бактерий мyсовастеriuм аviuм используемый для получения преципитирующей сыворотки

(51)5 С 12 й 1/00, 1/2 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ франции и хстран (1, 2).Целью иМусоЬастегоантигеннымиШтаммделен иэ лиреагирующеггоду.Штамм Мпонирован в нящиеся в коллекциях эти зобретения явлпг ач 1 цпг, хэрэктсвойствами.Мусопастег гггп ачмфоузла хряка,о на птичий тубе тся штаммизующийс ггпг Б 561 выположительно ркулин, в 1988 втг Иг 561 де- дарственного соЬаиег 10 гп ачоллекции Гос ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) А. Л. Лазовская, У, Л. Тихомирова, О. Ф. Рачкова, А, А, Бондаренко, 3. Г. Воробьева, Е. М. Максимова и Д, Т, Леви (56) 1. М 1 пп 10 п Р. Е., Оообе 1 оа М, М 1 сгоЫо о 91 са 1 с 1 аззВсатоп апб 1 бепТ 1 йсабоп.опбоп, 1980, р, 189.2.1 еррегА, ччО, Согпег 1. А, ТЬе Ьо 1 оцу о 1 йе МусоЬастег 1 а, 1983, 2, р. 418.(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ МУСОВАСТЕВОМ АчОМ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕЦИПИТИРУ 1 ОЩЕЙ СЫВОРОТКИ (57) Использование: медицинская и ветеринарная микробиология, серологическая идентификация микроорганизмов. Сущность изобретения: получение штамма МусоЬастег 1 цгтг ач 10 гп, обладающего анти- генными свойствами. Штамм выделен из лимфоузла хряка, положительно реагирующего на птичий туберкулин. Морфология: клетки имеют вид палбчек длиной 1,2-3,0 Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии и представляет собой новый штамм МусоЬастег 1 огп ачогп, отличающийся антигенными свойствами, и может быть использовано для серологической идентификации микроорганизмов.Известны штаммы микобактерий МусоЬастегЪгп ачогп, обладающие культурально-морфологическими и химическими свойствами, характерными для микробактерий данного вида. выделенные в США и мкм. Окрашиваются по Граму, по ЦилюНильсену окрашиваются в красный цвет. Культуральные характеристики, нэ плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при 37 С вырастает за 12-15 дней, на картофельной глицериновой среде Павловского эа 13- 16 дней. в виде белых мелких блестящих колоний. Размножается при 22-45 С, не растет при 50 С, Оптимум роста - 30-40 С. На жидких питательных средах растет на поверхности в виде влажной плотной пленки белого цвета, среда остается прозрачной, Через 4-8 недель роста среда окрашивается в желтый цвет при сохранении прозрачности. Физиологические свойства, Не растет нэ плотной питательной среде Г 1 евенштей-, на-Йенсена с добавлением 5, холристого натрия, растет на среде с салицилатом натрия. Не продуцирует ниацин, не редуцирует нитраты, не гидролиэует Твин, не обладает галактозидэзай и уреаэой, Имеет активные никотинамидазу и пиразинамидазу. Антигенные свойства. При введении кроликам вызовет образование преципитинов в титре 1:16 - 1:32 (в реакции преципитации в агаре).10 20 25 30 35 40 45 50 научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича под %39,Морфология. Клетки имеют вид палочек длиной 1,2-3,0 мкм. окрашиваются по Граму, по Цилю-Нильсену окрашиваются в красный цвет,Культуральные характеристики, На плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при температуре 37 С вырастает за 12-15 дней, на картофельно-глицериновой среде Павловского - за 13-16 дней в виде мелких блестящих колоний, Размножается при температуре 22-45 С, не размножается при температуре 500 С, Оптимум роста отмечен при 30-40 С,На жидких питательных средах растет на поверхности в виде влажной плотной пленки белого цвета, среда остается прозрачной,Физиологические свойства. Не растет на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 50/О хлористого натрия. Растет на среде.с салицилатом натрия. Не продуцирует ниацин, не редуцирует нитраты, не гидролизует Твин, не обладает галактозидазой и уреазой. имеет активные никотинамидазу и нитразинамидазу,Состав жирных кислот, определенный методом сопиролитической газовой хроматографии соответствует видовому составу МусоЬастег 1 цв ачцгп.По реакции агглютинации на стекле с типоспецифическими сыворотками к трем серотипам МусоЬас 1 ег 1 ца ач 1 цгп штамм МусоЬас 1 егцгп ач 1 цп ЬВ 561 был отнесен к серотипу 2.После заражения морских свинок бактерийной массой в количестве 1,0-1,5 мг (влажный вес бактерийной массы) внутримышечно животные в течение трех месяцев оставались здоровыми, на вскрытии патолого-анатомическая картина микобактериоза отсутствовала.Антигенные свойства. При введении кроликам вызывает образование преципитинов в титре 1;16-1;32 (в реакции преципитации в агаре).П р и м е р 1, Получение антигенного материала. Штамм МусоЬастег 1 цгп ач 1 цгп М 561 засевали на жидкую синтентическую среду Линниковой-Могилевского и выращивалипри 37 С в течение 4-6 недель, Бактерийную массу отделяли на стерильном бумажном фильтре, промывали дистиллированной водой, заливали на 18-24 часа 2,4-ным фенолом, повторно отмывали дистиллированнойводой, помещали в коллодиевые пистоны по 480-520 мг с последующим замораживанием при температуре-45 С. Разрушенную бактерийную массу заливали десятикратным объемом стерильной дистиллированной воды и выдерживали в холодильнике при температуре 3-5 С в течение 40-48 часов, Суспензию фильтровали через стерильный бумажный фильтр. Оставшуюся массу использовали в качестве антигенного материала для иммунизации животных.П р и м е р 2. Получение преципитирую- щей и агглютинирующей сывороток,Кроликов массой 2,0-3,0 кг иммунизировали антигенным материалом штамма МусоЬастег 1 ца ач 1 цп 1 Ф 561, полученным как в примере 1. Антигенный материал вводили в количестве 50,0-100,0 мг в 0,8-1.0 млнеполного адъюванта Фрейнда внутрикожно в три разные места еженедельно в течение 3-5 недель. Полученную сыворотку исследовали в реакции диффузионной преципитации в агаре. В реакции диффузионной преципитации образовывалась линия преципитации при разведении 1:16-1:32 с экстрактами штаммов М, ач 1 цщ, М.1 кгасеИцаге (вид, родственный М, ач 1 ца), полученных из ГИСК им. Л. А, Тарасевича (2 штамма) и свежевыделенных от свиней и из торфа (4 штамма), а также с экстрактом штамма М, ачцгп ч. 561 и не образовывала линий преципитации с эксратактами штаммов следующих видов микробактерий М.1 цЬегсц 1 оз 1 з, М. Ьчо 1 з М. опц 1 мт, М. рЫе 1, М 1 апзаз 11, М. сЬе 1 опе 1Экстракты микобактерий для реакции диффузионной преципитации в агаре готовили растиранием 20,0-30,0 мг бактерийной массы со стерильным стеклянным песком в 0,2-0,3 мл дистиллированной воды, подщелоченной 0,1 н,йаОН до рН 9,5-10,0.Формула изобретения Штамм бактерий МусоЬастег 1 цпз ач 1 ца ГИСК М 39, используемый для получения преципитирующей сыворотки,