Способ проведения реакции титрования

;,"8 ф.6 ЛЙ; НИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ВИДЕТЕЛ ЬСТВУ АВТОРСКО к биохимии и лабораторной я является упсуществляется в реакции отде- полупроницаерезультатовсмещения окществ. тельский нь(СИ) абораторовательн реагиров В реэульт ния сине 2 см,т,е,вавшего) м, или 1, атйоб реакции граница краски йода про ем обесцвеченно створа составляет мл, 1 мл 0,1 н, раст обесцвевигается о (проре,2 х 0,5= ора йода гиро 1,6 с ОСУДА РСТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИРИ ГКНТ СССР(56) Воскресенский П.И. Техниканых работ. М.: Химия, 1973. Изобретение относится к иохимии иможет быть использовано в ла ораторнойпрактике,Целью изобретения является упрощение способа.Способ характеризуется тем, что одиниз компонентов реакции отделяют от другого с помощью полупроницаемой мембраны,а оценку результатов проводят по смещению границы окраски прореагировавшихвеществ,Изобретение иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Одну часть сосуда емкостью1 мл, отделенную от другой полупроницаемой мембраной, заполняют разбавленным в10 раз раствором для фиксирования кинофотоматериалов для определения в нем тиосульфата натрия, а другую часть сосуда свнутренним сечением 0,5 см, вносят 0,1 н.2водный раствор йода с крахмалом (индикатор),(54) СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ РЕАКТИТРОВАНИЯ(57) Изобретение относитсяможет быть использовано впрактике. Целью изобретенирощение способа. Способ отем, что один из компонентоляют от другого с помощьюмой мембраны. а оценкупроводят по расчету границыраски прореагировавших ве содержит 12,7 мг йо След о в описанной выше реа про ало 20,32 мг йода.Йод реагирует с тиосульфатом натрия по следующей схеме:2 + Ка 25203 = 2 йа+ Йа 25406.Отсюда следует, что для связывания 20,32 мг йода требуется 25,32 мг тиосульфата натрия, т.е. в 1 л анализируемого раствора содержится 25,32 г этого вещества,П р и м е р 2. В одну иэ частей удлиненного сосуда, разделенного (полу-) проницаемой мембраной, наливают водный раствор перекиси водорода, и в другую подкисленный серной кислотой раствор перманганата калия. Молекулы перекиси водорода, проникая сквозь мембрану, вступают в реакцию с прилежащими слоями раствора перманганата калия по уравнению2 КМп 05 +5 Н 202 + ЗН 2304 = К 2304 + +2 Мп 504+ ЗН 20+ 502в результате чего эти слои обесцвечиваются из-эа превращения окрашенного в темно- пурпурный цвет перманганата калия в светлорозовый сульфат марганца. По мере истощения прилежащих слоев раствора перманганата калия, в реакцию вовлекают1691734 35 Составитель Т.ЗабойкинаТехред М,Моргентал Корректор И.Муска Редактор Ю.Середа Заказ 3923 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 ся все более удаленные слои, в результате чего граница окраски, обусловленной перманганатом калия, все дальше отодвигается от мембраны. Этот процесс продолжается вплоть до полного исчезновения перекиси водорода, содержание которой будет точно определяться объемом обесцвеченного раствора перманганата калия. Количество оттитрованной перекиси -водорода определяют по формулеРЯ 1 Т,где Р - количество перекиси водорода, мг;Я - внутреннее сечение реакционного сосуда (та его часть, в которю налит раствор перманганата калия), см;- расстояние, на которое отодвинулась граница (фронт) обесцвечивания раствора перманганата калия от мембраны, см;Т - титр раствора перманганата калия, выраженный в нормальности (М).При 5=05 см, Е=25 см и Т=01 йгколичество оттитрованной перекиси водорода составляетР = 17,01 0,5 2,5 0,1 = 2,13 мг.П р и м е р 3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в грудных мышцах насекомых. Отпрепарированные грудные мышцы пчелы заключают в цилиндрическую капсулу, изготовленную из полупроницаемой мембраны (например, очень тонкого целлофана), Размещают такую капсулу точно в центре лунки предметного стекла и эалиают раствором метиленового синего (МС) с сукцинатом натрия, приготовленном на фосфатном буфере (рН 7,5) так, чтобы капля того раствора выступала над поверхнос ю предметного стекла, а затем обеспечивают анаэробные условия, Для этого выступающую часть капли срезают так, чтобы в заключенной между стеклами емкости с расположенным в ней исследуемым образцом в растворе МС не оказалось пузырьков воздуха, Подготовленную таким образом опытную пробу термостатируют на водяной бане, следя по секундомеру за скоростью расширения границы обесцвеченной (лейкоформа МС) эоны на общем светлосинем (голубом) фоне и достижениемею условленной конечной границы.Определение активности сукцинагдегидрогеназы осуществляют по формуле5 60 Ч 0А= - р --- ,где А - активность сукцинатдегидрогеназы,выраженная в мг МС, восстановленного 1 гткани эа 1 ч; Ч - объем восстановленного10 раствора МС, мм; 0 - содержание МС в 1з,мм раствора, мкг; Р - масса навески тканиэ(мышц), мг: 1 - время, необходимое для достижения обесцвеченной зоны МС условнойконечной границы, мин,15 При Ч=100 мм; 0=1,0 мкг; Р =10 мг и1 = 7,5 мин активность сукцинатдегидрогеназы в мышцах медоносных пчел составляет;А -- 80 8 мг МС на 1 г6 О 100 1,01ткани в 1 ч.Таким образом, способ титрованияпрост в осуществлении, надежен в работе,дает воспроизводимые, корректные резуль 25 таты, не требует сложной и дорогостоящейаппаратуры. По точности он практически неотличается от традиционных методов титрования, а по затратам времени на проведение серии анализов в 2,0-2,75 раэ30 экономичнее, Г 1 ри атом, по мере увеличенияколичества опытных проб в серии относительные затраты времени еще больше снижаются,Формула изобретения Способ проведения реакции титрования, включающий подготовку титрующего раствора и исследуемого образца, смешивание титрующего раствора и образца, оценку результатов по изменению окраски раство ра, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью.упрощения способа, для титрования используют емкость, разделенную полупроницаемой мембраной, через которую происходит смешивание титрующего рас твора с образцом, а оценку результатов проводят по смещениюграницы окраски,