Способ диагностики характера течения ревматоидного артрита

)Ц 1 165 51)5 О 01 й 33/6 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ВТОРСКОМ ИДЕТЕЛ ЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Минский государственный медицинский институт(56) Болотин Е,В., Крель А.А., Белокриницкий Д.В. Связь некоторых показателей гуморального и клеточного иммунитета склиническими проявлениями ревматоидного артрита, - Тер, архив, 1981, т. 53, М 5, с,93-98.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХАРАКТЕРАТЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для диагностики характера течения ревматоидного артрита.Целью изобретения является ранняя диагностика и повышение точности способа.Способ осуществляют следующим образом.Больным ревматоидным артритом проводилась пункция суставов с целью получения синовиальной жидкости.В качестве субстрата использовали высокополимерную гиалуроновую кислоту, а с целью освобождения синовиальной жидкости от клеточных элементов и макромолекуля рных конгломератов, способных ингибировать гиалуронидазу, синовиальную жидкость предварительно подвергали центрифугированию при 400009 в течение 30 мин. Об активности фермента судили по накоплению М-ацетилглюкозамина, количе(57) Изобретение относится к медицине, в частности к ревматологии, и может быть использовано для диагностики характера течения ревматоидного артрита. Целью является ранняя диагностика и повышение точности способа, Сущность способа заключается в том, что у больных проводят пункцию суставов, берут пробу синовиальной жидкости и определяют в ней активность гиалуронидазы, При ее значении 4,51 мкмоль/г белка и менее диагностируют медленно прогрессирующий ревматоидный артрит., а при значении более 4,51 мкмольlг белка - быстро прогрессирующий. Изобретение позволяет с точностью 97,1;, уже на втором месяце болезни диагностировать характер течения ревматоидного артрита,ство которого определяли указанным ниже специфичным методом.Инкубационная смесь состояла из 0,2 мл 0,4%-ного раствора гиалуроновой кислоты в бидистиллированной воде, 0,2 мл синовиальной жидкости, 0,2 мл ацетатного буфера при рН 3,8; с содержанием 0,3 М йаС (конечная концентрация ИаС в пробе составляла 0,1 М). К каждому опыту ставили контроль на фермент синовиальной жидкости, а к каждой серии - контроль на субстрат и реактивы. Анализируемые смеси и контрольные растворы инкубировали 48 ч при 37 С. Затем для удаления белка пробы кипятили 3 мин, охлаждали, центрифугировали 15 мин при 10000 об/мин, отбирали аликвоты по 0,3 мл, прибавляли 0,1 мл тетрабората калия (рН результирующего раствора 8,9) и кипятили 3 мин. После охлаждения прибавляли 2,9 мл реактива Эрлиха, инкубировали 20 мин при 37 С, охлаж 1652916дали, измеряли оптическую плотность анали- Роузе 1:128, латекс-тест отрТ-лимфоцитызируемых образцов против контроля на реак%, уровень комплемента 44 ед.ивы при 586 нм на спектрофотометре. Повторное исследование активности гиКоличество образовавшегося М-ацетилглюко- алуронидазы проведено в марте 1986 г. Аквамина, эквивалентное количеству олигосаха тивность - 3,04 мкмоль/г белка,ридов, определяли по калибровочной кривой с По уровню активности гиалуронидазыН-ацетилглюкозамином в качестве стандарта; диагностировано медленно прогрессируюподчинение закону Бэра наблюдалось в обла- щее течение ревматоидного артрита,сти 5-100 мкг/мл, Результаты выражали в мкм В феврале 1988 г, проведена рентгеной-ацетилглюкозамина на 1 г белка синовиаль графия кистей и коленных суставов, Опреденойжидкости,определяемого пометодуЛоу- ляются явления остеопороза, умеренноери. Когда активность гиалуронидазы в сужениесуставныхщелейколенныхсуставов,,синовиальной жидкости составляла 4,51 проксимальных межфаланговых суставов кимкмоль/г белка и менее, диагностировали стей(Истадия),т,е.подтверждаетсямедленномедленно прогрессирующее течение ревмато прогрессирующее течение заболевания.идного артрита, а при активности выше 4,51 П р и м е р 3, Больной Сл-й, 48 лет.мкмоль/г белка - быстро прогрессирующее Страдает ревматоидным артритом в тече, течение ревматоидного артрита. ние 6 лет.Способ иллюстрируется следующими Первое исследование е 1984 г. Активпримерами, 20 ность гиапуронидазы в синовиальной жидП р и м е р 1. Больная Б-а, 27 лет. кости 4,51 мкмоль/гбелка. В крови: С 0352С адает ревматоидным артритом. Первое мм/ч, реакция Ваалер-Роузе 1:256, латекстро/, исследование гиалуронидазы в синовиаль- тест 1:320, Т-лимфоциты 53 уровень ком ной жидкости проведено в апреле 1984 г, племента 46 ед,, (активность составила 20,53 мкмоль/г бел На рентгенограмме кистей и коленныхка). Давность заболевания в, этот период суставов - умеренное сужение суставныхсоставилаоставила 12 мес. щелей проксимальных межфаланговых сусДругие лабораторные показатели в этот тавов и коленных суставов, единичные узупериод: СОЭ 26 мм/ч; Т-лимфоциты 53/, ры в суставах кистей (И стадия)., реакция ВаалерРоузе 1:256, латекс-тест 30 Повторное исследование гиалуронида 1:160, уровень комплемента 58,0 ед. (норма зы через 8 мес, Активность - 3,87 мклоль/г40 - 60 ед.), белка.По активности гиалуронидазы диагно- Диагностировано медленно прогрессистировано быстро прогрессирующее тече- рующее течение артрита,ние артрита. 35 При рентгенографии кистей и коленныхПовторное исследование активности суставов в 1986 и в 1988 г. отмечается умегиалуронидазы проведено в январе 1986 г. ренное сужение суставных щелей проксиАктивность - 15,18 мкмоль/гбелка, Вэтоже мальных межфаланговых суставов кистей,время выполнена рентгенография колен- более отчетливое сужениесуставных щелей, ных суставов и кистей. Отмечается значи коленных суставов, единичные узуры(И ста: тельное сужение суставных щелей, дия), Таким образом, подтверждается медмножественные узуры (И стадия). ленно прогрессирующий характер теченияТаким образом, по результатам иссле- ревматоидного артрита,дования активности гиалуронидазы в сину- Всего обследовано 35 больных ревматовиаль ной жидкости диагностировано 45 идным артритом, у которых уже в первые97 1 о ибыстро прогрессирующеетечение ревмато- месяцы заболевания с точностью,диидного артрита. Это же подтверждается агностирован характер течения ревматоидрвнтгенографией суставов. ного артрита,П р и м е р 2, Бальная П-а, 49 лет. Формула изобретенияСтрадает ревматоидным артритом в тече Способ диагностики характера теченияние 8 мес. ревматоидного артрита путем исследоваПе вое исследование проведено в ап- ния биологических жидкостей, о т л и ч а юреле 1984 г, На рентгенограмме кистей оп- щ и й с я тем, что, с целью ранней диагноеделялись явленид явления остеопороза и стики и повышения точности способа, опренезначительноесужениесуставныхщелейв 55 деляют активность гиалуронидазы вобласти проксимальных межфаланговых су- синовиальной жидкости и при ее значенииставс авов кистей ( стадия), Активность гиалу,51 и менее мкмоль/г белка диагностируюталь иронидазы в синовиальальной жидкости медленно прогрессирующее течение, а прсоставила 1,77 мкмоль/г белка. Исследова- значении более 4,51 м моль/г белка - бысние крови: СОЭ 48 мм/ч, реакция Ваалер- тро прогрессирующее течение артрита;