Способ моделирования возрастной катаракты

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 50 649598 А 1 3/28 ООз 6 ЕНИ К ВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ И РСКОМУ СВИДЕТЕЛ(71) 2-й Московский государственный медицинский институт им.Н.И.Пирогова(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ВОЗРАСТНОЙ КАТАРАКТЫ(57) Изобретение относится к медицине, вчастности к офтальмологии, и может использоваться при оценке прозрачности хрусталика и скрининге. антикатарактальных икатарактогенных веществ, Цель изобретения - повышение воспроизводимости стаИзобретение относится к медицине, вчастности к офтальмологии.и может найти применение при оценке прозрачности хрусталика и скрининге антикатарактальных и катарактогенных веществ.Цель изобретения - повышение воспроизводимости стадий заболевания.Способ осуществляется следующим образом,Вокруг извлеченного иэ глаза млекопитающего хрусталика фоомируют прозрачный гель на срок 1-7 сут. Для формирования геля можно использовать агарозу и другие вещества. способные полимеризоваться при температурном режиме, который не повреждает линзы глаза (16 - 42 С).Для проведения оптических исследований достаточно вырезать слой агара с за. ключенным в нем хрусталиком и перевести дии заболевания, Способ заключается в том, что выделенные хрусталики лабораторных животных заключаются в прозрачную гельобразующую среду, в которой они затем инкубируются 1 - 7 сут в зависимости от необходимости моделирования той или иной стадии катаракты. По сравнению с используемыми способами моделирования возрастной катаракты и ччо предлагаемый способ является более простым и экономичным в исполнении, Кроме того, как по сравнению со способамии ччо, так и 1 п чего предлагаемый способ позволяет более адекватно оценивать степень помутнения хрусталиков и эффективность испытываемых лекарственных средств в зависимости от стадии заболевания. в кюветы, что позволяет обьективно оцени не только степень помутнения хрусталик но также и результат воздействия лекарс венного препарата.Воспроизведение стадий возрастной катаракты человека достигается при этом способе моделирования. В течение первой недели прогрессивно уменьшается прозрачность хрусталиков, заключенных в гель, о чем достоверно свидетельствует повышение оптической плотности, измеряемой спектроскопически при 600 нм. Причем в начале инкубации, как и при старческой катаракте человека, развивается помутнение корковых структур. Позже, к 7 дню, наблюдается тотальное помутнение линзы, которая к тому же окрашивается в желтоватый цвет. Более длительная инкубация в результате продолжающегося накопления пигмен 164959810 20 25 30 35 40 45 50 55 та старения - липофусцина сопровождается дальнейшим изменением цвета хрусталиков. Одновременно с помутнением и изменением цвета в хрусталиках лабораторных животных накапливаются флуоресцирующие при 460-480 нм продукты, что характерно для разных стадий катаракты человека. Кроме того, в хрусталиках происходит уменьшение уровня калия, увеличение обводненности линзовых волокон, что также свойственно возрастной катаракте людей.П р и м е р 1. У крысы линии Юв 1 эг массой 102 г после декапитации выделяют хрусталики: энуклеируют глаз и скальпелем делают разрез по его задней поверхности так, чтобы разрез проходил по стекловидному телу, не затрагивая заднюю капсулу хрусталика. Хрусталик помещают в кювету и заливают гельобразующей средой. В качестве такой среды использовали 1;-ный раствор агарозы, приготовленный на физиологическом растворе, предварительно расплавленном и охлажденном,до 42 С. По мере охлаждения раствора агарозы до комнатной температуры вокруг хрусталика формируется прозрачный гель. При проведении спектрофотометрии при 600 нм начальная оптическая плотность хрусталиков (в геле) составила 0,22 и 0.28 усл,ед. Далее проводят инкубацию исследуемого оЬъекта в геле при комнатной температуре в защищенном месте от прямого света. Через сутки наблюдают легкое помутнение поверхностных структур хрусталиков, при этом их оптическая плотность возрастает до 0,36 усл.ед, При оценке других параметров испытуемых линз было установлено, что на 1 сутки инкубации их вес составлял 1150 ь, интенсивность флуоресценции белковых гомогенатов 1370 ь, содержание ионов калия 91 от контрольного уровня. Таким образом, моделировалась начальная стадия возрастной катаракты.П р и м е р 2, У крысы линии Юз 1 аг массой 94 г после декапитации выделяют хрусталики. Хрусталики помещают в кюветы и заливают 10 ь-ным раствором агарозы, После образования геля фиксируют начальную оптическую плотность исследуемых объектов при 600 нм, Инкубацию изучаемых объектов проводят при комнатной температуре в месте, защищенном от прямого действия света. Спустя трое суток наблюдалось значительное помутнение поверхностных структур и легкое помутнение ядер инкубированных линз. Кроме того, исследуемыеобъекты приобретали легкий желтоватый оттенок. Оптическая плотность их возрасталав 2,5 раза, вес на 20. Интенсивность флу.оресценции белковых гомогенатов хрусталика составляла 220, а содержание ионовкалия 78 от уровня нормыТаким образом,моделировалась стадия незрелой катаракты.П р и м е р 3. Хрусталики крысы линииЧЧз 1 аг, весившей 115 г,заливают 1 ь-нымраствором агарозы. Регистрируют начальную оптическую плотность хрусталиков в геле. Затем проводят инкубацию исследуемыхобъектов в геле при комнатной температурев защищенном от прямого действия светаместе.,Спустя неделю наблюдалось тотальное помутнение крысиных линз, имевшихжелтый оттенок, Оптическая плотность ихвозрастала в 6 раз, то есть они совершеннопереставали пропускать свет. Одновременно вес хрусталиков увеличивался на 270 ь,концентрация ионов калия в линзах уменьшалась на 40, а интенсивность флуоресценции белковых гомогенатов возрастала в18 раз, Таким образом моделировалэсь стадия зрелой катаракты.При этом способе моделирования возрастной катаракты повышается также адекватность испытания лекарственных средствв результате большего приближения модели к реальной ситуации, уменьшения травматизации поверхностных структур хрусталика и возможности обьективной количественной оценки динамики прозрачности хрусталика,Предлагаемый способ моделированиякатаракты может использоваться в научныхучреждениях и лабораториях, занимающихся поиском и испытанием новых антикатарактальных препаратов, Он может бытьтакже полезен при апробации вновь созданных лекарственных средств для выясненияне обладают ли они побочным катарактогенным действием,Формула изобретенияСпособ моделирования возрастной катаракты путем извлечения хрусталика у лабораторного животного и помещения его всреду инкубации, о тл и ч а ю щи й с я тем,что, с целью повышения воспроизводимости стадий заболевания, вокруг хрусталикаформируют прозрачный гель на срок 17 сут помещением хрусталика в кювету изаливкой гельобразующей средой, .