Способ электрофоретического разделения белков гемолимфы насекомых в полиакриламидном геле

(56) Урванцевабелков гемолимдов стрекоз метоакриламидном г М 2логии и паразитолог ене и Ю.М8)Г.А., Жохофы личинодом электеле. Яросл ирвинска Н,Б. Изучение некоторых вифореза в полиль, 1980,геле по или по ильнике большеевай иссле огне -С) С) 4 СР игают, токисавляет белков тигает ы н- и- ем ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР Е ИЗОБРЕ(54) СПОСОБ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ ГЕМОЛИМФЫ НАИзобретение относится к биохимии и иммунологии насекомых.Целью является улучшение качества разделения белковых фракций гемолимфы насекомых.П р и м е р, Электрофоретическое разделение белков проводят в полиакриламидном геле при помощи аппарата для электрофореза "Модель" фирмы "Реанал" ВНР, Будапешт, трис-глициновом буфере, рН 8,3 при напряжении 250-500 В, силе тока 5 мА на колонку, продолжительности 1,5 - 2 ч в интервале температур 3 - 5 С. На каждую колонку наносят 0,1 мл гемолимфы, разбавленной 40-ным раствором сахарозы.Берут гемолимфу насекомых гусеницы большой пчелиной огневки и к ней добавляют раствор натрия серноватистокислого пяти- водного с таким расчетом, чтобы в смеси концентрация его составила 0,005; 0,01;0,02; 0,04; и 0,05 М. Приготовленную гемолимфу подвергают электрофоретическому СЕКОМЫХ В ПОЛИАКРИЛАМИДНОМ ГЕЛЕ(57) Изобретение относится к биохимии и иммунологии насекомых. Целью является улучшение качества разделения белковых фракций геморимфы насекомых. Для этого в качестве реагента, предотвращающего меланизацию, используют натрий серноватистокислый пятиводный, причем его концентрация в смеси с гемолимфой составляет 0,01 - 0,04 М, Применение данного реагента увеличивает число разделяемых белковых фракций и улучшает качество их разделения, 1 табл. исследованию в полиакриламидномобщепринятым методикам сразу жесле длительного хранения в холодпри +4 С до -17 С, например 75 идней.В таблице приведены результатыдований старших гусениц большовки,Самые высокие результаты доскогда содержание натрия серноватилого пятиводного в гемолимфе сосот 0,01 до 0,04 М, так как фракциивыражены четко, а общее их число дос Берут гемолимфу насекомых по протипу (таблица 1. п.б), к ней добавляютсколько кристаллов фенилтиомочевинперемешивают стеклянной палочкой,как она труднорастворима, и так обработную гемолиму подвергают электрофореческому исследованию, Получают в средн12 недостаточно четко разделенных белвых фракций,1620070 Берут нативную гемолимфу насекомых (таблица 1, п,7) и подвергают ее электрофоретическому исследованию белков. Получают в среднем 12 довольно четко выраженных белковых фракций. Формула изобретения Способ электрофоретического разделения белков гемолимфы насекомых в полиакриламидном геле, включающий добавление 5 в гемолимфу реагентов для предотвращения механизации, о т л и ч а ю щ и й с я тем.что, с целью улучшения качества разделения белковых фракций, в качестве реагента используют натрий серноватистокислый пя тиводный, причем его концентрация в смесис гемалимфой составляет от 0,01 до 0,04 М. Таким образом, химические добавки натрия серноватистокислого пятиводного в гемолимфу насекомых улучшают качество, электрофоретического разделения белковых фракций гемолимфы. Варианты опытов Качество разделения фракций Количествобелковыхак ий Фракции разделены удовлетворительно Гемолимфа,содержащая0,005 М натрия серноватистокислого пятиводногоГемолимфа,содержащая0,01 М натрия серноввтистокислОГО пятиводнОГОГемолимфа,содержащая0,02 М натрия серноватистокислого пятиводнОГОГемолимфа,содержащая0,04 М натрия серноватистокислого пятиводногоГемолимфа,содержащая0,05 М натрия серноватистокислого пятиводногоГемолимфа,содержащая фе -нилтиомочевину по прототипуНативная гемолимфа ( бвэхим. обавок Фракции разделены четко 16 Фракции разделены четко Фракции разделены менеечеткоФракции разделены довольно четко Составитель А,СафонкинТехред М,Моргентал Корректор Т.Малец Редактор Т,Парфенова Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 Заказ 4201 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5