Способ получения ферментного электрода для определения глюкозы

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 944 И 9 М 27/30, 27/4 ИЗОБРЕ ДЕТЕЛЬСТВ Ю( ЩБИБАИ ПИСА Е ед идетельство СССРС 01 Б 27/42, 1983,5 В см " изоливиниловьп Изоб я к аналитик методам ие относит и, а именновного анализименении ферможет быть и-биологически ческои химифермеитат елатин, феследующем с ас, 7.: основанентных элек- пользовано ного н тродов, ипри медиквиях. ирт сследоваПоли ВинилБорная ки 0,5-1,0 0,5-1,0 0,1-0,3 001-0,00 10-20стальное сениемсодер- лового вьп лот являются повыше трода и упрощеготовления,Желатин Фермент ни ни ГраФитВода достигается тем,ржень наносят ытие в электритие нан раствор ок закрепляют пленки из водащего 2-5 м 7 поливин ст ОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТСССР ВТОРСНОМУ СВИ(5 б) Разумас В.И Ясайтис Ю.Ю., Ку.лис Ю.Ю, Амперометрические ферментныеэлектроды на основе углеродных материалов, .Деп. У 1609-84, 23.03.84.ВильнюсАвторское свУ 1180771, кл,(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРИЕНТНОГО ЭЛЕКТРОДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ 7) Изобретение относится к аналической химии и может быть испольЦелью изобретения е стабильности эле е технологии его иПоставленная цель то на графитовый ст рафитферментное пок еском поле напряжен 2зовано при медико-биологических иссл ованиях. Целью изобретения является повьппение стабильности электрода и упрощение технологии его изготовления. Для этого на графитовый стержень наносят графитферментное покрытие в электрическом поле напряженность 50-75 В/см из композиции, включающей следующие компоненты, мас,Х: поливиниловый спирт 0,5-1,0; борная кис- лота 0,5-1,0; желатин 0,1-0,3; фермент 0,001-0,005; графит 10-20; вода остальное, и закрепляют покрытие нанесением пленки из водного раствора, содержащего 2.-5 мас,7 поливинилового спирта и 0,12-0,15 мас,Х глутарового альдегида, путем окунания. Полученный Ферментный электрод стабильно работает в течение 30-35 сут, т.е, более чем в два раза дольше, чем известный, при более упрощенной технологии получения.1 композиции, содержащей спирт, борную кислоту ент, графит и воду при тношении компонентов, 1594416сп 11 рта и 0,12-0,15 мас,% глутарового альдегида, путем окунания,Введение в состав покрытия графиГа позволяет присоединить фермент нетолько за счет электростатическогоВзаимодействия, но и за счет координационной связи и таким образом,обеспечить повьппение устойчивостииммобилизованного фермента к воздействию среды в п 1 ироком интервале рН, кизменению температуры, а также увеличение срока службы покрытия.Поливиниловый спирт вводится всостав.с целью увеличения адгезии 5Покрытия к поверхности подложки и дляйовьппения стабильности композиции.Борная кислота необходима для обеспечения постоянной кислотпости состава, его электропроводности и для сппив 1 и поливинилового спирта с целью полу 11 ения прочного покрытия)Нелатин способствует стабилизациикомпозиции, а количество ФерментаГлюкозооксидазы в покрытии определяет-дя еобходимостью достижения высокогоуровня его активности.Режим иммобилизации в электрическом поле, при котором производят осаждение фермента, позволяет получитьравномерное покрытие с достаточнымКоличеством энзима и хорошей адге,зией к подложке.Защитная пленка поливиниловогоспирта получаетоя просто и достаточНо нерастворимой за счет сшивки глу"таровым альдегидом.П р и м е р. К 12,5 мл раствора,содержащего 0,125 г поливиниловогоспирта, добавляют 7,5 мп раствора,содержащего 0,075 г желатина, и 5 мл" раствора, содержащего 0,25 г борнойкислоты и тщательно перемешивают.Берут навеску графита 2,5 г, помещаютее в ступку и, добавляя небольшимипорциями приготовленный ранее раствор, перетирают. Растирание производят до полного перемешивания всейнавески графита с раствором. Переднанесением покрытия на подложку вполученную композицию вводят навескуфермента 0,0012 г.Дпя осаждения покрытия в электрическом поле в качестве вспомогательного электрода используют графити"55рованный цилиндр из полиметилметакрилата, рабочим служит графитовый эле.к трод с рабочей-поверхностью 0,75 смф, Процесс проводится:. в течение 2.мин при напряженности 50 В см -.Затем гра 1 Ъитовые стержни с графитферментным покрытием погружают в водный раствор, содержащий 1,25 г поли- винилового, спирта и 0,035 г глутарового альдегида.Графитферментное покрытие с защитной пленкой сушат при 4 С в течение 3-4 ч.Ферментный электрод, изготовленный по предлагаемому способу использован для определения концентрации глюкозы.Установлено удовлетворительное совпадение результатов анализа с исходными данными по концентрации глюкозы. Срок действия электродов составил 30-35 сут в отличие от 10-15 сут по известному способу.Таким образом, предлагаемьп 1 способ изготовления ферментных электродов по сравнению с известным позволяет повысить стабильность электродов и упростить технологию их изготовлеНИ 51 аФормула изобретенияСпособ получения Ферментного электрода для определения глюкозы, включающий нанесение токопроводящего слояи Фермента на углеродный носитель,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения стабильности электрода и упрощения технологии его изготовления, на графитовый стерженьнаносят графитферментное покрытие вэлектрическом поле с напряженностью50-75 В см 5 из композиции, содержащей поливипиловый спирт, борную кис"лоту, желатин, фермент, графит и водупри следующем соотношении компонентов, мас.%:Поливиниловый спирт 0,5-1,0Борна 51 кислота 0,5-1,0)Келатин 0,1-0,3Фермент О",001-0,005Графит 10-20Вода Остальноеи закрепляют покрытие нанесениемпленки цз водного раствора, содержащего 2-5 мас,% поливинилового спиртаи 0,12-0,15 мас.% глутарового альдегида, путем окунания,