Флуоресцентный индикатор перекиси водорода

(19) (1 532867 1)4 С 01 Б 31 22 ГОСУДАРСТВЕННЫИ НОМИТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР 6.ЫИ 3й" ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ТЕЛЬСТВУ ВТОРСКОМУ 1 8-26ова- оток МсЬ ог 98 кл. С(54)СИ ВО РЕ 1 Я вочн гаемых соединеетыре ингредиепза соединения ингредиентов,та, тогда как для си прототипа использу(56) Нарев Т .1. еС,а 1 . ЗупСея 1 я3,6-бяц 1 яС 1 СыСеа р-КагЬо 11 пеярояяея Ьепго 11 аг.р 1 пе апСолопяалоп 1 яС асС 1 ч 1 Су, 11 еСегосус 1 ея,ч. 24, М" 10, р. 2845-2855.Европейский патент ЕР 1(" 56207 Р 215/54, 1985.ФЛУОРЕСДЕНТ 1 БЙ ПНДНКАТОР ПЕДОРОДА изобретение относится к аналитической химии, а именно к флуоресцентным индикаторам перекиси водорода, и может быть использовано в химии, биохимии, биотехнологии, медицине, пищевой промышленности, сельском и лесном хозяйстве для флуоресцентного определения перекисных соединений,П р и м е р 1, К раствору с концентрацией 1-метил,2,3,4-тетрагидро- я-карболин-карбоновой кислоты (МТК) О, 2 мг/мл в 0,14 М Фосфатном буфере (рН 6,3) до 5 авляют равный объем исследуемого водного раствора, содержащего перекись водорода. Флуоресценцию измеряют на 30-й минутео инкубирования пробы при 37 С на флуориметре "Модель - 3000 л (РегК 1 пЕ 1 шег, Англия): о 5 ъем кварцевой кюветымл, ширина щели 2,5 нм, длины волны возбуждения к эмиссии - 350 и(57) Лзобретение относится к аналитической химии, а именно к флуоресцентным индикаторам перекиси водорода, и может быть использовано в различных о 5 ластях науки и народного хозяйства для определения перекисныхсоединений, Для этого к раствору производных 1, 2, 3, 4-тетрагидро-р-карболин-карбоновой кислоты в фосфатном буфере добавляют равньгй объемисследуемого раствора, содержащегоперекись водорода. Флуоресценцию измеряют после определенного времениинкубирования пробы при 37 С на флуориметре. По калибровочному графикуопределяют содержание перекиси водорода. 430 нм соответственно, По калиброому графику определяют содержание перекиси водорода,П р и м е р 2К раствору с концентрацией 1-фенил,2,3,4-тетрагидюйро- з-карболин-карбоновой кислоты Ю(ФТК) О, 2 мг/мл в О, 14 М Фосфатном МбуФере (рН 6; 3), содержащему2 мкг/мл Ь)перекиси водорода, добавляют равный, Ябобъем исследуемого растворасодер)жащего пероксидазу хрена. Флуоресцен- Дцию измеряют на 90-й минуте инкубироования про 5 ы при 37 С на длинах волнвозбуждения и эмиссии 350 и 410 нмсоответственно, По калибровочному графику определяют содержание пероксида 3эы хрена,Для синтеза предланий тре 5 уется всего ч1532867 Формула из обретения ты СООНЖН где В - СЧэ ф Сь 1в Качетстве флуоресцентного индикатора перекиси водорода. Составитель М,БондаренкоТехред М,дидык Корректор А,Обручар Редактор Л. Веселовская Заказ 8093/50 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 причем синтез осуществляют в одну стадию тогда как для синтеза соединенияпрототипа проводят четыре технологических стадии. Преимуществом использования предлагаемых соединений в качестве флуо,ресцентного индикатора является большийстоксов сдвиг, характеризуемый разностью длин волн эмиссии и возбуждения. Увеличение стоксова сдвига важ- . но в отношении уменьшения фонового свечения при индикации. Из примера 1 видно, что при определении концентрации 8015 длины волн возбуждения и эмиссии равны 350 и 430 нм соотвественно, вследствие чего стоксов сдвиг составляет 430-350=80 нм, что превышает таковой параметр прототипа (равный 50 нм).С помощью МГК возможно проводить анализ перекиси водорода без применения пероксидаэ (см. пример 1),При определении пероксидаэиой активности с ФТК определяемая минималь ная концентрация пероксидазы около 1 мкг/мп, тогда как в анализе с ис" пользованием прототипа используют 40 мкл раствора пероксидаэы с концентрацией 1 мг/мл, что в пересчете на одну пробу составляет 40 мкг/мл. Это свидетельствует о более высокой чувствительности определения пероксидазы с использованием ФТК.Предлагаемый индикатор может длительно храниться как в сухом виде, так и в водно-спиртовом растворе без разложенияПрименение производных 1,2,3,4-тетрагидро-р-карболин-карбоновой кисло