Способ определения специфичности иммунных комплексов

(50 4 6 01 М ЗЗ/5 рГ то,лгур ЕН ПЕЦИЕКСОВ цине и мунных чности. овышеужения специ- дуемую и институт эпи инфекционных аральни еева И. В., ЧуЛабинская А. С плексов 1;форм ка. - Журнал ии и иммунобиоОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ ПИСАНИЕ ИЗОБР А ВОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ С ФИЧНОСТИ ИММУННЫХ КОМПЛ (57) Изобретение относится к меди предназначено для определения им комплексов определенной специфи Цель изобретения - упрощение и п ние чувствительности способа обнар иммунных комплексов определенной фичности. Для этого титруют иссле пробу, образцы подкисляют до рН 2 добавляют антигенный или антит эритроцитарный диагностикум (напр качестве иммунореагента для выя антител, входящих в иммунный ко используют антигенный эхинококковы роцитарный дна гностикум), нейтра смесь, при у величении титра реак сравнению с контролем без подкис образца определяют наличие иммунн плексов. 4 2,8, ельный имер, в вления мплекс, й эритлизуют ции по ленного ых ком1323959 Формула изобретения Составитель 11. Иванов Редактор Е. Копца Техред И. Верее Корректор В. Бутяга Заказ 2960149 Тираж 776 Г 1 одписное ВНИИПИ Государственного комитета СССз ио делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Рау инская наб., д. 4/5 Производственно.иолиг 1)дфицсское предприятие. г. Ужгород, ул. Проектная, 4Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения иммунных комплексов определенной специфичности.Цель изобретения - упрощение и повышение чувствительности способа обнаружения иммунных комплексов определенной специфичности.Поставленная цель достигается тем, что исследуемую пробу титруют, образцы подкисляют до рН 2,4 - 2,8, затем добавляют10 антигенный или антительный эритроцитарный диагностикум, нейтрализуют смесь и при увеличении титра реакции по сравнению с контролем без подкисления образца определяют наличие иммунных комплексов, 15Пример 1. В качестве иммунореагента для выявления антител, входящих в иммунный комплекс, используют антигенный эхинококковый эритроцитарный диагностикум.Исследуемую на эхинококковый иммунный комплекс пробу сыворотки крови титруют в объеме 0,05 мл в 0,85/о-ном растворе МаС 1, содержащем 0,1% желатины. Во все разведения пробы добавляют 0,025 мл 0,1 Н НС 1-глици нового буфера, рН 2,4. Через 60 мин во все лунки вносят по 0,025 мл 25 0,5%-ного эхинококкового антигенного эритроцитарного диа гностикум а, а затем по 0,025 мл 0,4 М раствора фосфатного буфера, рН 7,2. Через 2 ч учитывают реакцию агглютинации.Контролем является аналогичная постановка реакции, но вместо 0,025 мл О,1 Н НС 1-глицинового буфера во все лунки вносят по 0,025 мл 0,85%-ного раствора МаС 1, содержащего 0,1% желатины. Превышение титра агглютинации в опыте по сравнению с контролем является показателем наличия иммунных комплексов данной специфичности.Пример 2. В качестве иммунореагента для выявления антигенов, входящих в иммунный комплекс, используют антительный 40 эритроцитарный эхинококковый диагностикум.Исследуемую на эхинококковый иммунный комплекс пробу сыворотки крови титруют в объеме 0,05 мл в 0,85%-ном растворе МаС 1, содержащем 0,1% желатины. Во все разведения пробы добавляют 0,025 мл 0,1 Н НС 1-глицинового буфера, рН 2,4. Через 60 мин во все лунки вносят по 0,025 мл 0,5%-ного эхинококкового антительного эритроцитарного диагностикума, а затем по 0,025 мл 0,4 М раствора фосфатного буфера, рН 7,2. Через 2 ч учитывают реакцию агглютинации.Контролем является аналогичная поста- ковка реакции, но вместо 0,025 мл 0,1 Н НС 1-глицинового буфера во все лунки вносят по 0,025 мл 0,85/о-ного раствора МаС 1, содержащего 0,1/о желатины. Превышение титра агглютинации в опыте по сравнению с контролем является показателем наличия иммунных комплексов данной специфичности.Использование предлагаемого способа позволяет сократить время анализа, повысить чувствительность способа (у больных дизентерией примерно в 8 раз), дает возможность определить иммунные комплексы в случае близости молекулярной массы анти- гена и антител, образующих комплекс. Способ определения специфичности иммунных комплексов путем обработки исследуемой пробы в кислой среде, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения его чувствительности, перед обработкой исследуемую пробу титруют, а после обработки добавляют антигенный или антительный эритроцитарный диагностикум с последующей нейтрализацией смеси и при увеличении титра реакции по сравнению с контролем без подкисления образца, определяют наличие иммунных комплексов.