Способ хранения холерных бактериофагов

(19) (И 2 Н 7 1 0 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ВУ КОМУ СВИДЕТ В 2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРГО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(56) 111 иганова Л,Б. Усовершенствование диагностических холерных монофагов ХДф, ХДФ, ХДФ/Автореф. канд. дис. Саратов, 1982.Брандзищевскнй О.В. Сублимация как метод стабилизации холерных фагов/Автореф. канд. дис. Саратов, 1976.(54) СПОСОБ ХРАНЕНИЯ ХОЛЕРНЫХ БАК- ТЕРИОФАГОВ(57) Изобретение относится к области медицинской микробиологии. Цель изобретения - повышение жизнеспособности и сохранение биологической активности умеренних фагов. Берут 1 мл фага 8556 и соединяют с 2 мл защитной среды. Защитная среда имеет следующий состав: сахароза, желатина, хлористый кальций, дистиллиронная вода, Среду стерилизуют в ав"клаве. Препарат разливают в ампулы. Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул в охлажденный спирт. Производят лиофильное висушивание в течение 26- 7 ч. Запаивают ампулы и в исследуемых образцах через 24 ч после висушивания определяЮт количество жизнеспособных корпускул фага,6,5-8,5 Составитель Г.С Техред А.Кравчу мирновак Корректор И,Эрдейи Редактор А.Огар Заказ 717/28 Тираж 500 Подписное ВН 16 П 1 И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж,Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 41Изобретение относится к медицинской микробиологии, в.частности кспособам хранения умеренных холерных фагов,Цель изобретения - повышение жизнеспособности и сохранение биологической активности умеренных Аагов,П р и м е р 1. Берут 1 мл фага8556 с титром 2,2 10 БОЕ/мл, соединяют с 2 мл защитной среды (соотношение 1:2), Состав защитной среды,г: сахароза Хц 99, желатина 14;хлористый кальций 6,5; дистиллированная вода - остальное (дол),Среду стерилизуют в автоклаве при110 С в течение 30 мин, Препарат разливают в 5-кубиковые ампулы по 2 мл,Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул вспирт, охлажденный до "55 на 3 мин,непосредственно перед сушкой. Лиофильное высушивание осуществляютв вакуум-сушильной установке Е 7,-9 Св течение 26 ч. При этом температуру повышают постепенно в течение З,чот -50 до -10 С и в течение 13 ч -от -10 до +25 С. Досушивают препарат а течение 8-9 ч при +25 С. Первые два часа сублимацию проводятбез подогрева. Затем включают подогрев со скоростью 5 град в час. Запаивают ампулы с осушенным стерильным воздухом. В исследуемых образцах через 24 ч после высушивания определяют количество жизнеспособныхкорпускул фага. Ампулу вскрывают,таблетку растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Титр фага после лиоАилиэации ,7 10 , что составляет677,2 Х активных фаговых корпускулот исходного жидкого препарата фага (согласно известному способу сохраняется 167 корпускул бактериофага),П р и м е р 2. Берут 1 мл фага8556 с титром 2,2 1 О БОЕ/мл, соединяют с 2 мл защитной среды, состоящей из г: сахароза 100; желатина15; хлористый кальций 7,5; дистиллированная вода - остальное, Препа 296578 2рат разливают в. 5-кубиковые ампулыпо 2 мл. Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул в спирт, охлажденный до -60 Сна 4 мин, ЛиоАильное высушивание осуществляют в течение 27 ч, Титр Аагапосле лиофилиэации 1,65 10 П р и м е р 3. Берут 1 млфага О 8556 с титром 2,2 1 О БОЕ/мл, соединяют с 2 мл защитной среды, состоящей из, г/л; сахароза 101, желатина6;, хлористый кальций 8,5; дистиллированная вода - остальное. Препарат 15 разливают в 5-кубиковые ампулы по2 мл. Предварительное замораживаниеосуществляют путем погружения ампулв сгнрт, охлажденный до -65 , на4 минуты. ЛиоАильное высушивание и 20 определение активности Аага осуптествляют аналогично примеру 1. Титр Аабга после лиофилизации 1,710 А о р м у л а изобретения25 Способ хранения холерных бактериоФагов путем их смешения с защитнойсредой, содержащей дистиллированнуюводу, желатину и сахарозу, предвари тельного замораживания с последующимсублимированием и досушиванием целевого продукта, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что, с целью повыше ния жизнеспособности и сохранениябиологической активности умеренныхАагов, защитная среда дополнительносодержит хлористый кальций при следующем количественном соотношениикомпонентов, г/л:Сахароза 99-101Желатина 14-бХлористыйкальцийДистиллированная вода ОстальноебактериоАаг смешивают с защитнойсредой в соотношении 1:2, предварительное замораживание осуществляютв течение 3-4 мин, а высущиваниепроводят в течение 26-27 ч. Сй