Способ определения активности антитромбина 111

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9) (11) А 1 С О 1 Б 33/86 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН 3694601 /28-,1 13.01,84 07.11.86. Б Белорусский юл. У 4 го суда енствов ви 11ственнь ания врачА. Бизюк тут усоверЕ. П. Иван616,07(088АцвСеп П,ога 1 огу шаи. ОхГогй аруше Ъ 1 оо 19(57)не, Ц КТИВНОСТИ СПОСОБ 011 РЕДЕЛЕНИЯРОМБИНА 111Изобретение относитель изобретения - у медициние и ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(21) (22) (46) (71) иясти (72) (53) (56) А 1 аЪ 1 а 1 ю повышение точности способа. В пробирки с исследуемой контрольной иопытной плазмами добавляют раствортромбина. Смесь инкубируют и на первой минуте инкубации встряхивают несколько раз. Сгусток фибрина не удаляют. На 3, 7, 11 и 15 мин инкубациисмеси пипеткой берут образовавшуюсясыворотку и добавляют в пробирку сраствором фибрииогена. По секундомеру регистрируют время свертыванияфибриногена остаточным тромбином сыворотки. Расче. активности антитромбина 11 производят по калибровочнойкривой.1269024 20 П р и м е р 2. У пациента 2 иследовали кровь, как описано в примере М 1, Было установлено, что динамика (С =3; 7; 11 и 15 мин) С, =17;26; 40 и 62 мин, а 1 д Сс - 1,230;1,415; 1,602 и 1,792 соответственно.При совмещении построенной по полученным точкам кривой опытного образца плазмы с контрольной оказалось,что активность антитромбина 111 у исследуемого пациента 657, что значительно ниже нормы,формула и э о б р е т е н и я Составитель И, ЕмельяненкоРедактор О. Головач Техред .Л.Сердюкова Корректор Е. Рошко ФЗаказ 6028/46 Тираж 778ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к медицине и касается определения активности основного ингибитора системы свертывания кровиЦель изобретения - ускорение и повышение точности способа эа счет учета действия антитромбина 1, проведение исследования на натинной плазме и определение остаточной активности тромбина в динамике в течение 15 3 мин.Способ осуществляется следующим образом.В силиконовые пробирки с 0,5 мл 107. исследуемой контрольной и опытной плазмами добавляют 0,5 мл раствора тромбина. Смесь инкубируют на водяной бане при 37 С и на первой минуте инкубации встряхивают несколько раз для образования малообъемного сгустка фибрина, который не удаляют. На 3, 7, 11 и 15 мин инкубации Сщ смеси, 0,1,.мл образовавшейся сыворотки берут пипеткой и добавляют в пробирку с 0,1 мл раствором фибриногена. По секундомеру регистрируют время свертывания С, фибриногена ос" таточным тромбином сыворотки.Расчет активности антитромбина 111 производят по калибровочной кривой. Для построения кривых скорости инактивации тромбина антитромбином 1114 .плазмы на миллиметровой бумаге изйполученный в секундных значениях С с извлекают десятичный логарифм 1 д С Кривые скорости инактивацни тромбина антитромбином 11 строят для контрольного и опытного образцов плазмы в координатах 1 д С, (на оси ординат), С ц(на оси абсцисс).Любую точку на кривой скорости инактивации тромбина антитромбином 11 контрольного образца плазмы принимают за 1007 активности антитромбина 111 . Такая точка взята на 10 мин инкубации смеси. К ней соотносят скорости инактивации тромбнна антитромбином 111 опытного образца плазмы и получают значения этой актив-:ности в процентах. Пределы нормальных колебаний активности антитромбина 1 П, определенные для донорской5 группы, составляют 10012,07П р и м е р 1 . У пациента 1 исследовали кровь предлагаемым способом, при этом было установлено, чтон динамике (С =3; 7, 11 и 15 мин),С=28 62; 138, 306 мин, а значенияСс= 1 ф 447; 1792 1 21139 и 2 ф 486 фсоответственно,При совмещении построенной по полученным точкам кривой опытного об 15 раэца плазмы с контрольной оказалось,что активность антитромбина 111 у ис-следуемого пациента равна 117 Е, т.е.значительно выше нормы,35 Способ определения активности антитромбина 11 путем смешивания исследуемой и нормальной плазм с раствором тромбина, определения остаточной активности тромбина но время 40 свертывания фибрнногена и сравненияее с нормальной, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускоренияспособа и повышения точности эа счетучета действия антитромбнна 1, ис спедования проводят на нативной плазме, а остаточную активность тромбина определяют н динамике н течение1513 мин,