Способ определения липидо-белкового соотношения в липосомах (его варианты)

(51)4 О 01 Б 33/4 ВСЪ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ о-исследов атологии и пе Вашкеви ческии жур 66-68.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕ КОВОГО СООТНОШЕНИЯ В ВАРИАНТЫ)(57) Изобретение отн ческой биохимии. Цел ускорение и упрощени липидов. Определение ет регистрацию интен ИЯ ЛИПИДО-БЕЛЛИПОСОМАХ (ЕГО сится к клиниизобретения - определениялипидов включаивности максиГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Центральный научительский институт гемареливания крови(56) Украинский биохиминал, 54, 1982, М 1, с,мума полосы поглощения сложноэфирных групп и нахождение с помощью построенного для данной липидной смеси калибровочного графика концентрации липидов. Для определения соотношения концентраций белка и липидов липосомы из легкой воды переводят в тяжелую воду. При центрифугировании отделяют липосомы. После об" мывки липосомы помещают в одну кювету, а раствор, который применяют для последней отмывки, помещают в кювету сравнения. Затем регистрируют1 ИК-спектр в области 1600-1800 см По интенсивности полос поглощения гемоглобина и лецитина и соответст" вующим калибровочным графиком находят количество гемоглобина и лецитина в суспензии липосом, а также их соотНошение. 2 с.п. ф-лы,1269020 30 778 Подписное Произв,-полигр, пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная,1 Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской биохимии.Цель изобретения - ускорение и упрощение определения липидов при одновременном определении белков за 5 счет регистрации спектра поглощения образца в тонкослойной Флуоритовой кювете в области 1700-1800 см или же за счет предварительной обработки липосом солевым раствором тяжелой 10 воды и регистрации ИК-спектра в такой же кювете в области 1600-1800 см,Способ осуществляют следующим образом.Способ определения липидот и бел ка основан на регистрации ИК-спектра водной суспензии липосом в тонкослойных флюоритовых кюветах.Определение липидов включает регистрацию интенсивности максимума 20 полосы поглощения сложноэфирных групп и нахождение с помощью предварительно построенного для данной липидной смеси калибровочного графика концентрации липидов.25Количество белка определяют по формуле бС =С6 " лфгде С и С - концентрация белка илипидов в суспензиилипосом соответственно,бсоотношение концентралций белка и липидов всуспензии липосом.35Для определения соотношения концентраций белка и липидов липосомыиз легкой воды (НО) переводят в тяжелую воду (ДО); затем регистрируютмаксимумы полос поглощения белка(Амид 1) и сложнозфирных групп липидов и находят с помощью предварительно построенных для данного белка илипидной смеси калибровочных графиков соотношение концентраций белка илипидов в суспензии липосом,П р и м е р 1. Анализируемый образец липосом помещают во Флворитовуюкювету тогпщиной 20 мкм и на инфракрасном спектрофотометре регистрируют спектр в области 1700-1900 см ,ВНИИПИ Заказ 6028/46 Тираж ПО интенсивнс)сти нолось тОтзтйРтеИт ттрн 1730 см и калибровочному граФику определяют содержание лецитина в образце (для аналттза требуется 0,02 мкл суспензии)П р и м е р 2, Суспензию липосом помещают в центгрифуютую пробирку, куда прибавляют 5 мл 0,9 Е-ного раствора ПаС 1 в Д О. Пробирку закрывают резиновой пробкой, ее содержимое тщательно перемешивают, а затем с помощью центрифугирования отделяют липосомь (при 600-700 достаточно центрифугирования в течение 10 мин). После трехкратной отмывки гемосомы помещают во флюоритовую кювету толщиной 100 мкм, а раствор, применяющийся для последней отмывки - в кювету сравнения, Затем регистрируют ИКспектр в области 1600-800 см и по . интенсивностям полос поглощения гемоглобина (1650 см ) и лецитина (1730 см) и соответствуттщим калибровочным графикам находят количества гемоглобина и лецитина в суспензии липосом в Д О, а также их соотношеЪние. формула изобретения. Способ .определения липидо-белкового соотношения я липосомах путем исследования их водной сусттензии методом ИК-спектроскопии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа при определении липидов, ИК-спектр реристрируют в тонкослойной Флюоритовой кювете в области 1700-1800 см2. Способ определения липидо-белкового соотношения в липосомах путем исследования их водной суспензии методом ИК-спектроскопии, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения определения липидов при одновременном определении белков, водную суспензию липосом предварительно обрабатьвают солевым раствором тяжелой води, далее регистрируют ИК-спектр в тонкослойной Флюоритовой кювете в области 1600- 1800 см