Способ консервирования эритроцитов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИН А 2, А 61 К 35/18 4 А 01 ГГО 11 ГФН СТ олиэтилено а суспендируюьно содержиттрехзамещеннщий растворв следующем натый,одер ин, А. Мартысо 2-4 ,5-0 АНИЯ ивания содерлористыиидистиллода натри рован я Остальное, Ж содержитотношении,а ий растволедующем и суспендирую компоненты.в мас.7.: 9-11 5-1,Сахароза Хлористый натрииНатрий лимонно- кислый трехзамещенныиБидистиллировавода а тально ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОПИСАНИ ВТОСКОМУ СВИД(71) Институт проблем криобиологиии криомедиц ы АН УССР(56) Авторское свидетельство СССРР 560613, кл. А 61 К 35/18, 1975.Авторское свидетельство СССР9 888896, кл, А б И 1/02,. 1980.(54)(57) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВЭРИТРОЦИТОВ путем их эаморажвконсервирующем растворе,жащем 1,2-пропандиол, сахарозу,хлористый натрий ,и бидистиллированную воду, размораживания и суспендирования в среде, содержащейсахарозу, хлористый натрий и бидистиллированную воду, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что, с целью снижения степени повреждения эритроцитов, консервирующий раствор дополнительно содержит декстран с мол. мас. 20000 ис мол. мас, 1500,раствор дополнителрий лимонно-кислыйпричем консервируюжит эти компонентыотношении, мас.Х:1,2-ПропандиолДекстран с мол.20000Полиэтиленоксидс мол. м, , 150СахарозаИзобретение относится к медицине,а именно к криобиологии, и можетбыть использовано для длительногонизкотемпературного хранения эритроцитов,Целью изобретения является снижение степени повреждения эритроцитовза счет их затормаживания в консервирующем растворе, содержащем 1,2-пропандиол (ПД), сахарозу, хлористыйнатрий, декстран, полиэтиленоксид(ПЭО) и бидистиллированную воду приопределенных соотношениях, и суспензировании после размораживания врастворе, содержащем сахарозу,хлористый натрий лимоннокислыйтрехзамещенный и бидистиллированнуюводу при определенных соотношениях.Способ осуществляется следующим образом.Эритроциты замораживают со скоростью 12-14 С(мин до 150-170 С после смешивания с консервирующим раствором, содержащим,%: 1,2-ПД 28- 30; декстран с мол. мас. 20000 4-6; ПЭО с мол. мас, 1500 4-6; сахароза 2-4, хлористый натрий 0,5-0,7; вода бидистиллированная остальное, а после размораживания их суспендируют в среде, содержащей,: сахароза 9- 11; натрий хлористый 1,5-1,7; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,2- 0,4; вода бидистиллированная остальное.П р и м е р 1, К 120 мл эритроцитарной массы приливают 180 мл консервирующего раствора, содержащего,: 1,2-ПД 29; декстран - 20000 5; ПЭО5; сахароза 3; БаС 1 0,6; вода бидистиллированная остальное и перемешивают, Смесь центрифугируют при 4 С (3000 об/мин) в течение 30 мин. Надостаточную жидкость и слой лейкоцитов удаляют, а осадок эритроцитов объемом 100 мл переносят в контейнер и замораживают в течение 15 мин со скоростью 13 С(мин от 25 до -170 С. Затем к".нтейнер помещают в хранилище с жидким азотом (-196 С). Через 30 дней хранения контейнер извлекают из жидкого азота и помещают в пенопластовый чехол с толщиной стенок 1250236 2.40 мм на 24 мин, что обеспечиваетоотогрев эритроцитной массы до 100 Ссо средней скоростью 4 С(мин. Затемконтейнер переносят в воду с температурой 45 С на 80 с и размораживаоют клетки от 100 С со скоростью80 С(мин, К размораживаемой эритроцитной массе при перемешивании в течение 5 мин добавляют 150 мл суспен 1 О дирующей среды, содержащей, %:сахароза 10; БаС 1 1,6; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,3 и водабидистиллированная остальное.При этом получают суспензию эрит 15 роцитов, гемолиз которых в суспендирующей среде составляет 0,56 .При переносе эритроцитов из суспендирующей среды в физиологическийраствор БаС 1 гемолиз составил20 1,34%,П р и м е р 2. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, используя консервирующийраствор в следующем составе,.:25 1,2-ПД 28Декстран4ПЭО4Сахароза 2ИаС 1 0,530 Вода бидистиллированная ОстальноеГемолиз эритроцитов в суспендирующей среде 0,83 , а в физиологическом растворе БаС 1 1,62%.35 П Р и м е Р 3. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, за исключением того, что консервирующий раствор использовали вследующем составе,7:1,2-ПД 30Декстран6ПЭО6Сахароза 4НаС) 0,7Вода бидистиллированная ОстальноеГемолиз эритроцитов в суспензирующей среде составил 0,68 , а в физиологическом растворе - 1,74 ,.После суточного хранения деконсервированных эритроцитов в суспендирующей среде показатель гемолизаувеличивается от 0,6-0,9 до 0,9-1,5%,по известному способу степень разрушения составляет более 2%.