Способ выявления белковых фракций в сыворотке крови человека

,8012395 О 1 И ЗЗ ДОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСНОМЪГ СВИДЕТЕЛЬСТВУ:Вф ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Астраханский государственныймедицинский институт им.А.В.Луначарского(56) Э,Гааль и др. Электрофорез вразделении биологических макромолекул, 1982, с.266-.267,(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКОВЫХ фЦИЙ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к био- .химии. Цель изобретения - упрощениеи ускорение способа за счет введения в состав красителя триаммонийнойсоли ауринтрикарбоновой кислоты. Привыявлении белковых фракций послезлектрофореза одновременную фиксацию и окраску их производят в водном растворе 0,0027"0,0083-ногухлорида железа, 7-10-ной уксуснойкислоты и 0,01-0,023-ной триаммоний-дной соли ауринтрикарбоновой кислоты,взятых в соотношении (2"5)(50-200)Составитель М,ПознякРедактор В.Иванова Техред,Н,Бонкало Корректор ,ПатайЗаказ 3389/43 Тираж 778 . Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035,Москва, Ж, Раушская. наб., д.4/5Производственно-полиграфическое предприятие,г.ужгород, ул. Проектная, 4 12Изобретение относится к медицине,а именно к биохимии,.Целью изобретения является упро"щенке и ускорение способа за счетвведения в состав красителя триаммонийной соли ауринтрйкарбоновойкислоты.Способ осуществляется следующимобразом,При выявлении белковых фракцийпосле электрофореэа в ПААГ одновременную фиксацию и окраску.их осуществляют в водном растворе 0,0027 О,0108 -ного хлорида железа, 7 -О -,ной уксусной кислотыи 0,01, 0,02 -ной триаммонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты, взятых в соотношении (2-5):(50-200):(1-3) соответственно. Окраску производят в.укаэанном растворе в течение 1216 ч при этом участки геля гдеотсутствуют фракции белков., не окрашиваются, тем самым ликвидируетсядлительная операция отмывки избытка красителя.П р и м е р 1. Исследуют сыво ротку крови человека. Раствор для,окраски белковых фракций послеэлектрофореэа в геле готовят не. посредственно перед употреблениемсмешиванием исходных водных растворов:. (А) 1 Х раствора красителя "Алюмином" (триаимонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты), (В) 0,27 раствора железо (111) хлорида,(С 1 73 раствора уксусной кислоты вобъемном отношении А:В:С = 1:1:100.После проведения электрофорезабелков сыворотки крови человекастолбик нолиакриламидного геля помещают "в укаэанный красящий раствор.Проявление белковых фракций в раст-,воре наблюдается визуально ужечерез 40-60 мин, Спустя 12-16 ч ок 39596 2раска участков гелей, содержащих.белок, становится темно-фиолетовой,а .участки геля, свободные от белков,остаются абсолютно бесцветными, Втаком виде гель можно подвергать анализу на содержание белков.Длительное хранение гелей с проявленными фракциями белков осуществляется в растворе, содержащем1 о 7 . уксусной кислоты и 0,0027 железо (111 хлорид. Качество окраски при хранении гелей в этом растворе в течение 5-8 месяцев не. изменялось.15 П р и м е р 2. Раствор для окраски белков готовят в следующем объемном соотношении А:В:С= 3:5:200.Результаты окраски практическине, отличаются от приведенных параметро ров примера 1.П р им е р 3. Раствор для окраскибелков готовят в следующем объемномсоотношении А:В:С=1:2:50.Результаты окраски не отличаются25 от приведенных параметров. примеров1 и 2,ф о р м у л аи з о б р е т е н и.я ЗО Способ выявления белковых фракцийв сыворотке крови человека путем электрофоретического разделения в полиакриламидном геле, фиксации полученных фракций с последующим их окрашиванием, о т л и ч а ю щ и й а я тем, что, с целью упрощения.и ускорения способа; фиксацию и окраску проб проводят одновременно в водном растворе 0,0027-0,0108%-ного хлорида же лева, 7-,10 .-ной уксусной кислоты.и0,01-0,02 -ной триаммонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты, взятых в соотношений (2-5)ф(50-200):(1-3) соответственно.