Способ получения инсулина человека
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
СОЮЗ СОНЕТСНИХиииииииииииии си иРЕСПУБЛИН 1 К 37 2 НОМИТЕТ СССРЕНИЙ И ОТНРЫТИЗ Е ИЭ ОПИСАНК ПАТЕНТУ(72) Гейсберт Виллеми Франсуа Эгберт Абрховен(56) ЗсЬш 1 й Е.ЪК. ейЕ."РИув 1 о 1. СЬешд 1,ПОСОВ ПОЛУЧЕНИЯ отличаю ью повышения ч способа, модифеловека общей фо то, с цел упрощенияинсулин 18 дез(ВЗ ли ЙН-С 1арел ваам ван едем ден 1ОН где К - феподвергаютдазой А слевого про илалан брабо сл укта. С 4 ГОСУДАРСТВЕПО ДЕЛАМ И а 1. Норре Зеу 1 ега978, ч. 359,)В И) 801232 148 0 ВНИИПИ Заказ 2666/61 Тираж 490 Подписное Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к биохимии, в частности к получению инсулина человека полусинтетическим путем.Цель изобретения - повЫшение чистоты и упрощение способа получения инсулина человека за счет использования модифицированного инсулина общей формулы. дез(ВЗО)-инсулин- МН-СН-С-ЙС-СНОН где К - фенилаланил-фенилаланин, который подвергают обработке карбок сипептидазой А, специфически отщепляющей остаток к с образованием инсулина человека.Способ осуществляется следующим об-. разом. 20П р и м е р 1. В качестве исходного соединения используется дез(ВЗО). в . -инсулин (ДАИ), получаемый из инсулина свиньи по методу БсЬппгй, Сначала проводят связывание ДАИ с три пептидом гЬг-рЬе-рЬе. В качестве реакционной среды используют смесь, состоящую на 67 Е из органической Фракции (смесь диметилформамида и этанола 1: 1) и на 337 из 0,5 .М трис-НС 1 З 0 буфераВ этой среде растворяют навеску ДАИ до концентрации 13,6 г/л и навеску трипептида до концентрации 0,067 М, С помощью 0,1 М раствора ИаОН доводят рН полученной смеси до 6,5. Затем в раствор вводят трипсин . до концентрации 5 г/л и реакционную смесь инкубируют при 37 С в течение 35 мин. ДАИ-йЬг-рЬе-рЬе выделяют из реакционной системы хроматографичес ким способом и подвергают лиофилизации, Выход составляет 543, ДАИ-гЬгрЬе-рЬе растворяют в 0,2 М растворе бикарбоната аммония с рН 8,5 до концентрации 2,8 мг/мл. К этому раствору 45 добавляют 2 мкл (2,3 Е) карбоксинептидаэы. Ферментативную реакцию останавливают через 30 мин путем добавления равного объема 0,5 М раствора лимонной кислоты. Образующийся инсулин человека выделяют с помощью кристаллизации.П р и м е р 2. ДАИ растворяют всреде, состоящей на 607 из органической фракции (см, пример 1) и на 403иэ 0,5 М трис-НС 1 буфера до концентрации 32,2 г/л. Затем в этой средерастворяют триептид Ьг-рЬе-рЬе-НС 1до концентрации 0,047 М. С помощьюО,1 М раствора МаОН доводят рН полученной смеси до 6,5. После этого враствор вводят иммобилизованный насиликагеле трипсин до концентрации157 г/л и реакционную смесь инкубируют при 37 С в течение 3 ч. ДАИ-гЬг-рЬе-рЬе выделяют хроматографическимспособом и подвергают лиофилизации.Выход препарата 277.; Превращение ДАИ"-гЬг-рЬе-рЬе в инсулин человека ивыделение инсулина проводят аналогично примеру 1,П р и м е р 3, ДАН растворяют всреде, составленной по примеру 2,цо концентрации 25,2 г/л. Затем растворяют трипептид йЬг-рЬе-рЬе-НС 1до концентрации 0,037 М. С помощью0,1 М раствора ЮаОН доводят рН полученной смеси до 6,3. После этого враствор вводят иммобилизованную насилнкагеле лиэилзндопептидаэу доконцентрации 77 г/л и реакционнуюсмесь инкубируют при 37 С в течение48 ч, ДАИ-ГЬг-рЬе-рЬе выделяют хроматографическим способом и подвергают лиофилизации. Выход препарата383. Превращение ДАИ"СЬг-рЬе-рЬе винсулин человека и выделение инсулина .проводят по примеруИдентичность получаемого препарата с инсулином человека подтверждена данными аминокислотного анализа,свидетельствующего о полном соответствии аминокислотного состава, получаемого препарата и инсулина человека. Высокая чистота (гомогенность)получаемого препарата инсулина человека доказана методом жидкостнойхроматографии высокого давления (одиносновной пик при времени удержания1089),
СмотретьЗаявка
3582755, 20.04.1983
Акцо Н. В
ГЕЙСБЕРТ ВИЛЛЕМ КАРЕЛ ВАН ДЕДЕМ, ФРАНСУА ЭГБЕРТ АБРАХАМ ВАН ХАУДЕНХОВЕН
МПК / Метки
МПК: A61K 38/28, C12P 21/00
Опубликовано: 15.05.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1232148-sposob-polucheniya-insulina-cheloveka.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения инсулина человека</a>
Предыдущий патент: Способ изотермической закалки стали
Следующий патент: Погружная капсула для введения испаряющихся добавок в расплав чугуна или стали
Случайный патент: Устройство для контроля работоспособности супергетеродинного приемника