Способ разделения популяций клеток

Номер патента: 1169615

Авторы: Клюкин, Марголис, Намиот

ZIP архив

Текст

011696 СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 4 А 61 В 10 МО ИСАНИЕ ИЗОБРЕТ ТОРСКОМУ ТЕЛЬС(Су 59 ПОПУинеи ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ 1) 3442452/28-13(53) 635.375(088.8)56) С. Ке 1 ХйетайгЬц 1 и др.па 1 с, 1971, т.211, вып. 4,(54) (57) СПОСОБ РАЗДЕКЛЕТОК, включающий п к исследуемым клеткам маркирующихантител, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью ускорения и повьппения выхода клеток, специфические антитела свяйывают с липосомами, содержащими монокристаллы ферромагнитного материала, а разделениеосуществляют в неоднородном магнитном поле, при этом создают дрейфградиента в направлении, в которомпроизводят выделение данного типаклеток.1169615 Составитель Г.КрюковаТехред О,Неце Корректор О.Тигор Редактор А,Ревин Заказ 4643/4 Тираж 722 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к биофизике и может быть использовано для создания высокопроизводительных и се- лективных приборов, сепарирующих клеточные популяции, 5Цель изобретения - ускорение и повышение выхода клеток.Способ осуществляют следующим образом.Используют монослой Ь-клеток, 10 предварительно инкубированный в среде с конканавалином А. Используют также магнитолипосомы с антителами против конканавалина А. Магнитолипосомы получают из дистероилфосфа тидилхолина. В круглодонную колбу помещают раствор липида в хлороформ- метаноле (2:1) и добавляют ферромагнитные частицы (диаметром 50 нм) 15 мг липида в 3 мл растворителя 20 смешивают с 2 мг частиц и содержимое. колбы выпаривают при вращении на роторном испарителе. К образовавшейся пленке приливают 1 мл буферного солевого раствора или раствораХэнкса 25 и колбу интенсивно встряхивают, Полученную эмульсию подвергают ультразвуковой обработке в течение 30 с при 55 С на приборе УЗДН, В среду перед озвучиванием добавляют антитела против конканавалина А. От несвязавшихся антител липосомы отделяют4 кратным центрифугированием(2000, 5 мин), Магнитолипосомыинкубируют с клетками в течение20 мин, Полученные клетки смешиваютс 1,-клетками, не имеющими на себемолекул конканавалина. Образовавшуюся смесь пропускают через устройство, представляющее собой трубку,внутри которой действует стационарное магнитное поле с периодическименяющимся вдоль этой трубки градиентом напряженности. После этого измеряют концентрацию полученных конканавалином клеток до и после разделения. Выделенная фракция налипалана стенки трубки вблизи полюсов поля, Обогащение этой фракции клетками,имеющими на себе конканавалин А, посравнению с первоначальной смесьюсоставляло 4,7 + 0,2, Эффективное время составляло 3-5 мин. За это времяразделяли порядка 1 млн клеток, таккак эффективная скорость разделениясоставляла несколько сот тысяч клеток в мин, что более чем на порядоквыше, чем у известного способа.

Смотреть

Заявка

3442452, 21.05.1982

МГУ ИМ. М. В. ЛОМОНОСОВА

НАМИОТ ВЛАДИМИР АБРАМОВИЧ, МАРГОЛИС ЛЕОНИД БОРИСОВИЧ, КЛЮКИН ЛЕМАРК МИХАЙЛОВИЧ

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00

Метки: клеток, популяций, разделения

Опубликовано: 30.07.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1169615-sposob-razdeleniya-populyacijj-kletok.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ разделения популяций клеток</a>

Похожие патенты