Способ диагностики флегмоны

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ СПУБЛИН ОПИСА АВТОРСК ОБРЕТЕНИЯ ЬСТВУ 1 щ ир у ИЕ ИЗМУ СВИДЕ актив ервферв- йся тем, чтои ускорени еф й медиА. Богогосударственнт им. акад. овленн а: фер о ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ(56) 1. Есимов А. Ж. Особенностиканонического течения воспалительныхпроцессов челюстно-лицевой областив пожилом и старческом возрасте. -Здравоохранение Казахстана, 1977,Мю 3, с. 70-80.2. Авакимян М. А. и Киселев В, А.Активность щелочной фосфатазы нейърофильных лейкоцитов у больных в клинике хирургической стоматологии.фСтоматология, 1977, % 4, с. 85-86(54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИФПЕГМОНЫ путем определенияности ферментов лейкоцитов пческой крови, о т л и ч а ю щ и, с целью повышении точия способа, в лейкощютахпр деляют активность восстанго никотинамидадениндинуклеотидроцианид оксидоредуктазы и цринии ее активности диагностицируютфлегм ну1 10Изобретение о носится к медицине, в частности хирургии, а также клики ческой биохимий и может быть исполь зовано для диагностики флегмон.Известен способ диагностики флег.моны на основании клинико лабораторных исследований крови 1.Однако этот способ не всегда достаточно информативный, так как характер течения флегмон изменчив, в частности появляются атипнчные воспалительные йроцессы со склонностью к рецидивам и тяжелым сложнениям при мало измененной картине крови, Измене ния в крови лишь совместно с другими симптомами могут являться признаками воспитальных изменений.Известен также способ диагностики флегмоны путем определейия активности ферментов лейкоцитов периферичеокой крови. 2Недостатками известного способа являются длительность (22-24 ч) -и недостаточная токсичность.Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа.Указанная цель достигается тем, что согласно способу диагностики флегмоны путем определения активности ферментов лейкоцитов периферической крови в лейкоцитах определяют активность восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (НАДН); ферроцианид окжредуктазы и при снижении ее активнооти диагностируют флегмону.Способ осуществляют следующим образом.Из вены берут 10 мл крови и выливают в пробирку с 2,5 мл 3%-ного раствора этилендиаминтетраацетата натрия. Пробирку устанавливают под углом 30 к вертикальной плоскости на 45 мин при 20 С. Затем отбирают верхний плазменный слой, содержащий лейкоциты. Последний центрифугируют при 800 об/мин в течение 5 мин. Недостадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов суспендируют в.3 мл 0,25 М раствора сахарозы на 0,05 М трис-НСВ буфере, рН 7,5. Подсчет лейкоцитов ведут в камере Горяева. Суспензию 05775 2лейкоцитов гомогенизируют в течение3 мин в стеклянном гомогенизаторе,помещенном в ледяную баню, Затемопределяют активность НАДН; ферроциацидоксидоредуктазы спектрофотометрнческипри 30 С. Реакщонная смесь состоитиз 0,167 М сахарозы, 0,05 М трио-НС 6буфера, рН 7,5,0,0017 М цианистогокалия, 0,00025 М восстановленного30 никотинамидадениндинуклеотида (НАДН),, 0,001 М ферроцианнда калия и 0,3 мллейкоцитарного гомогената в конечномобъеме 3 мл. Реакцию начинают прибавлением ферроцианида калия. АктивностьЛ фермента выражают количество наномолей ферроцйанида калия, восстановленного субстратом, (НАДН) за 1 минна 10 лейкоцитов. Миллимолярныйкоэффициент экстринкцни для ферроциа 20 нида калия КЙ( СЙ) )при восстановлении его в ферроцианид калия, ГеСИЦ при 420 нм составля т 1,03.У здоровых людей активность НАДН:/ферроцианид оксидорекдуктазы состав 25 ляет 335 + 39 (М й 1 т нмоль/мин/10лейкоцитов,1На основании обследования больныхвыявлены флегмоны легкой, среднейи тяжелей формы. Активность НАДН:З 0 ферроцианид оксидоредуктазы в лейкоцитах этих больных соответственносоставляла 195 + 15, 143 + 4 или57 + 11 нмоль/мин/10 лейкоцитов.Установлено, что чем тяжелее состоя 35 ние больного, тем ниже активностьфермента. Различия между активностьюфермента у больных всех трех формфлегмон достоверны (р ( 0,01),Предлагаемый способ повышает40 точности яагностики, а также сокращает время диагностики в 12 раз. Высокая точность диагностики обуолавлнвается тем, что результаты иссле довання цифровые фиксируются спекв рофотометрически с точностью до 0,005 ед.оптической ппотности. Объективностьоценки ферментативной активности лейкоцитов увеличивается еще и потому, что в реакционной среде находятся ты сячи лейкоцитов.Заказ 1969/6 Тираж 711 Подписное ВНИИПИ. Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП фПатентф, ул. г. Ужгород, ул. Проектная, 4