Йонушене

Номер патента: 1597405

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Гуленко, Данилявичюте, Денис, Зингер, Йонушене, Карпавичюс, Степонавичюс, Удовенко

МПК: C12Q 1/37

Метки: активности, единицах, международных, протеолитической, ферментов

...пробирки вместимостью 20-25 смз наливают по 1 смз 1%-ного раствораИ,И-дикарбамидоэтил- с-каэеина и термостатируют в ультратермостате при40 С 5 мин. Наряду с ними термостатируют и ферментный раствор. В каждую15974пробирку с термостатированным раствором И,М-дикарбамидоэтил- о( -казеиназ5добавляют по 1 см термостатированного раствора фермента, содержимое перемешивают, выдерживают при 40 Со 510 мин. Через 10 мин пробирки переносят в кипяченую водяную банЬ и выдерживают в ней 2 мин. Затем в пробиркис инкубационной смесью добавляют по10 см О, 1 М боратного буферного раст 3вора (РН 9,3) и по 1 смз 0,7%-ногораствора 2,4,6-тринитробензолсульфокислоты, реакционную смесь энергичновзбалтывают и выдерживают при 30 С30 мин, после чего добавляют по 1...

Номер патента: 1161552

Опубликовано: 15.06.1985

Авторы: Вайткене, Воробьев, Глемжа, Денис, Йонушене, Кюдулас, Лауцюс, Степонавичюс

МПК: C12N 11/00

Метки: иммобилизованных, лигандов, нуклеофильных

...с водой (1:1), суспендируют в 800 мл 0,.1 М Фосфатного буфера рН 7,2, добавляют 400 мл раствора протосубтилина Г 10 х (содержание белка 3 мг/мл) и перемешивают10 ч при 10 С. Полученный продуктпромывают 1 М раствором БаСВ до исчезновения белка в промывных водахи 1 л смеси этанол: 1 М БаСС (1:1).Получаются 250 г влажного препаратаиммобилиэованной протеазы В. яцЬСИя с активностью 1,8 ед/г сухоговеса и содержанием белка 5 мг/г сухого носителя. За единицу протеолитической активнооти принимают,количество фермента, которое за1 мин при 37,0 + 0,5 С превращаетв неохлаждаемое трихлоруксусной кислотой состояние казеинат натрия вколичестве, соответствующем 1 мкмольтирозина.П р и м е р 2. Иммобилизация щелочной протеазы В. яоЪСЫя на...