Патенты с меткой «рибофлавинкиназы»
Способ определения активности рибофлавинкиназы
Номер патента: 1631089
Опубликовано: 28.02.1991
Авторы: Кащенко, Преображенская, Сибирный
МПК: C12Q 1/00
Метки: активности, рибофлавинкиназы
...0,02 МИа - фосфатный буйер рН 8,0. Пробы инкубируют в течение 1 ч при 37 дС и прогревают на кипящей водяной бане 5 мин. К охлажденным пробам добавляют дрожжевые клетки из расчета 10 мг клеток (сухой вес) на 1 мл пробы, после чего пробы инкубируют с перемешиванием 30 мин при 30 С и удаляют осадок центрифугированием при 1000 об/мин в течение 3 мин. В полученной надосадочной жидкости определяют концентрацию ФМН флуорометрией пробы на электрофлуориметре ЭФ-ЗМ. Интенсивность флуоресценции исследуемой пробы возрастает линейно в зависимости от содержания рибофлавинкпназы в пробе в диапазоне от 4 х 10 до24 х 10 Е/пробу (см,чертеж). За единицу активности (Е) рибофлавинкиназы принято количество фермента, необходимое для синтеза 1 мкмоль ФМН за 1...