Способ определения возраста умершего

Союз Советских Социалистических Республик(51) И. Кл.е А 61 В 1000 Государственныи комит Совета Министров ССС оо делан иэооретеиий и открытий(45) Дата опубликования описания 2 8. 06,77(53) УД 2.511 88.8 М. Жминченко, Н. Н, Пятницкий, Н. П, Сутоняева и С. Г, Ахметкалиев 2) Авт етен Инсгигуг питания АМН ССС 71) Заявител 54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВОЗРАСТА УМЕ я устатрупо и гру ости, Извес возрастаи окостенопы и кисмершегония труб и исос Цельюточност вышение 1 О т обретение относится к судебной медицине и может найти применение новления возраста неопознанны охранившимися мягкими тка тен способ определенияпо величине зон роста чатых костей, костей ст тоянию швов черепа 1изобретения является иисследования. Это достигается тем, что в интиме аорты определяют концентрацию обшего холестерина, плотность клеточной заселенности и толщину, после чего по таблицам определяют 5 возраст умершего.Участок грудной аорты с видимонеизменной интимой размером 4 х 2 см вырезают в области передне-боковой стенки на уровне отхождения первой пары межреберных артерий и режут на два смежных участка, От первого участка отделяют при помоши пинцета и ножниц видимонеизмененную интиму от медии. Кусочек интимы взвешивают и навеску интимы помещают в чистую пробир ку, заливают 50-кратным объемом расгвора Блюра ( 3 ч, этилового спирта и 1 ч.диэтилового эфира), Экстоакция липидов идетпри комнатной температуре ( в темноте) втечение 6-7 суток. Общий холестеоин определяют по общепринятой методике.Второй участок аорты фиксируют в10%-ном нейтральном формалине, проводятчерез спирты, после чего заливают кусочекв парафин и приготовляют срезы на микрооме (толщиной 4-5 мкм),Для гистологического исследования срезы окрашивают гематоксилином - эозином.Плотность клеточной заселенности интимы грудной аорты определяют как среднееколичество ядер клегок ингимы, приходяшихся на одно поле зрения (обьехгив 90 имм.),2в пересчете на площадь в 1 ммДля измерения толшины интимы срезыокрашивают резорцин-фуксином Вейгертаили любой другой краской по методике, выявляк)шей эластичные мембраны, При помощиокляомикрометра измеряют толщину интимы,Для уменьшения ошибки при определениивозраста пообы дублируют, 5510241 О полученным измерениям и соответстцутсшл формулам для тоех показателей наЛ:афпг ВОЗОаСт ИнтИМЫ ПО КаЖДОМУ ИЗ ИССЛЕ. - Овацных показателей:1 ) ОПДГдСЛЕН 11 Е ВОЗОаг. Га ПО С ОдсрЖа НИЮО,." Г О 1 г СтвоинаИ 1 ТИЛгЕ".15 ЖдХ Е,д .,О, (1)2н:Г р 11 О О.зрсОт 1:;Г 10 ДО9 лет;99,.:"5 Е - гр. 240)- (2)Х 2в ервэле возраста 3 лег и "арше. 102) Опр. делецО возраста по толщине интимь 1;= 5148 (гДЕ) (3)для лиц в интервале между 10-29 годами;б,= 102,0 (,Д - Г" 50) (4) 15Д,1 Я 1 ГИЦ СТЭОГЕ 1 г ЛЕТ.3) Опредс 11 ение возрас Гп О 11 лотностиК;ЕТОг 1 НО За "СЛСННОСТП НТИМЫ;- ;, 0 (,",сс 4700 - 1, Г) (5)1 ИТОРЯалг воздаста Г)т .10 до 2ле Г;=- 81 Я, гоГ 00 -ЕО,) (6)для лиц старше 30 лет.Ис:комый возраст равен среднему ариф.Л ."Гиг 1.СКО". -КСЕгРИЛЕНТЯПгно ГОЛгЧЕННЫХ.Оной засел;.Иности интимы ()Х л +Ь 30РЕКС.ЕНДУНТСЯ СЛЕДУЮШаЯ ПОСЛСДОВатЕЛЬгость использОГаНя фоомул, если предварит льцо не.ьзя установить примерный возраст; полученные по трем показателям данные подставллют в формулы (2), (4), (6) 35в том случае, если экспериментальный возраст по формуле (7) оказался ниже 30 лет,определяют возраст по формулам для трехпоказателей (1), (3), (5) и находят искомый возраст по формуле (7), 40П р и м е р 1. Определение возрастаумершего по содержанию общего холестерипа, видимонеизмененной интиме груднойОтш,От умершего берут участок аорты раз- ЫлгОл Зх см с видимонеизмененной интил:О в Области отхождения первой пары межреберных артерий. Интиму отслаивают отподлежащей медии и кусочек интимы взвел кгт НЯ Тороионных ВССах ( НаВЕСКа ДОЛЖка бать весом не менее 150 мг). Записыпак, величину веса кусочка, которая необходима при расчете концентрации общегоОльстер ина ь исследуемой пробе, Павескутл 1, 1:ОлОшают в чистую обезжиренну 1 о 55пробирку и:,аливскгГ 50-кратным обьемом.;.Си Ьл 1 ора ( 3 ч. этилового спирта и1 ", диэтилового эФира), 1 кстракцию лидиюц производят при комнатной температуре,Гс л Отс в течение 6-7 суток. Затем 60 фильтруют раствор через обезжиренныйфильтр и пробирку с фильтром помешают в.7 Оводяную баню при температуре 60-70 Свыпаривают растворитель и в каждую пробус экстрагированными липидами для определения общего холестерина добавляют следующие реактивы: 2 мл хлороформа, 0,5 млуксусного ангидрида, 3 капли концентрированной серной кислоты. Пробирку встряхивают 6-8 раз и Оставляют в темноте на25 мин. Затем колориметрируют на фотоколориметре с красным светофильтром в кювете с рабочей длиной 0,5 см,Контроль: 2 мл хлороформа + 0,5 мл уксусного ангидрида + 3 капли серной кислоть;.После колориметрии вычисляют абсолютноесодержание холестерина в данной пробе попредварительно построенной калибоовочнойкривой на основании стандартных проб с чистым холестерином. После этого абсолютцое содержание холестерина в данной навеске пересчитывают в мг %,По описанной выше методике в данномпримере было получено, что концентрация общего холестерина в аорте М 29 была равна Х = 2100 мг %. Логарифм этой величины равен 3,3222. Подставляют логагрифлвеличины концентрации холестерина в формулу (2) и находят экспериметальный возраст по холестерину:99,65 ( Яд 2100- ВУ 240) =99,65:93,87 года.Искомый возраст по концентрации холестерина равен Е = 93,87 года и превышает паспортый возраст равный +л= 87 годам на + 7,89%.П р и м е р 2, Определение возрастаумершего по толщине видимонеизмененнойи 1 т 1 мы грудцой аорты.От умершего берут участок грудной аорты размером 2 к 0,5 см с видимонеизмененной интимой в области отхождения первой пары межреберных артерий. Вырезаюткусочек аорты для приготовления блоков игистологических препаоатов-( 1,50,5 см),Фиксируют кусочек в 10%-ном нейтральномформалине в течение 5-6 дней, затем промывают в проточной воде в течение 1 суток и для обезжиривания проводят кусочек через батарею спиртов, начиная от 70 О спирта,и заливают в паоафин. При этом необходимотканевый блок ориентиоовать строго перпендикулярно плоскости среза. Раклеивают надеревянные блоки и делают на микротомесрезы толщиной 4-5 мкм. Грезы окрашивают резорцин-фуксином Вейт ерта,Окрашенные срезы помешают на столикмикроскопа и окуляр-микролетром измеряюттолшину интимы от внутренней эластическоймембраны до края эндотелия сосуда. Измеряют последовательно шагом в одно поле зрения микроскопа толщину интимы, полученныевеличины складывают и усредняют. 5По описанной выше методике в данномпримере было получено, что средняя толшинаинтимы аорты29 равна Ъ = 350 мкм,п = 2,5441, Подставив логарифм величины толшины интимы в формулу (4), находили экспериментальный возраст по толщине интимы 11 = 102,9 ( 1350 -Я 50 ) == 86,96,Искомый возраст по толщине интимы равен Ъ = 86,96 и отличается от паспортноговозраста 6, = 87 на 0,04 %,П р и м е р 3 . Определение возрастаумершего по плотности клеточной заселенности видимонеизмененной интимы груднойаорты,От умершего берут участок грудной аорты размером 2 х 0,5 см с видимонеизмененной интимой в области отхождения первой пары межреберных артерий. Вырезаюткусочек аорты размером, соответствуюшимдля приготовления блоков и гистологических препаратов (1,5 х 0,5 см). Фокусируютв 10%-ном нейтральном формалине 5-6 дней,затем промывают в проточной воде в тече- Зоние 1 суток и для обезжиривания проводяткусочек через батарею спиртов, начиная со70 спирта, и заливают в парафин, Наклеивают на блоки и режут на микротоме срезытолщиной в 4-5 мкм. Окрашивают срезы гематоксилиномэозином.Окрашеннье соезы помешают на предметный столик микроскопа и под иммерсией считают количество ядер интимы, приходящееся на одно поле зрения микроскопа. 40Просмотр клеток ведут последовательно отэндотелия интимы вниз до внутренней эла-,стической мембраны, затем переходят насмежньй участок, соблюдая принятую последовательность, Считают 50-100 полей зре ния и вычисляют среднее количество ядер, приходящихся на одно поле зрения. Зная плошадь поля при данном увеличении и среднее количество ядер клеток на одном поле зрения, легко вычисляют количество клеток,2приходящихся на 1 ммВ примере подсчитано, что плотность клеточной заселенности интимы аорты29 равна (;) = 420 клеток / мм, ГД"4 =8420= =2,6232. Подставив логарифм величины плотности клеточной заселенности интимы в формулу (6) для нахождения возраста по плотности клеточной заселенности, получают: О = 81,38 ( 8 к 4900 - 1 д 420).=- 81,38 3,6 902-2,62 32) =81, 381,06 7 = 86, 8 3 года. Искомый возраст по плотности клеточной заселенности интимы равен 1=86,83 года, что отличается от паспортного возраста 1, = 87 на 0,19 %.П р и м е р 4, Определение возраста умершего по трем показателям: содержанию общего холестерина, толщине и плотности клеточной заселенности интимы грудной аорты.Определение возраста проведено у 30 лиц,умерших в возрасте от 10 до 87 лет. Ходопределения возраста по каждому показателю описан в примерах 1 - 3.В табл. 1 определены результаты определения концентрации обшего холестерина,толщина и плотность клеточной заселенности интимы и паспортный возраст.В табл, 2 приведены сравнительные данные паспортных возрастов с экспериментально полученными возрастами по трем показателям старения интимы грудной аорты,Из дапных табл, 2 следует, что определение возраста по трем показателям старения интимы дает наименьшую ошибку отклонения от паспортного возраста 1.%=-9,7%,чем определение возраста по холестеоину(по одному из трех показателей), Определение возраста по холестерину дает ошибку отоклонения от паспортного возраста ь 1 4=- хсо со с со рсо со о ++ + со о о соо л Р 3 со о с со со"сЧ сч со сосо ол сф с со г.1 фтч со О Осо" о" щ" Р 3" асо" щ"мс л л со л р с) м03 сЧ о со Я со +л - сцо о о о с со лс в л я со О с о со+ 1 + + О "д" СОс( л с + + СО;" ЯО С В1 Г- а С- О л 0, СОСО СО Г СО 0 " Г- тс О - -,. (- Ю. О О З СОСО с 0 1 1 сО т:тСО Г- (- Я т СО СО СО СО СОсо сОоа СО сО СО СЭ Я (.0 с 0 СО Л СОо ю а Г- (- С с сСО 0 ГСО О СО СО О сО СОдлд СО 1 1 СОсО СО СО ОО ОО СО СО СО СО 0 О л с сОа СО С- сО а О л л Ст Я С;т Ст( СЧ Ст Я Я Ст Я СО Ст( д Го с СО СО а с") Жс)л (О1 С(т Ст С 3 ст 1 (с( т 01 Л СО сО Ж с 0 ГЯ Ж ГЛ С Л СО со сО СО с 0 сО с 0 С 0 01 03 аказ 46,/1 Тираж 677 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССРпо делам изобретений и открытий113 О 35, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Формула изобретения Способ определения возраста умершего, заключающийся в определении показателей старения тканей, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности исследования, в интиме аорты определяют концентрацию общего холестерина, плотность клеточной заселенности и толщину, после чего по таблицам определяют возраст умершего.Источники информации, принятые во внимание,при экспертизе:1 "Вопросы антропологии". 1960, Мо 3, с, 118-129.