Способ регулирования половой деятельности млекопитающих

СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛ ИСТИЧЕ СКИ и) ЕСПУБЛИК 51)5 А 61 К 37 0 е пАтентнОРР) НИ ЗОБР АТЕНТУ о тан Граф, Анико Хорер Коватш и Иштван ОЙ ОВАНИЯ ПО КОПИТАЮЩ животново ии половой ИХдстве, адеятель 1) 4027844/152) 18.07.866) 30,08,93. Бюл, М 321)2763/8582) 18.07.85 .33) НО1) Иннофинанце Алталанош Иннензинтезет (НО)72) Чаба Банхази, Золат, Дьердь Кери, Эстеплан (Н 0)56) Патент США ЬЬ 4410514,л, Е 07 С 103/52, 1983 г.54) СПОСОБ РЕГУЛИРЕЯТЕЛЬНОСТИ МЛЕ57) Использование: вменно в регулирован Изобретение относится к области живоноводства, а именно к регулированию поовой деятельности млекопитающих.Цель изобретения - повышение эффективности способа,П р и м е р 1, Провоцирование супаровуляции в инфантильных крысах женской особи.60 штук инфантильных самок крыс ввозрасте 21 день, весом 7 - 8, граммов внут рибрюшинно были подвергнуты обработке препаратом О - РЬе; 61 п -бпНН, растворенб 8 ном в физиологическом растворе поваренной соли. В зависимости от вида обработки животные были разделены на несколькогрупп, В серии обработок, продолжавшихся от одного дня и до 8 дней, отпускали предварительные дозы порядка 1 гц в день или дважды в день.После завершения обработок всех жи вотных умертвляли эфирным паром, их яичности млекопитающих; Сущность изобретения: животным в качестве соединений Оп ЙН-типа вводят полипептид у 1 р-Нз - Тгр - Бег - Туг-Х - Хг - Хэ - Рго-Х 4 где Х 1 - О - рЬе, Х 2-Тгр или 1.ец, Хзео или 61 п, Х 4 - 61 у-МН 2 или ИН - Ет, Препарат вводят в количестве 0,01 - 500 мг/кг с кратностью введения 1 - 25 раэ и с интервалом введения 2 ч 7 дней, Способ позволяет провоцировать суперовуляцию у инфантильных животных, провоцировать сперматогенеэ у животных, находящихся в состоянии олигоспермии, обусловленной сезоно 1, стимулировать функции яичников у инфантильных животных и вне сезона, а также получать яйцеклетки животных с целью выращивания эмбрионов в лабораторных условиях,ники в результате операции были изьяты после наступления смерти, 24 часа спустя после последней обработки. Анализ осуществлялся визуально и на основе гистологических проб. В яичниках контрольных животных было найдено множество фолликул, находящихся в развитии, однако ни один фолликул не достиг размера фолликула Графа, не было также ни желтых тел, ни СогрцзЬаееоггЬадсогп. В противоположность, этому, во всех обработанных группах можно было обнаружить гормональное действие, которое сказывалось в росте фолликул, в преобразовании в фолликулы Графа, в овуляции больших фолликул и в образовании нормальных желтых тел, Яйцевод и матка были также увеличены, Иэ 60 обработанных животных всего 4 не показали реакции на обработку. У животных, которые в течение 4 дней ежедневно получали дважды дозу в количестве 2 мкг аналога бпРН и на4-й день были подвергнуты обработке в течение 6 часов дозой в количестве 10 мкг после того, как они получили дозу 2 мкг, в яичниках были в большом количестве размягченные фолликулы Графа, находящиеся непосредственно перед овуляцией. Число окончательно созревших фалликул Графа в день находилось в пределах между 60 и 90, в то.время как в случае выросших животных нормальная величина составляла 12. Вторую группу животных обрабатывали подобным же образом, с тем отличием, что обработка продолжалась свыше 6 дней. В случае этой группы эффективность суперовуляции оценивали по числу нормальных желтых тел, появившихся в яичниках, Аналогично результатам, описанным подробно выше, количество желтых тел на каждое животное в день здесь также находилось в пределах между 60 и 90, Гистологический анализ подтвердил этот результат в достаточно полной мере.П р и м е р 2. Провоцирование суперавуляции на инфантильных самках мышей,Аналогичным образом, как это описано в примере 1, были подвергнуты обработке в общем 105 самок мышей, которые имели возраст 28 дней и вес 5-6 г. Животные, обрабатываемые в течение 1 - 8 дневй, ежедневна получали 1 - 5 г 9 О-РЬе, 6 и, 6 у 6 пВН-этиламида. Между отдельными обработками интервал составлял 4 часа. Яичники были удалены через 27 часов после последней инъекции.Яичники контрольной группы имели матово-желтый цвет и гомогенную структуру, в некоторых яичниках находились 1 - 2 растущих фолликул. 8 группах обработанных животных на всех яичниках, увеличенных яйцеводах и матке можно было наблюдать действие гормона, У животных, которые ежедневно адин раз получали дозу 1 г 9, а на 3-й день, через четыре часа после получения дозы 1 мкг названного аналога 6 пВН, в яичниках были обнаружены окончательно созревшие, нащупываемые волнистые фолликулы Графа, а именно, на каждое животное па 45 - 70 штук. В группе, которую обрабатывали аналогичным образом, но в течение 5 дней, на месте фолликул Графа образовались нормальные желтые тела в вышеназванном количестве, Результат гистологического исследования соответствовал визуальной оценке.Эти результаты явились подтверждением результатов способа согласно примеру 1.П р и м е р 3. Провоцирование суперовуляции на инфантильных кроликов,20 молодых кроликов породы "белый жемчуг", родившихся в условиях массового 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 содержания, в возрасте 42 дней подвергались обработке в течение 3 дней ежедневно дважды внутрибрюшинна, каждый соответственно 5 мкг О - РЬе, 61 п - 6 пВН, Затем животных разделили на две группы, Первую группу на 4-й день обработали биологически активным веществом в количестве 50 мкг, другую группу умергвили с помощью эфирного пара. Число зрелых фолликул Графа в группе. умертвленной до обработки, служило в качестве кантрсля при установлении изменения, насступившего вследствие дозы 50 мкг, У оставшихся в живых животных наступление овуляции прослеживали на двух животных в результате лапароскопического исследования (отражение брюшной полости), осуществляемого в течение 10 часов, под наркозом. Обработка посредством 50 мкг через 26 часов привела к тому, что у каждого животного отмечалось 30 - 45 овуляций или Сагр 0 з ЬаегпоггЬа 91 сва в то время как яичники контрольных животных были не активны,Посредством этага способа уже из инфантильных экземпляров кроликов можно было получить зрелые яйцеклетки и увеличить их число в расчете на физиологическую величину,П р и м е р 4, Провоцирование суперовуляции на инфантильных свиньях,20 инфантильных самок поросят, в возрасте 100 дней подвергались обработке в течение 6 дней ежедневно, дважды внутримышечно посредством соответственно 10 мкг О - РЬе, 61 п - бпВН. Для анализа из конт 6рольных животных удалили соответственно яичник, методики исследования соответствовали методикам, описанным в примере 3, число образованных фолликул Графа сравнивалось с числом желтых тел, образованных после овуляции. Наступление овуляции наблюдали с помощью лапароскопа. Дозы, отпущенные на 7-й день, в количестве 100 мкг О - РЬе, 61 п - 6 пВН через 41 час вызвали у 10 поросят, подвергнутых обработке 15 - 36 овуляций. Обработка инфантильных поросят привела к такому же результату, как и в случае видов животных, названных в примерах 1 - 3.П р и м е р 5. Провоцирование суперовуляций на инфантильных овцах.10 ягнят женских особей, в возрасте 50 дней,в течение 5 дней ежедневно обрабатывали дважды внутримышечно препаратом О-РЬе, 61 п, 61 у -6 пВН-зтиламидов в кав оличестве 10 мкг. Дозас биологически активного вещества в количестве 70 мкг, отпущенная на 6-й день, вызвала у каждого животного 3-9 овуляций, У контрольных животных не наступило никакого изменения, 1837888А д д и ализ осуществлялся как нэ обработанныхвотных,так и на контрольных животных средством лапароскопии, Эти результаты ответствовали тем результатам, которые ли описаны в примерах 1 - 3.П р и м е р 6. Провоцирование суперуляции на инфантильном крупном рогам скоте.8 инфантильных телят, в возрасте 65 ей, были подвергнуты обработке ежеевно в течение 8 уней посредством епарата Р-РЬе, 6 и, 6 у - 6 пВН-этила 1 О м да в количестве 2 мкг. После одного днярерыва, на 10-й день животным внутриышечна вводили 100 го биологически аквного вещества. После последней и ъекции были удалены оба яичника; в обем, в каждом яичнике были найдены приерно 5-11 развитых фолликул Графа. оловина этих фолликул не нащупываласьльше как твердые, следовательно, они нах дились непосредственно перед овуляией.Этот эксперимент доказывает, что в слуе крупного рогатого скота уже из инфанильных животных можно получить есколько зрелых яйцеклеток, в то время ак взрослое животное овулирует обычно ишь одну яйцеклетку,П р и м е р 7. Провоцирование спермаогенеза у зубра, олигоспермического следствие сезонного периода, с целью олучения эякулятэ. пригодного для искуственного охлаждения и для хранения в усовиях глубокого охлаждения,От зубра, находящегося в зоологичеком саду, весом около 700 кг, в мае месяе была взята под наркозом проба спермы лектрическим способом. Было установено, что вол находился в состоянии олиоспермии, обусловленной сезоном, имптомы были следующие: в поле зрения икроскопэ, обычно используемого для иследования спермы, с 1 500-кратным увелиением, число сперматозоидов было 5-20, одержание дефектных сперматозоидов сотавляло 75 - 80 О, а плотность спермы - 0,5. перма такого качества непригодна для оподотворения,Животное было подвергнуто обработке посредством инъекционного прибора, раотэющего на сжатом воздухе), дважды в еделю препаратом О - РЪе,6 и -6 пВН в оличестве соответственно 200 мкг. На 55-й ень обработки это животное дважды, с инервэлом в один чэс, доводили до семяизержения. Оба эякулята были соед.нены вместе; плотность составляла 4, подвижность 55 оь. Сперма была подвержена глубокому охлаждению, а затем в результате5 10 15 20 25 30 35 40 6- 6 пйН в количестве 1, 5, 10, 50 мкг. На 3-й неделе после начала обработки были изъяты пробы спермы, В этих пробах число сперматозоидов составляло примерно 60-70 О физиологической величины, число дегенерированных сперматозоидов превышало 40 ОД. Дефектные формы были в основном формы мужских особей (капли плазмы на средней части шейного отдела). На 7-й неделе после начала обработки под наркозом снова собрали эякулат, От всех животных можно было успешно взять сперму, объем зякулата составлял порядка 1,2 мл и 3,1 мл, плотность находилась в пределах 3, подвижность -65, численно значительно превышала физиологическую величину. 5 0 5 глубокого охлаждения определяли наступившее снижение подвижности, Оно составляло лишь 5.С помощью этого способа удалось оказывать влияние на сперматогенез племенного животного таким образом, чтобы вместо эякулата, непригодного для оплодотворения, можно было получить сперму хорошего качества, пригодную как в свежем состоянии, так и после хранения в условиях низкой температуры для оплодотворения нескольких коров (всего 14),П р и м е р 8. Провоцирование сперматогенеза у красных (рыжих) лис, находящихся в состоянии олигоспермии, обусловленной сезоном (чцрез чцрез).На сперматогенез рыжих лис, содержащихся в зверинцах (охотничьих угодьях), которые находились в олигоспермическом состоянии, обусловленном сезоном, оказывали влияние с той целью, чтобы обеспечить искусственное оплодотворение черно-бурых лис и голубых песцов, содержащихся в случном пункте, для того, чтобы получить особые и высококачественные гибридные меха, Из специальной литературы известно, что все подвиды лис лишь один рэз в год находятся в состоянии течки, и Кроме одного этого периода половые железы обоих полос являются полностью неактивными, Между течкой отдельных подвидов существует разница во времени порядка нескольких месяцев (рыжая лиса: январь; голубой песец: апрель до мая). Результаты исследований сравнивали с изображением спермы популяции, находящейся в сезонной течке, у которой среднее количество эякулата составляло 2 мл, плотность 3, а подвижность 50 - 60 О. Это рассматривали как физиологическую величину.Пять половозрелых самцов рыжих лис, весом в среднем 8 кг, обрабатывали, начиная с апреля, в течение 7 недель, дважды в не елю, посредством препарата О-Р 6 е, 1837888(Самцы к этому моменту были отделены от самок, для опорожнения посредством копуляции не было возможности), Пробы спермы в зависимости от качества были разделены на группы и охлаждены в условиях низкой температуры, После разведения и глубокого охлаждения, а затем после оттаивания (размораживания) подвижность спермы, охлажденной до -196 С, составляла 45%. Приприменении спермы, подвергнутой глубокому охлаждению, можно было - при использовании программирования бпВН (см.пример 17) и техники искусственного оплодотворения - обеспечить нормальную беременность у голубых. песцов.В результате однократного отбора эякулата, производимого у пяти лис, можно было получить 56 доэ спермы, пригодной для оплодотворения. Такая техника приемлемадля получения ценных мехов на крупныхфермах.П р и м е р 9. Стимулирование физиологической нормоспермии на бенгальском тигре для получения гиперспермии, позволяющей глубокое охлаждение.Бенгальский тигр, находящийся во владении зоопарка, в возрасте 8 лет, имеющий вес около 200 кг, регулярно спаривался, его самка прежде каждый год была беременной. Зная об этом, от тигра под наркозом электрическим путем в период спаривания была взята проба спермы. Было установлено, что плотность спермы составляла 3, подвижность 30%, а количество эякулата 0,2 мл, Эякулат показывал картину физиологической нормоспермии. Такое небольшое количество эякулата нельзя было подвергать глубокому охлаждению по техническим причинам, Для того, чтобы избежать повреждения печени, наркоз можно осуществлять максимально через каждые 4 дня и поддерживать максимально в течение 4 - 5 часов. Такой способ сбора спермы является неприемлемым,Самца закрыли в отдельную клетку и в течение 12 дней ежедневно обрабатывали препаратом этиламида в количестве 10 мкг. Это биологически активное вещество было растворено в 1 мл физиологического раствора поваренной соли. и его применяли внутримышечно посредством прибора для инъекций, работающего, на сжатом воздухе. На 12-й день это животное под наркозом, электрическим путем, дважды, с интервалом в один час, было доведено до семяизвержения, при этом было получено 1 мл или 0,8 мл спермы. Плотность соединенных проб составляла 4, подвижность находилась в пределах 700 , Пробы спермы были охлаждены в условиях низкой температуры и раз 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 делены на 21 отдельные дозы для искусственного оплодотворения, После размораживания спермы подвижность составляла 60 о Таким образом, от бенгальского тигра можно было получить в достаточном количестве сперму, подлежащую хранению в банке спермы.П р и м е р 10, Яичниковое торможение на львах с целью контрацептэции.,В зверинцах всего мира среди крупных жищных животных показывают льва. Для различных панорам и Яа 1 аг 1-парков требуется оба пола показывать одновременно, в одном и том же жизненном пространстве, Среди крупных хищных животных лев является единственным, который хорошо размножается в неволе при достаточно хорошем питании, Вследствие абсолютного насыщения "рынка львов" желательным является разработка способа предупреждения от беременности, который будет безопасным для животного, не будет вызывать никаких изменений в его внешнем виде и его поведении, и несмотря на спаривание, способствующее появлению потомства, предупреждать беременность, Предохранение от беременности на основе сексуальных стероидов приводит к болезненному ожирению и к потере демонстрационного значения животного,Интактная плодовитая львица, находящаяся во владении зоопарка, весом около 200 кг, которая уже пять раз приносила приплод, каждые три недели была подвергнута обработке дважды посредством ОРЬе,б и -ОпВН, а именно сначала в количе 6 8стве 50 мкг, через 4 часа - в количестве 500 мкг, а затем была выдержана пауза в три недели. Такая обработка, продолжающаяся каждые три недели, осуществлялась от начала течки до 50-го дня после окончания момента течки, характерного для этого вида (то есть от апреля до августа). У животного было нормальное поведение, и оно спаривалось регулярно, данный самец, согласно исследованию, был нормоспермический, Львица в течение периода обработки не была беременной, и ни в ее поведении, ни в ее внешнем виде не наблюдалось отклонения от нормы,П р и м е р 11. Индуцирование половой деятельности подсвинок женских особей на откорме. находящихся в условиях массового содержания в половом созревании, с целью первичного стимулирования состояния, готового для зачатия,В условиях массового содержания отмечается стремление к тому, чтобы животных, предусмотренных для сохранения пого 1837888итт и м р т У с с п м 50 55 вья, племенных, как можно быстрее исльзовать для разведения, а также синхроировать для оплодотворения и огюроса в3ересах приспособления к непрерывнойнологии, Активность половых, желез 5дсвинок женскйх особей, находящихся нассовом содержании и расположенные взультате интенсивного кормления к бысому росту, в препубертанный период и вриод полового созревания является нетойчивой (лабильной), поэтому встречаетредко и рассеянно по всей популяции, -стояние, собственно, готовое к зачатиюследовательно позднее от одной берен ности. 15Для цели эксперимента на одной стэнпо выращиванию молодняка подсвинок200 будущих свиноматок. имеющихся впоряжении. были выбраны 60 животных -четом наилучшего развития, самой лучй способности оценки кормов, Их иногдаделяли на две группы, соответственно,30 животных, Обе группы животных немили, ни поили втечение 24 часов, такжеответствии с технологией, имеющей мена этой станции, Животных к моменту ихора внутримышечно обрабатывали преатом О-Рпе,би -бпВН, растворенным6 8изиологическом растворе повареннойи, Инъекции с дозами соответственно 20 30названного соединения повторялисье дважды с интервалом 24 часа. Как вбработанной контрольной группе, так иработанной группе состояние, готовое катию, наступило у первого животного че5 дней после выбора животных, Обеппы содержались в одном помещении, внаковом жизненном пространстве, принтичных условиях в течение 26 дней, докаемых технологией, В течение этого педа из контрольной группы, которую невергали обработке, 3 животных (10%, аобработанной группы 21 животное(70%)ешно достигли состояния, способногоачатию. Успешными считались лишьте 45чаи, в которых состояние, способное катию, последовало от нормальной берености и родов,ц иор ссуур зпк рв осов бп рв фс лм ген ов бэ чг уо ии еи ср оп диу пкзс уз чм н В этой серии опытов цель не распростнялась на точное установление момента уляции, потому что не имелось в распорянии достаточного количества племенных яков, Поэтому цель состояла в том, чтобы ервое успешное состояние, способное к чатию", было обеспечено в течение 26 ей, Содержание 10 беременных живоых в контрольной группе соответствовало едней производственной величине. Поэму увеличение на 60 , появившееся в результате обработки, означает существенный экономический эффект.П р и м е р 12, Устранение отсутствиятечки, обусловленной сезоном, у взрослыхлесных котов (ЕеИз зИосзтгз).Две самки лесных котов, находящихсяво владении зверинца, имеющие среднийвес б кг, цикл которых при естественныхусловиях приходится на месяцы февраль/март, подвергали обработке в августепосредством О - Рие,6 п, препарата 6 у6 8 юОпЯН-этиламида, Перед обработкой дляпроверки состояния обоих яичников поднаркозом была открыта брюшная полость,После того, как брюшную полость сновазашили, животных, при выдерживании паузы в два дня, в общем четыре раза обрабатывали биологически активным веществом,который применяли внутримышечно, растворенным в физиологическом растворе поваренной соли. Между первой и второйинъекцией выдерживали паузу в два часа;первая доза составляла 100 мкг, вторая500 мкг,Через 48 часов последовала третьядоза - 100 мкг, а еще через следующие двачаса - четвертая доза (500 мкг). На О-й, 2-й,4-й и 8-й день под наркозом вскрылибрюшную полость, изменение состоянияяичников оценивали визуально. После завершения обработки. оба яичника былиудалены в результате операции, зафиксированы и подвергнуты гистологическому анализу,На 0-й день в случае обоих животных влевом яичнике можно было увидеть 3 - 4предполагаемые вторичные фолликулы, оставшееся старое желтое тело, и в правомяичнике 5 - б предполагаемых вторичных .фолликул, В результате обработки через 4дня все вторичные фолликулы развились,превратившись в фолликулы Графа, состоялась овуляция, а на месте фолликулы находились Согрога ЬаегпоггЛацса, на путипревращения в желтое тело, Наряду сСогрога ЬаевоггЬарса росли в визуальноне учитываемом коли стве вторичнЫефолликулы, которые в результате воздействия вторичной обработки продолжали развиваться, а после применения последнейдозы в количестве 500 мкг были атретизированы посредством интрафолликулярной лютеинизации. Визуальные доказательства вполном объеме были подтверждены гистологическим анализом.Овуляция, наступившая в результатеописанной обработки, доказывает, что у вида кошачьих можно достичь оплодотворения также и вне сезона, ивне естественномсодержании также можно обеспечить получение потомства, 1837888П р и м е р 13, Обработка самки голубого песца, находящегося в периоде отсутствия течки, обусловленной сезоном, с целью стимулирования течки, обеспечивающей получение потомства.Самка голубого песца, находящаяся в периоде отсутствия течки, обусловленной сезоном, была подвергнута исследованию в декабре, под наркозом, посредством лапароскопа. Было установлено, что оба яичника были неактивными и не содержали развивающихся фолликул или фолликул Графа,Это животное в течение 10 дней ежедневно обрабатывали дважды внутримышечно посредством О-РЬе, О 1 п -ОпВН ве вколичестве 1-5 мкг, На 10-й день под наркозом снова повторили лапароскопическое исследование, В обоих яичниках находились большие желтые тела, число которых - вследствие недостаточности технических возможностей можно было оценивать лишь приблизительно - составляло 10-20, Одновременно было установлено, что шейка матки была открыта.Точнотакже в декабре подвергали обработке самку, которую вследствие грудной атрофии нужно было исключить из числа выращиваемых животных; обработку осуществляли аналогичным образом, ежедневно дважды посредством соответственно 2 мкг препарата О-РЬе, О 1 п -ОпВН. Дейсте эвие обработки прослеживали по изменению состояния шейки матки. На 6-й день после первой обработки шейка матки открылась. Потом была отпущена доза в количестве 50 мкг, Через 16 часов состояние яичников исследовали посредством отражения; овуляция предстояла непосредственно. Теперь брюшную полость полностью открыли, яичники были удалены в ходе операции, а из общего количества 11 фолликул Графа яйцеклетки были удалены в результате пункции, Было найдено 6 нормальных яйцеклеток, покрытых нормальной.С помощью этого способа было обеспечено получение яйцеклеток, пригодных к оплодотворению в лабораторных условиях, эмбрионов в период отсутствия течки в половом цикле, обусловленного сезонам, беэ нарушения нормзльного годового цикла, Это позволяет получать особое гибридное потомство при использовании менее ценных животных - реципиентов.П р и м в р 14. Стимулирование функции яичников инфантильных домашних кошек (Ре 11 з са 11 цэ боеез 11 сцз) посредством ОРЬее,О 1 пв-ОпВН.5 молодых кошек в возрасте 45 дней, вес которых составлял примерно 0,3 кг, были подвергнуты обработке, через интервал в два дня, четыре раза посредством препарата О - РЬе,О 1 п -ОпВН в количестве, соответе 8ственно, 100 мкг. Биологически активноевещество было растворено в фиэиологиче 5 ском растворе поваренной соли и применялось внутримышечно. После окончанияобработки под наркозом оперативным путем удалены оба яичника и подвергнуты визуальному анализу, Затем яичники10 фиксировали в формалине и подвергалигистологическим исследованиям, В обоихяичниках имелось 5 - 7 штук СогрцзЬаегпоггз 91 сцв, Под корой были найдены хорошо отделяемые от светлого цвета сливоч 15 ного масла, яичника, находившиеся вразвитии фолликулы, некоторые из них имели размер фолликул Графа,Эти результаты однозначно свидетельствуют о том, что яичник еще инфантильных20 домашних кошек в результате действия описанного способа обладает гистологическими и морфологическими свойствами,характерными для половозрелых животных,Таким образом, животное перед биологиче 25 ской половой зрелостью, понимаемой вобычном смысле, становится пригоднымдля того, чтобы получить (от него) яйцеклетки, способные к оплодотворению 1 и чего (влабораторных условиях),30 П р и м е р 15, Стимулирование функциияичников инфантильных домашних кошекпосредством О-РЬе, Тгр, 1 ец - ОпВН,5 молодых кошек в возрасте 45 дней,имеющих вес около 0,3 кг, были обработаны35 с помощью препарата О - РЬе,Тгр, 1 ец -е 8ОпВН, Перед обработкой левый яичник былудален оперативным путем. Животным через интервал в 2 дня в общем трижды отпускали дозы соответственно 100 мкг в виде40 раствора, приготовленного в физиологическом растворе поваренной соли; дозы вводили внутримышечно. После завершенияобработки был удален в результате операции оставшийся (правый) яичник, подверг 45 нут визуальному анализу, а послефиксирования - гистологическим исследованиям.Перед обработкой яичники, удаленныеоперативным путем, были полностью гомо 50 генные и имели цвет сливочного масла, развивающиеся фолликулы было невозможнозаметить в них ни визуально, ни в результате гистологического исследования. Послеобработки в яичниках были найдены 7-855 штук Согрцз ЬаеаоггЬао 1 сцт и много (неподдающиеся учету) фолликул, находящихся в развитииЭтот результат подтвердили данные,полученные согласно примеру 14, в полноймере также и для другого аналога гормона,1837888 Составитель А, ФилипповаТехред М,Моргентал Корректор Н, Кешеля ор 2879 Тираж ПодписноеИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушскэя наб., 4/5 роизеодстеенно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 и пособстеоеал углублению практическихзн ний относительно физиологии следующ го цикла яичников,П р и м е р 16. Стимулирование приморд альных (переичных) фолликул инфантильных домашних кошек. женских особей, (Еезс сцз оовезтсшп).5 молодых кошек е возрасте 45 дней,к торые имели вес приблизительно 0,3 кгк жбдая, обрабатывали посредством О - 10Р е, Оп -ОпйН. Перед обработкой подн ркозом был оперативным путем удаленл вый яичник. Затем эти животные в течен е 3-х дней, ежедневно, три раза черези тервалы в 4 часа, в общем девять раз, 15и лучали соответственно 0,1 мкг биологичес и активное вещество, внутримышечно, вв де суспензии, приготовленной с физиол гическим раствором поваренной соли ии опиленгликоля. После завершения обреб тки оставшийся яичник был удален операт вным путем, подвергнут визуальномуа ализу, а после фиксации - гистологичес им исследованиям, Визуально оба яичник были гомогенны, и имели цветсливочного 25м сла, обработанный яичник был несколькоб льше. В необработанных яичниках гистол гически можно было воспринять толькол шь примордиальные фолликулы, в то врем как на поверхности разреза обработанн х яичников было зарегистрированон исчислимое количество (несколько сотен)н ходящихся в развитии фолликул, показыв ющих различные стадии образования ант ума. 35С помощью этого способа удалось обеси чить одновременную стимуляцию нес ольких сотен примордиальных фолликуля чника,П р и м е р 21, Получение яйцеклеток 40к упного рогатого скота с целью выращиеан я эмбрионов в лабораторных условиях (ич сго) из культуры органа роз 1 п 1 ойов. Из животных, 30-55 минут спустя после того, как их убили и обескровили на бойне, были удалены интактные (непоережденные) яичники, и в лабораторных условиях уложили в комплексный Ас)цчап 1,К питательной жидкости в концентрации 10 до 10 г/мл добавили О - РЬе, Ои,-9 -9 6 В препарата Оу 10 - ОпКН-этиламида. Яичники, еыдерживаемые е культуре органа, овулировали в течение 16 - 43 часов, Из яйцеклеток, полученных из яичников в результате и ч 1 го спонтанно осуществляемых овуляций и последующей пункции, 85 О были способны для продолжения мейоза (восстановительного деления клетки), и их можно было успешно оплодотворять посредством хранимой спермы крупного рогатого скота и чоо, Первые два .деления клетки оплодотворенных и чего яйцеклеток можно было наблюдать в культуре.С помощью этого способа была создана возможность так же, как и при распространенной в мире технологии искусственного оплодотворения у крупного рогатого скота, "искусственно оплодотворять" непосредственно живые эмбрионы, то есть трансплантировать. На бойнях имеется возможность получения такого количества эмбрионов, которое в значительной мере превышает потребность.Формула изобретения Способ регулирования половой деятельности млекопитающих путем введения соединений ОпйН-типа, о т л и ч а ю щ и й - с я тем, что, с целью повышения эффективности способа, в качестве соединений ОпйН-типа используют полипептид ур - Н з - Тгр - Яег - Туг - Х 1 - Х 2 - Хз - Рго - Х 4, где Х 1 - О-РЬе; Х 2 - Тгр илиец; Хз -ео или Ои; Х 4 - Оу - ЙН 2 или -КН - Ет,