Способ количественного определения новокаина

(1 Ю (И) 1 В 21/78 ПИСАНИЕ ТЕНИЯ совокаинаиятакской Р 988.ПРЕДЕ(57 ти аска сигналов обретнихимину навеску с новокаина Изобретение ческой химии,количественног Цель иэобре ствительности определения но П риме р ровочной харак венного фотоме больших количеосит к аналиспособам имен ную ко воряют определения ения - повыш новокаи ние чув и спосо селективнос окаина. 1. Построен еристики для е градуиколичест еделения Точную кос 0,3 рического тв новока ОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТИЗОбРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС(71) Научно-исследовательский институт химии Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского и Саратовский государственный медицинский институт(56) Лукьянчикова Г.И., Бернштейн В,Н. фотоколориметрическое определение аюъекционных растворов новокаина. Сб. научных докладов, Изд-во Медицинского института. Всесоюзное химическое общество им. Д.И.Менделеева. Ставропольское краевое отделение. 960, в. 1, с. 31-34. торское свидетельство5159, кл. 6 01 Н 21/78СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГООВОКАИНА относится к аналитичастности к способам количественного фотометрического опре-деления новокаина - медицинского пре-парата, что может быть использованов фармацевтической промапленности.Цель - повышение чувствительностии селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентом -и-диметнламинокоричным альдегидом,растворенным в зтиловом спирте, вприсутствии додецилсульфата натрияпри рН среды 3,0-4,0. Количество идиметиламинокоричного альдегида вэтаноле 4,5 1 О -4,5 10М, количество додецилсульфата натрия 4104 1 О М. Способ позволяет повыситьчувствительность определения новокаина в 5 раз и селективность эа счетопределения новокаина в присутствиибольшого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а такжесчет воэможности определенияв биологическом обьекте - донкрови. Нижний предел обнаруже0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мп формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл убстанции сухого препарата0,00250 г помещают в мерлбу вместимостью 25 мл и раств дистиллированной воде при евании на водяной бане. Стандарт- раствор содержит 100 мкг/мл ново- а, Для построения градуировочной ктеристики в семь мерных колб емью 25 мп помещают 0,1 мл (10 мкг); мп (30 мкг)р 0,5 мл (50 мкг);0,8 мл (80 мкг); 1,0 мп (100 мкг);1, 2 мл (1 20 мкг); 1, 4 мл (1 40 мкг) стандартного раствора новокаина. Добавляют в каждую из колб по 0,1 мл 0,2/-ного раствора 1,14-10 М идиметиламинокоричного. альдегида в этиловом спирте (и-ДМАКА) по 1 мл 10 " М раствора додепилсульфата натрия (ДСБа) и доводят объем колб до метки цитратным буферным раствором с рН = 3,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на фотоэлектрокалориметре ФЭКМ-У.4.1; с/ф У 6 в кюветах с толщиной погло щающего слоя 1 = 1 см относительно раствора сравнения, содержащего 0,1 мл 0,2/-ного раствора и-ДМАКА;1 мл 10М раствора ДСМа и цитратный буферный раствор с рН = 3,0. Ч , = 20 = 25 мл. По полученным значениям оптической плотности строят зависиюсть А = 2 (С). Закон Бугера-Ламберта-Бера выполняется при концентрации новокаина 10-140 мкг/25 мл или 0,4- 25 5,6 мкг/мл.П р и и е р 2. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрического определения малых содержаний новокаина. Стан дартный раствор новокаина 100 мкг/мп (раствор А) разбавляют дистиллированной водой в 10 раз и получают раствор новокаина с концентрацией 10 мкг/мл (раствор Б). В пять мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (1 мкг/мл); 0,3 ип (3 мкг); 0,5 мл (5 мкг)1 О, мл (7 мкг) 1,0 мл (10 мкг) раствора Б, добавляют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2%-ного раствора д-ДИАКА в .этиловом спирте и по 1 мл 10М раствора ДСЯа. После этого доводят объем в каждой колбе до 25 мл цитратным буферным раствором с рНЗ,О. Оптические плотности полученных реакционных смесей измеряют на ФЭКМ-У.4.1, с-ф У 6 в кюветах с толщиной поглощающего слоя 15 см, Раствор сравнения готовят аналогично примеру 1. Градуировочная характеристика прямолинейная в интервале концентрации 1-10 мкг/25 мл или 0,04-0,4 мкг/мл новокаина. Предел обнаружения новокаина 0,04 мкг/мл.55Табл. 1 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить 0,1- 1,0 мл 0,2 Х-ного раствора и-ДМАКА в этиловом спирте. Данные, приведенные в табл, 1, показывают, что ошибки определения новокаина при концентрации и ДМАКА 0,1 1 0 мл 0,27. (С+м РФБ = 4,5 О - 4,5 10 М) не превышают 4,5/.Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации реагента и-диметиламинокоричного альдегида (рН3,0; С,4 сяо = 1 мл 1 1 О М; Смдкд = О, 27-ного р-ра; 11 см, Ч,= 25 мл) приведены в табл. 1.Табл, 2 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить также 1 мл 1.10 - 1,0 М раствора додецилсульфата натрия,Результаты определения содержанияновокаина при различной концентрациидодецилсульфата натрия (рН = 3,0,Сдмдкд = 0,1 мл Оу 2%; Ч, = 25 мл 11 = 1 см) приведены в табл. 2.Диапазон определяемых содержаний новокаина (Ср = 0,1 мл 0,27.-ного Р-Раз Сдсяа = 1 мл; 10-М, рН = 3,0; Ч,= 25 мл) показан в табл.З.Анализ экспериментальных данных, приведенных в табл.З, показывает, что при использовании кюветы с толщи ной поглощающего слоя 1 = 1 см возможно определение новокаина в интервале концентраций 10,0-140,0 мкг/ /25 мл (0,4-5,6 мкг/мл) с погрешностью, не превышающей 1 6%. При концентрациях новокаина больше 140,0 мкг/ /25 мл и меньше 10 мкг/25 мл ошибки определения новокаина возрастают до 16,0-18,07Определяемые содержания новокаина можно понизить, если в эксперименте увеличить толщину поглощающего слоя, т.е. использовать кювету толщиной 1 = 5 см. При этом условии становится возможным с ошибкой ф 8,0 Х определить 1,00-10,00 мкг/ /25 мл новокаина (0,04-0,4 мкг/мл).Результаты определения новокаина в зависимости от рН,среды (САмакю =е 0,1 мл 0,2 -ного р-ра 1 Сд сна2 мл10Му Ч)щ 25 ил 1 15 см) показаны в табл.4.Для исследования селективности реакции выбран широкий круг лекарственных препаратов, которые используются совместно с новокаиномСоотношение концентраций различных сопутствующихкомпонентов (К) и новокаина (Н) составляет 1:1.Результаты йсследовання влияния различных сопутствующих компонентов на результаты определения новокаина (рН3,0; Сдмюкд0,1 мл 0,23-ного р-ра; С Д сйамп10 Мк СС1;11 11 см) приведены в табл.5.10Анализ табл.5 показывает, что совместно применяемые с новокаином лекарственные препараты не оказывают мешающего влияния на результаты его определения, ошибка определения новокаина не превышает й 2,03.П р и м е р 3. Определение содержания новокаина в сложных лекарственных формах. Анализируемые порошки сложных лекарственных форм, содержа щих новокаин, тщательно растирают в фарфоровой ступке. Точные навески количественно переносят в мерные колбы соответствующей емкости и растирают в дистиллированной воде. Далее 25 проводят определение новокаина указанным способом аналогично примерам 1 и 2.Результаты определения содержания новокаина в сложных лекарственных 30 смесях (рН 3,01,С-дмсд = 0,1 мп 0,23-ного р-ра; С с,мл к к 10 М; 7 ш 25 мл) приведены в табл.б. 35П р и м е р 4. Определение содержания новокаина в крови. При подготовке крови в анализу белки крови осаждают трихлоруксусной кислотой. К пробе донорской крови 2,0-3,0 мл прибавляют 40 новокаин и сразу осаждают белок крови 2 мл 203-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают стекляннойпалочкой, центрифугируют 5 мин на центрифуге при скорости 3000 об/мии. Фильтрат аккуратно пере" носят в мерную колбу на 25 мл. Осадок промывают 2 мл буферного раствора с рН ш 3,0 и еще раз центрифугируютк Второй фипьтрат сливают в ту же мерную колбу на 25 мл. К объединенным фильтратам добавляют 5-8 мп буферного раствора с рН3,0; 0,1 мл 0,2 Е-ного раствора и-ДМАКА;мп 10 М раствора ДСЯа и доводят до метки буферным раствором. Полученные смеси фотометрируют аналогично примеру 2. Содержание новокаина определяют по градуировочиой характеристике.Результаты определения новокаина вдонорской крови приведены в табл.7,Результаты сравнения предлагаемого способа с известным приведены в табл.8.Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен при определенииЪ новокаина и селективен при его определении в смесях с другими лекарственными формами. Кроме того, показана воэможность определения ультрамалых количеств новокаина в крови, что чрезвычайно важно для рационального применения указанного способа с лечебной целью,формула изобретенияСпособ количественного определения новокаина путем обработки анализируемой пробы органическим реагентом в присутствии додецилсульфата натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повыпения чувствительности и селективности способа, в качестве органического реагеита используют раствор и-диметиламинокричиого альдегида в зтиловом спирте в количестве 4,5-10- 4,510 4 М,додецилсульфат натрия ис- пользуют в количестве 4,0104,0 10 ф М и обработку ведут дри рН З,О - 4,0.погрешность, " Х Найдено Взято 2,28 10 4,56 10 2,28 ф 10 4,5610 6,84 10 14,402,504,004,5013,50 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00 17,10 20,50 20,80 19,10 22,70 0,05 0,10 0,50 1,00 1,50 Таблица 2 ДСКа Относи- тельная овокаин, мкг Добавлено,раб.М Взято погрешНайденоность,210 4.10 2 10 4 110 1,2.10 18,0 1,50 3,5 3,0 13,0 16,4 20,3 20,7 19,4 22,6 20,0 20,0 20,0 20,0 20,0 0,5 10 5,0 10,0 3,0 Таблица 3 Взято ново" Найдено Относитель- Толщина каина, мкг новокаина, ная погреш- кюветы,мкг ность, + Е см Таблица 4 рН среды Новокаин, мкг тноси- ельная Взято Найдено агрешость,18, 6,0 3,0 4,0 14,0,82 1 06 2,0 3,0 3,5 4,0 1,0 10 ъ 1,0 1,03 1,0 0,96 1,0 0,86 5,010,050,0100,0140,0160,00,51,05,010,015,0 5,89,4249,2099 20140,56131,200,390,925,29,7417,1 16,05,81,60,80,418,022,08,04,02,614,010Тв блица 5 1529086 Сопутствующие Новокаин, мкгкомпонентыВзято Найдено Относи- тельная погрешность, +Х 49,2 1,6 50,0 2,0 50,0 51,0 50,85 1,7 49,7 0,6 48,0 2,0 50,2 0,4 50,0 50,0 50,0 50,0 51,05 2,1 49,35 1,3 50,5 1,0 49,8 0,4 50,8 1,6 51,0 2,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 49,5 1,0 кислотаАпьбумин лиофи-.зированныйМочевинаБорная кислотаКофеина бензоатНатрия бромидТалькТрихлоруксуснаякислотаЦинка сульфат 50,35 0,7 49,15 1,7 48,95 2,1 50,8 1,6 50,25 0,5 49)90 0)2 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,30 0,6 49,80 0,4 50,050,0 Таблица 6 ГОтносиНавеска, г/) ) )1)05 фО)026 1 0200 0,2 0,2 Новокаин 0,2Цинка сульфат 0,05Борная кислота 0,4 Новокаин 0,2Кофеин бензоат 0,8 ЭуфиллниПапаверинагидро хлоридСтрофантинасульфатДимедролДибазолДроперидолНатрия оксибутиратГлюкозаКалий хлористыйОкситоцинНо-шпаЭтионамидГлютаминовая 0,2040,220,2060,2140,2101,031,081,051,041,070,210,20 2,0 10,0 3,0 7,0 5,0 3,0 8,0 5,0 4,0 7,0 5,0 0,01529086 Продолюение табл.6 Новокаин, г тносих+ дх ельнаяшибка,Х Содержа- Найдение в но внавеске навес 3,008,02,06,0 0,194 0,216 0,198 1,06 1,02 1,02 0,991 1,090 1,030 0,11 0,093 0,105 0,096 0,108 1,0и1,02ФВ Новокаин ЯаВт 4,0 2 1,03+0,03 0,1 ио, 20 0,10210,08 Таблиц ъем донорой крови,овокаи Отно сительная погрешность, у й айдено зято 1,88 2,20 1,94 1,80 1,98 6,010,03,010,0 2 2 2 5,0 1,О 4,0 7,0 2,0 5,0 4,80 4,65 5,О 4,75 5,0 5,0 Т аблица Извест Показатели Предлагаемы спос 3Ъ ел обнару 4 мкг/мл 0,2 мкг/ еделяемых 0,4 - 5,6 мкг 1 1 см0,04-0,4 мкг/ 1 5 си 2-20 мкг/мл 11,смСостав лекарственнойФормы, г Новокаин 0,1Папаверинагидрохлорид 0,2 Ыикний предкенияДиапазон осодержаний Навеска; г/14 529086 Продолзениа табл.8 Не мешает глюкоза, кофеин,С НОН, аВ Не оказывают мешающего влия"ния: эуфиллин, папаверина,гидрохлорид, атропина сульфат, димедрол, дибазол,дроперидол, натрия оксибутират, глюкоза, КС 1, окситорен, но-шпа, этионамид,глютаминовая кислота, альбумин лиофизироваиный, борнаякислота, НаВг, тальк, Еп 80СС 1Цитратный раствор буферный 103 НС 13-4Окраска устойчива в тече- Окраска устойчивание 6-8 ч в течение 5 ч Селективность Среда Устойчивость сигналов аналитическойформыОбъекты анализа Сложные лекарственные Сложные лекарственформы, содержащие новокаин ные формы, содержащие Определение новокаина в , новокаин присутствии параллельноприменяемых сложных лекарственных ФормБиологическая жидкостькровии-диметиламинокоричный аль- Ванилин в присутствии дегид (и-ДМАКА) при концент- додецилсульата натрия рации его в реакционнойсмеси 4,5"10 -4,5 10 М вприсутствии 4 О З1 О Мдодецилсульфата натрия Органические реагенты Со ст авит ель С. Хов анскаяТехред Л.Сердюкова Корректор С.Черни . Редактор С.Лисина Подписное Заказ 7633/38 Тираж 789 ВНИИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5