Способ идентификации пищевых растительных масел

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 1)4 С О 1 М 30/06 3НИ Е ИЗОБР ОП ЬСТВ кую систему в деление на ко с помощью эл глицеридного сравнение еавом заведом эквивалентным деление проводят углеродным числам т нто огод ПИЩЕ 3 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ТОРСКОМУ СВИД(71) Институт питания АМН СССР(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВЫХРАСТИТЕЛЬНЫХ МАСЕЛ(57) Изобретение относится к анализуи идентификации растительных масел.Цель изобретения - повышение достоверности анализа. Анализ пищевых растительных масел включает введениестандартов триглицеридов и образцамасла в жидкостную хроматографичес,80138319 сокого разрешения, раэонке с обращенной фазой нта, установление триостава образца масла о с триглицеридным сосизвестного масла. Разсмесь метанол - гексан - ацетон ссоотношением компонентов 3:1:0,2-0,5,обнаружение осуществляют УФ-детектором 1 =206 нм. В качестве стандартовиспользуют постоянную смесь насыщен ных триглицеридов с четными эквивалентными углеродными числами от 30до 56. После разделений определяютотношение суммарной площади пиковтриглицеридов масла к суммарной площади пиков стандартов и соотношениепиков триглицеридов на хроматограммемасла в процентах от максимальногои проводят сравнение указанных параметров анализируемого и заведомо известного масел. 1 з.п, ф-лы. 4 табл, 1383198Изобретение относится к анализу и идентификации растительных масел.Цель изобретения - повышение достоверности анализа.Способ осуществляют следующим образом.Готовят смесь стандартов растворением в 1 мл гексана по 5 мг триглицеридов (ТГ); трикаприна, лауродикапри О на, капродилаурина, трилаурина, миристодилаурина, лауродимиристина, тримиристина, пальмитодимиристина, миристодипальмитина, трипальмитина,стеародипальмитина, пальмитодистеари на, тристеарина и арахинодистеарина, имеющих ЭУЧ 30,32,34,36,38,40,42,44, 46,48,50,52,54 и 56 соответственно.Вводят 3 мкл раствора стандартов в жидкостную хроматографическую систему высокого разрешения. Исследуемое масло растворяют в гексане и хроматографируют в тех же условиях. Идентифи-, цируют пики критических пар ТГ масла по временам удерживания, рассчитыва ют их площади и суммарную площадь, которую делят на площадь под хроматограммой стандартов. Величина этого отношения и площади пиков критических пар ТГ масла позволяют сделать предположение о виде исследуемого масла путем сопоставления полученных характеристик с приведенными в табл. 1,В табл. 1 приведены данные анализа шестнадцати наиболее употребляемых пищевых растительных масел.П р и м е р 1. Анализ товарного образца растительного масла.Приготовление стандартов. По 5 мг стандартных ТГ: трикаприна, лауродикаприна капродилаурина, трилаурина, миристодилаурина, лауродимиристина, тримиристина, пальмитодимиристина, мирйстодипальмитина, трипальмитина, стеародипальмитина, пальмитсщистеарина, тристеарина и арахинодистеарина,45 имеющих ЗУЧ 30,32,34,36,38,40,42,44, 46,48,50,52,54 и 56 соответственно, растворяют в 1 мп гексана.Приготовление раствора масла. Навеску товарного образца растительногомасла растворяют в очищенном и перегнанном гексане так, что концентрация раствора составляет 0,08 мг/мкл,Растворы стандартов и масла по 3 мкл вводят в высокоэффективную жид костную хроматографическую систему "Бекман", модель 334, снабженную колонкой 250 х 4,6 мм с обращенной фазой"Ультрасфера ОРЯ" (5 мкм), УФ-детек" тором ЯГ Кгайоз 757 Р =206 нм и интегратором ЯР=4270, ц хроматографируют в одинаковых условиях, используя элюент метанол - гексан " ацетон с соотношением компонентов 3: 1:0,3 (Ч/Ч) со скоростью Потока 2 мл/мин. Сравнивая хроматограммы стандартных ТГ и ис следуемого масла, устанавливают отсутствие в масле пиков с ЭУЧ 30,32,34, 36,52,54 и 56. Вычисляют суммарную площадь пиков ТГ масла и суммарную площадь стандартов ТГ и находят их отношение, которое составляет 0,56. Максимальную площадь на хроматограмме имеет пик с ЭУЧ=46, она равна 38,5 Е от общей площади.Данные времени удерживания пиков стандартов и критических пар ТГ и плс щади пиков критических пар ТГ исследуемого масла приведены в табл, 2. Сопоставляя полученные значения (отношение суммарной площади пиков ТГ масла к суммарной площади стандартных ТГ, а также соотношение площадей пиков критических пар ТГ образца масла) с данными табл. 1, делают заключение, что величина Я /Я (относительной суммарной площади), набор критических пар ТГ, а также соотношение их площадей близко к пальмовому и оливковому маслам и в значительной степени отличается от всех остальных.Для того, чтобы установить, какое из этих двух масел взято для анализа, готовят растворы указанных масел в гексане в концентрации 0,08 мг(мкл, По 3 мкл полученных растворов вводят в жидкостную хроматографическую систему, на которой проведен анализ товарного образца масла, и в тех же условиях проводят разделение ТГ оливкового и пальмового масел. По временам удерживания стандартов идентифицируют пики на хроматограммах. На хроматограмме пальмового масла семь пиков критических пар ТГ с ЗУЧ: 38,40,42,44,46,48 и 50. Рассчитывают площади пиков критических пар ТГ (табл.2). На хроматограмме оливкового масла также семь пиков критических пар ТГ; их времена удерживания, ЭУЧ и площади пиков критических пар ТГ также приведены в табл. 2Сопоставляя площади пиков критических пар ТГ товарного образца масла с этими величинами, полученными для оливкового и пальмового масел, делают вывод, что исследуемое масло оливковое.П р и м е р 2. Анализ товарногообразца кукурузного масла.Приготовление стандартов. По 5 мг5стандартных ТГ: трикаприна, лауродикаприна, капродилаурина, трилаурина,миристодилаурина, лауродимиристина,тримиристина, пальмитодимиристина,миристодипальмитина, трипальмитина,стеародипальмитина, пальмитодистеарина, тристеарина и арахинодистеарина,имеющих ЭУЧ 30,32,34,36,38,40,42,44,46,4850,52,54 и 56 соответственно,растворяют в 1 мл гексана,Приготовление раствора масла. Навеску товарного образца кукурузногомасла растворяют в очищенном и перегнанном гексане так, что концентрация 20раствора составляет 0,08 мг/мкл. Гочтовят раствор заведомо известногокукурузного масла в той же концентрации.По 3 мкл растворов стандартов и 25масел вводят в жидкостной хроматограф1 11Милихром , снабженный колонкой с обращенной фазой Нуклеосил С; (60 хх 2 мм), УФ-детектор настраивают на1=206 нм и хроматографируют в одина 30ковых условиях с помощью элюента метанол - гексан - ацетон с соотношением компонентов 3: 1:0,3 (Ч/Ч) соскоростью 50 мкл/мин.Сравнивая хроматограммы стандартовисследуемого и кукурузного масел,устанавливают ЭУЧ пиков и их временаудерживания (табл. 3). Определяютсуммарную площадь пиков ТГ исследуемого. и кукурузного масел и делят ихна площадь пиков стандартов. Полученные значения 1,60 и 1,63 близки исвидетельствуют о схожести масел постепени ненасьпценности.Вычисленные площади пиков критических пар ТГ для исследуемого и кукурузного масел приведены в табл.З.Сравнивают эти значения и заключают; степень ненасьпценности, набор пиков критических пар ТГ и соотношениеих площадей показывает, что исследуемое масло является кукурузным.П р и м е р 3. Анализ масла какао,используемого в кондитерской промьппленности.Приготовление стандартов. По 5 мгТГ; трикаприна, лауродикаприна,капродилаурина, трилаурина, миристодилаурина, лауродимиристина, тримиристина, пальмитодимиристина, миристодипальмитина, трипальмитина, стеародипальмитина, пальмитодистеарина, тристеарина и арахинодистеарина, имеющих ЭУЧ 30,32,34,36,36,40,42,44, 46,48,50,52,54 и 56 соответственно, растворяют в 1 мл гексана.Приготовление растворов масел. Навеску масла, взятого на анализ, растворяют в очищенном и перегнанном гексане так, что концентрация составляет 0,08 мг/мкл. Готовят раствор заведомо известного масла какао в той жеконцентрации.По 3 мкл растворов стандартов ТГ и масел вводят в высокоэффективную жидкостную хроматографическую систему "Бекман", модель 334, снабженную колонкой 250 х 4,6 мм с обращенной фазой "Ультрасфера 008" (5 мкм), УФ- детектором ЯР/Кгаоз 757 1 =206 нм и интегратором БР, и хроматографнруют в одинаковых условиях. Разделение проводят в системе метанол - гексан - ацетон с соотношением компонентов 3: 1:0,3 (7/7) со скоростью потока 2 мл/мин.Сравнивая хроматограммы стандартов исследуемого масла и масла какао, устанавливают ЭУЧ пиков и их времена удерживания (табл, 4). Определяют суммарную площадь, пиков ТГ исследуемого масла и масла какао и делят их на площадь пиков стандартов; полученные значения (0,54 и 0,52 соответственно) близки и свидетельствуют о схожести масел по степени ненасьпценности. Максимальной площадью на хроматограмме исслецуемого масла, равной 28,4 Е от суммарной, обладает пик с ЭУЧ 48, тогда как на хроматограмме масла какао 50 (ЗО,ЗЖ от суммарной площади)Вычисленные площади пиков критических пар ТГ для исследуемого масла и масла какао приведены в табл, 4.Сравнивают эти значения и заключают, что соотношение площадей пиков критических пар, ТГ в обоих маслах близко, но максимальным в,исследуемом образце является пик с ЭУЧ = 48, тогда как в масле какао 50. Значительно отличаются площади пиков с ЭУЧ 42 и 52. На основании проведенного исследования делается вывод, что образец масла какао не натуральное масло какао, а его заменитель.1383198 Теплица насо адь пиков крнунческик ар трнслицерндов, Х от максинального зг за зв зв ао аг 44 46 яв 5 о г ю6е54 5 Льняное 59 76 45 31 1515 51 100 88 45 11 1,9 Соево 1,83 ВодсолнечяоеХлопковое 100 99 49 О 1,75,аз в о вв Формула изобретения 1. Способ идентификации пищевых растительных масел, заключающийся в разделениЪ триглицеридов, входящих в состав исследуемого, а также извест ного масел, методом жидкостной хроматографии в потоке элюента на колонке с обращенной фазой, включающей10 радикал алкана С с последующим сравнением набора и соотношения плошадей пиков, зафиксированных ультрафиолетовым детектором, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения достоверности анализа, в аналогичных условиях дополнительно раэделяют стандартную смесь насыщенных триглицеридов с четными эквивалентными углеродными числами от 30 до 5 б, регистрацию пиков осуществляют при длине волны 205-20 б нм, а в качестве дополнительного .идентификационного параметра используют отношение суммарной площади пиков триглицеридов исследуемого и заведмо известного масел к суммарной площади пиков триглицеридов стандартной смеси.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что в качестве элюента используют смесь метанол - гексан - ацетон с соотношением компонентов 3:1:0,2-0,5.1383198 Т а б л и ц а 2 Оливковое масло Пальмовое масло Исследуемое масло Время удерживаниястандартов,с ЭУЧ Площадь,7 от мак-. Времяудерживания, с Площадь,Е от макВремяудерживания,Площадь,Х от мак"симальВремяудерживания, с симального симального ного 38 265 40 295 42 336 270 26 273 293 0,5 337 44. 398 401 44 46 4.72 48 550 50 614 460 100 555 84 621 Та блица 3аа вщВ Время удерживания, мин ощадь пиков,й от максимального Стандарт Исследуе- Куку- Исследуемое Кукурузмое масло рузное масло ное масломасло. 0 3 3,0 3 2 15,0 4,81383198 Таблица 4 Время удерживания, с МасИсслеМасдуемоемасло ло ло кака-. као као 42 336 329 335 0,5 3, 44 398 38 390 6 7,4 46 472 49 484 46 45 100 95 98 100 52 760 760 757 65 43 3 2 54 910 914 Составитель" Ю,СултановичТехред А.Кравчук Корректор И. Эрдейи Редактор Н.Тупица Заказ 1288/40 Тираж 847 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытийПроизводственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 Стан Иссле дарт дуемо масло