Аппарат для трипсинизации ткани

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Сфюз СфаетскыиСфцыавыстычесыык нублык ЕЛЬСТВУ МУ СВ АВТО 1) Лополннтельно т. сви 5 ЦВ,Кф С 12 К 9/О) Заявлено Об 0674 (2) 2038 бб 4/28-1 соединением заявки РЙ Государствеииый комитет СССР по делам изобретений и открытий.В.Беляев, Е.А.Руник В,Г,Третьяков ов пытный Минис вод технол ства сельс т.ель ИЗАЦИИ ТКАН). АППАРАТ ДЛЯ ТРИПС вам зии Изобретение относится к устройстдля получения клеточной суспен"используемой для выращивания вирусов в культуре, и может быть использовано в медицинской, микробиологической и биологической промышленности.Известен аппарат для трипсинизации ткани, содержащий измельчитель с Ножами, сосуд-трипсиниэатор с термостатирующим устройством, устройство для отдЕления клеточной суспенэии от трипсина й концентрирования ее, сосуды для питательного раствора и готовой суспензии и соединительные трубопроводы 113.Однако этот аппарат имеет низкую производительность и невозможно в нем получить клеточную суспенэию из различных тканей.Кроме того, процессы измельчения ткани и концентрирование изолированных клеток осуществляется на отдельных устройствах вне аппарата, что не позволяет полностью механизировать процесс трипсинизации.Целью изобретения является механизация и повьааение производительности процесса.30 ическово оборудованияго хозяйства СССР Цель достигается тем, что в пред лагаемом аппарате для трипсинизации ткани устройство для отделения кле точной суспензии от трипсина и концентрирования ее представляет собой центрифугу, установленную в корпусе аппарата и соединеннуютрубопровода мн с сосудом-трипсиниэатором, с сосудами для питательного раствора и готовой суспензии. Иэмельчитель уст новлен над сосудом-трипсинизатором и снабжен конусной обечайкой, распо ложенной концентрично ее валу, для предотвращения вращения измельчен-. ной массы вместе с ножами.На фиг. 1 изображен аппарат для трипсинизации ткани, схема вааимосвязи и взаимодействия узлов; на фиг. 2 - измельчитель, вид сбоку в разрезе,Аппаратсодержит корпус (не показан), иэмельчитель ткани, сосудтрнпсинизатор 1 с термостатирующимустройством (не показано), сосуды 25 для свежего трипсина, отработанного трипсина, питательного раствораи готовой суспензии; соответственно,два бактериологических фильтра б дляфильтрации стерильного и стравливаемого воздуха, сОсуды 7 и 8 для шлв652217 мельчитель из сосуда 8 через электромагнитный клапан 35 по трубопроводу 9 подают солевой раствор давлением сжатого стерильного воздуха, поступающего нз воздуховода через пер 5вый Фильтр 6, распределительный кол- .лектор 28, электромагнитный клапан36 по трубопроводу. 10 в сосуд 8, изкоторого вытесняется раствор. Приэтом избыток воздуха из сосуда-трипсинизатора 1 отводится по трубопро 1 О воду 11 через электромагнитный клапан 37, коллектор 29 и второйфильтр б,После окончания выгрузки измельченной ткани часть солевого раство 15 ра нэ сосуда-трипсинизатора 1 отводится в сосуд 7 для сбора шлама черезколлектор 30, клапан 38 и трубопровод 12 давлением воздуха, поступающего из первого фильтра 6, черезколлектор 28, клапан 39 и трубопровод 13.Вместо солеврго раствора в сосудтрипсиниэатор 1 поступает порция свежего трипсина иэ сосуда 2 по трубопроводу 14, через клапан 40 и коллектор 30 под Давлением воздуха, поступающего из первого фильтра 6, коллектор 28, клапан 41, трубопровод 15,распределительный коллектор 31.итрубопровод 16.В сосуде-трипсинизаторе 1 процесстрипсиниэации прОдолжается 10 минс подогревом содержимого сосуда-трипсиниэатора до 37 С и перемешиваниемомешалкой (не показана)дезагрегированные клетки вместес трипсином подают в центриФугу 63,где клетки с трипсином разделяются,при этом трипсин осаждается иа внутренних стенках ротора центрифуги, а40 отработанный трипсин отводится в сосуд 3.Одновременно с центрифугированиемв сосуд-,трипсинизатор 1 подается отработанный трипсин из. сосуда 3 через45 коллектор 34 по трубопроводу 21,3ма и солевого раствора, соединительные трубопроводы 9-27, соединяющиесосуды аппарата в технологическойпоследовательности через распределительные коллекторы 28-34 и электромагнитные клапаны 35-50, подключенные к магистрали воздуховода поддавлением через один из бактериологических фильтров б, и устройство"для отделенияклеточной суспенэииот трипсина й концентрирования ее..Иэмельчитель ткани содержит корпус 51, в котором размещен вал 52 сблоком иэмельчающих ножей 53, дозирующим ножом 54 и шнеком 55 для выгрузки ткани с горловиной 56, Одинконец вала установлен в опоре 57, адругой пропущен через головку 58корпуса и соединен с приводным электродвигателем 59,ИзмеЛьчитель установлен над сосудом - трипсинизатором 1 и имеет конусную обечайку 60, расположеннуюкбнцентрично валу 52 для предотвращения вращения измельченной массы вместе с ножами 55.Иа внешней поверхности корпуса51 иэмельчителя закреплен коллектор61 для солевого раствора, а такжепатрубок 62 для подачи измельченноймассы в сосуд-трипсинизатор.Устройство дляотделения клеточнойсуспензии от трипсина и концентрирования ее представляет собой центрифугу 63, установленную в корпусе аппарата и соединенную трубопроводамис сосудом-трипсинйзатором 1 и сосудами 4 и 5 питательного раствора и готовой суспензии.Сосуд-трипсинизатор 1 и центрифуга63 снабжены индивидуальными приводами 64 и 65,"."йри этомпривод 64 установлен на гибком валу 66.Аппарат работает следующим образом. После стерилизации все составныечасти аппарата монтируются по заданной схеме фиг.1) .Сосуды 2,4 и 8 заполняются, соответственно, свежим трипсином, питательным раствбром и солевым раствором Хенкокса.В стерильном боксе эмбрионы илипочки загружаются в измельчитель вособом боксе, который герметично закрывается и доставляется к аппарату.Затем йзмельчитель навешиваетсяна патрубок 62 горловиной 56 шнекапод Факелом, по"ле чего на головку58 корпуса йавешивается электродвигатель 59 и соединяется с концом вала блока измельчавших ножей 53.Затем включением электродвигателя59 приводится в действие измельчиьтель, осуществляющий иэмельчение материала,Измельченная ткань из измельчителя выгружается через патрубок 62 всосуд-трипсинизатор 1, для чего в из,клапан 46, распределительный коллектор 30 давлением воздуха из первого фильтра б через коллектор 28, клапан 41, трубопрбвод 15, коллектор 31 итрубопровод 22. Избыток давления из сосуда-трипсиниэатора поступает по трубопроводу 11 через клапан 37, коллектор 29 во второй фильтр 6.По окончании центрифугироваиия и остановки ротора центрифуги в него подается из сосуда 4 питательный раствор для отмывания и нейтрализации ферментов.Отмывка и нейтрализация Ферментов производится путем попеременного,. включения и остановки ротора центрифуги 63.Затем питательный раствор отделяется центрифугированием и отводится в сосуд 7, избыток давления иэ которого выходит через пробку.Эатем в ротор центрифуги при его останове подается питательный раствор иэ сосуда 4 для концентрирования в нем клеточной суспенэии.3 атем вновь включается центрифуга и по достижении ротором скорости 500 об/мин резко выключается с помощью ручного тормоза приэтом клетки смываются питательным раствором.Смытые клетки сливаются в сосуд 5 готовой суспензии, после чего избыток давления в центрифуге стравливается через коллектор 33, трубои ровод 26, клапан 50,. распределительный коллектор 29 и второй фильтр 6, а избыточное давление в сосуде 5 стравливается через трубопровод 27, клапан 67, коллектор 29 и второй фильтр 6.В такой последовательности повторяется непрерывный процесс приготов-ления клеточной суспензии.Предлагаемый аппарат может работать в автоматическом программном режиме и обеспечивает повышенную производительность процесса.Формула изобретенияАппарат для трипсинизации ткани, содержавщй иэмельчитель с ножами,сосуд-трипсинизатор с термостатирующим устройством, устройство для отделения клеточной суспензии от трип"сина и концентрирования ее, сосудыдля питательного раствора и готовойсуспенэии и соединительные трубопроводы, о т л и ч а в щ и й с я тем,что, с целью механизации и повышенияпроизводительности процесса и предотвращения вращения измельченноймассы вместе с ножами, устройство 1 О для отделения клеточной суспенэии оттрипсина и концентрирования ее представляет собой центрифугу, установленную в корпусе аппарата и соединенную трубопроводами с сосудом трипсинизатором, с сосудами для питательного раствора и готовой сус"пензии, а измельчитель установленнад сосудом-трипсиниэатором и снабжен конусной обечайкой, расположен ной концентричио ее валу.Источники информации, принятые вовнимание при экспертизе25 1. Авторское свидетельствоАЗССР333184, кл. С 12 1 9/001972.