Способ идентификации сортов тургидной пшеницы

(я)5 А 01 Н 1/04 АВТОРС СВИДЕТЕЛЬСТВ ен 10-14. РТОВ ам геи м.б., что дой, ольГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМпРи Гкнт сссР 21) 4839456/13(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИО ЦИИ СОТУРГИДНОЙ ПШЕНИЦЫ(57) Изобретение относится к спосонетико-селекционнцх исследований Изобретение относится к генетико-селекционным исследованиям.Известен способ идентификации сортов мягкой пшеницы по электрофореграммам глиадиновцх белков зерна,.включающий получение гибридов Р 2, проведение электрофореза глиадина, анализэлектрофореграмм и запись генетическихформ.Недостатком этого способа является то,что он применим только для сортов мягкихпшениц, так как у них.имеются анеуплойдные и абберантные линии сорта мягкой пшеницы Чайниз Спринг. По твердым и темболее по тургидным пшеницам таких линийнет,Цель изобретения - повышение точности идентификации.Поставленная цель достигается темтургидную пшеницу скрещивают с твера в качестве тестера на аллельность исп использовано в биотехнологии, сельском хозяйстве, селекции и семеноводстве, биохимической генетике, Согласно предлагаемому способу проводят гибридизацию тургидной пшеницы с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы, получают гибридные зерна Р 2, проводят электрофоретическое разделение глиадинов и по полученным белковым спектрам ведут идентификацию, 4 ил., 1 табл. зуют сорт твердой пшеницы, имеющий в своем геноме четкиеглиадййоййе маркеры,унаследованные от мягкой пшеницы.Изробретение базируетя на основании филогенетического родства;Т.аезбчца 1.п=21) - А, В, ДТ,бцгца Оем, (п=14) - А, В ж Тяцг 9 Ыца(п=14) - А, В (Ди межвидовых скрещиваний между Д, Т.аезтчца 1. и Т.бцгцв Оеар. В качестве примера можно привести сорт Черномор, у которого есть аллели глиадйна перенесенные в геном твердых от мягких, Известно, что Т.бцгца Оеар и Тлцгд 1 бца . легко скрещиваются между собой без генетической депрессии. Следовательно, если в качестве сорта-тестера взять Черномор или другой сорттвердой пшеницы, несущий аллели глиадина, унаследованные от мягкой пшеницы, то его можно скрещивать с любым сортом тургидной пшеницы и в системе гибридоло5 10 15 20 30 35 40 45 гического анализа проводить идентификацию различий по глиадиновым аллелям.Способ осуществляется следующим образом,Берут два гомозиготных сорта или биотипа пшеницы, В качестве матери(или отца)используют сорт твердой пшеницы, имеющий четкие электрофоретичеркие маркеры1 А, 15, 6 А и 6 Б хромосом, а именно Глд 1 А 1,Глд 1 Б 2; Глд 6 АЗ, Глд 6 Б 2. В качестве отца(или матери) берут новый сорт или биотиптургидной пшеницы, у которого нужно идентифицировать кластеры (блоки) глиадина,Полученные гибриды Гг высевают для получения растений Р 1, на которых берут зернаГ 2 - первое расщепляющееся потомство,Проводят электрофорез отдельных зерен по,80-100 штук и по тесту на аллельность (используется критерий хи-квадрат), определяют аллеломорфы блокам Глд 1 А 1, Глд 1 Б 2,Глд 6 АЗ, Глд 6 Б 2). Новый идентифицированным аллелям (блоком компонентов присва-.ивают соответствующий номер по аналогиис номенклатурой блоков мягких пшениц, Если в каталоге идентифицированных блоковмягких пшениц нет аналогичного полиаллеля, то ему присваивается номер с буквой "т"(тургидная).П р и м е р, Нужно идентифицироватьаллельные блоки (полиаллели) глиадина утургидной пшеницы сорта Губице и записать их генетическую формулу,Среди сортов озимых твердых пшеницимеются сорта, в спектре глиадина которыхесть четкие маркеры 1 А (Глд 1 А 1), 1 Б (Глд1 Б 2), 6 А (Улд 6 АЗ) и 6 Б (Глд 6 Б 2) хромосом.Из этих сортов в качестве сорта-тестера взяли сорт селекции Черномор. Он унаследовал эти аллели от мягкой пшеницы. Аллели(блоки) глиадина Глд 1 А 1, Глд 152 былиидентифицированы у мягких пшениц впервые у сорта,Цнепровская. На фиг.1 показаны электрофореграммы глиадинасортов мягких, твердых и тургидных пшеници их маркерные блоки (аллели).Зерна этих сортов высеяли и провели ихгибридизацию (нет принципиальной разницы, кого из них брать в качестве матери илиотца), Зерна Р вновь высеяли, Получилирастения Г 1, на них получили зерна Г 2 -и е рвое . расщеп ля ющееся потомство. Эти зерна использовали в качестве материала для идентификации различий по электрофоретическим спектрам глиадина, Провели электрофорез отдельных зерен, примерно по 80 штук по прописи Копусь М,М,Электрофореграммы гибридов Р 2 сортировали по классам Глд 1 А 1 (сорт Черномор) и его аллеломорфу от Губице - Глд 1 А 4, Глд 1 Б 2 (сорт Черномор) и Глд 1 Б 1 т(Губице), Глд 6 Б 2 (Губице) и Глд 6 Б 2 (Черномор), фиг.2. По компонентам 6 А хромосомы в данной комбинации различий не было, оба сорта в зоне быстроподвижных компонентов, в которой находятся компоненты локуса 6 А хромосомы, имели идентичные аллели, представленные блоком Глд 6 АЗ,Осталась не идентифицированной группа минорных компонентов Х. Вероятно, это дополнительные локусы по 1 А или 1 Б хромосомам, которые также имеются у мягких пшениц и были идентифицированны.С помощью хи-квадрата определяли аллельность выделенных групп блоков по какдой хромосоме (многогибридная схема) или по 2 хромосомам (гибридная схема).Предлагаемый способ позволяет идентифицировать глиадиновые белки тургидных пшениц в системе обычного гибридологического анализа без применения анеуплоидных и абберантных линий, которые еще не созданы для тургидных пшениц, Это дает возможность изучать генетические различия между сортами тургидных пшениц по данному признаку и влияние этих различий на качество зерна и другие хозяйственно-ценные свойства макаронных пшениц.Формула. изобретения Способ идентификации сортов тургидной пшеницы, включающий гибридизацию, получение гибридных зерен Р 2, электрофоретическое разделение глиадина, анализ полученных электрофореграмм и запись глиадиновых формул, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности идентификации, гибридизацию проводят с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы,1750554 Расщепление по блокам компонентов глиадина в Рг при скрещивании сортов твердой пшеницы Черномор и тургидной ГубицеФормула глиадина сорта тургидной пшеницы Губице; Глд 1 А 4, 1 Б 1 т(Х), 6 АЗ 661, Аналогично проводим идентификацию различий и в других комбинациях гибрйдов отскрещивания, например: Черномор Х М 321 (2-й биотип) фиг.3 Черномор Х М 390 фиг.4Я.Г; 5 ф т. Х Составитель В,ТутароваТехред М,Моргентал Корректор М.Максимишине Подписноеизобретениям и открытиям при ГКНТ ССС