Способ селекции винограда на устойчивость к заболеваниям

(51)5 А 01 Н 1/04, А 0 7/О ИЗОБРЕТЕНИЯ И СВИДЕТЕЛЬСТВУ ВТОРС ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Научно-производственное обьединение по виноградарству "Виерул"(56) Новые методы фитопатологических и иммунологических исследований в виноградарстве. Кишинев: Штиийцз, 1985, с. 26-56. (54) СПОСОБ СЕЛЕКЦИИ ВИНОГРАДА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ЗАБОЛЕВАНИЯМ , 57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, преимущественно отрасли виноградарства, и может быть использовано в селекции при выведении комплексно-устойИзобретение относится к сельскому хозяйству, преимущественно к винбградарству, и может быть использовано в селекции при выведении комплексно-устойчивых сортов винограда.ИзвестЕн способ получения комплексно-устойчивых сортов винограда к болезням и вредителям путем подбора соответствующих родительских пар, высадки всех гибридных сеянцев на постоянное место с использованием комплексного естественного инфекционного Фона по милдью, оидиуму, серой гнили, антракнозу и т.п, с последующим отбором устойчивых Форм в фазу плодоношения (на 4-6 год посздки) и дополнительного применения ускоренных тепличных, лабораторных и полевых меточивых сортов винограда. Цель изобретения - повышение эффективности способа за счет получения более полной комплексной устойчивости и сокращения сроков селекции, Отбирают формы, устойчивые к милдью в первый год выращивания сеянцев в школ. ке, В этот же год отбирают сеянцы, свободные от вирусных болезней, на второй год отобранные сеянцы проверяют на наличие бзктериального рака. Пересаживают в маточник растения, свободные от вирусных болезней и бактериального рака. Одновременно с пересадкой корнесобственных растений осуществляют прививку их на взрослые безвирусные и безбактериальные кусты подвоя. Последующий отбор проводят на корнесобственных и привитых растениях. дов искусственногр заражения отдельных4 ,органов растений (листьев, побегов, гроз- С) дей) болезнями, корней - филлОксерой для 00 более надежного отбора устойчивых форм. ЯНедостатком такого способа являекя С то, чтоон не позволяет произвести отбор (р устойчивых форм к главнейшим заболеваниям в первые один-два года жизни растений, чтобы уменьшить площади и сократить сро- юф ки выведения сортов и средства на их выра- . ф щивание.Известен способ селекции получения комплексно-устойчивых сортов винограда с применением инфекционных фонов на ранних этапах селекционного процесса и отбора устойчивых форм к милдью в первый год, выращивания сеянцев в школке. Затем вы 1708208доз гим заболеваниям (антракнозу, оидиуму, серой гнили и т,п,) на взрослых и плодо 10 20 40 безвирусные саженцы подвоя, на которые 55 саживают в маточный гибридный питомник только отобранные, устойчивые к милдью Формы, где в дальнейшем проводят отбор к носящих растениях на естественном инфекционном фоне без опрыскивания. Дополнительно используют ускоренные лабораторные и тепличные методы оценки устойчивости растений к отдельным заболеваниям.Положительным отличием этого спосо,ба является то, что он позволяет сократить площади и средства при выведении устойчивых сортов винограда.Недостатком способа является то, что несмотря на проведение отбора милдьюустойчивых сортов в первый год развития сеянцев, позволяющее сократить площади,сроки выведения комплексно-устойчивых сортов не сокращаются. Кроме того, недостатком этого и других известных способов является то, что при дальнейщем вегетативном размножении полученных устойчивых форм и сортов они в большинстве случаев заражаются вирусными болезнями и бактериальным раком и необходимо затрачивать дополнительно большие средства и время на освобождение растений от возбудителей этих заболеваний для получения безбактериальных и безвирусных растений.Целью изобретения является повышение эффективности способа за счет получения более полной комплексной устойчивостии сокращение сроков селекции.Способ заключается в том, что отбор устойчивых к милдью форм винограда проводят на высоком инфекционном фоне в школке сеянцев в первый год жизни растений. В первый же год проводится визуальная проверка милдьюустойчивых отборов на наличие вирусных заболеваний по симптомам на листьях, на второй год проверяют на наличие бактериальных болезней и отбирают среди милдьюустойчивых сеянцев безвирусные и безопухолевые формы.Наряду с маточным участком, где высаживают милдьюустойчивые отборы корне- собственными растениями и выращивают их на инфекционном фоне без опрыскивания, осуществляют дальнейший отбор устойчивых к серой гнили, оидиуму и другим болезням форм, параллельно заранее (за 2-3 года) высаживают безбактериальные и прививают простой копулировкой одноглазковый черенок отборов милдьюустойчивых безбактериальных и безвирусных форм.Последовательность осуществления работ согласно способу следующая,25 30 35 Полученные гибридные семена (от скрещивания устойчивых с неустойчивыми сортами и формами) высевают осенью или весной (предварительно стратифицированными) в школку сеянцев ленточным посевом с глубиной заделки семян землей 2-3 см. Полосу земли высеянных семян сверху засыпают небольшим слоем песка для предупреждения образования корки. Школка должна быть обязательно поливной. Лучше проводить подпитывающий полив по бороздам, Почву после каждого полива следует рыхлить, не допуская образования корки.В школке сеянцев проводят следующие работы:1. Многократное искусственное заражение растений милдью;2. Отбор устойчивых к милдью растений форм);3. Отбор среди милдьюустойчивых сеянцев беэвирусных и безбактериальных форм растений;4. Выкопка милдьюустойчивых беэвирусных и безбактериальных форм и посадка их в маточник гибридных форм.1, При достижении сеянцами 10-15 см высоты в школке проводят в течение вегетационного сезона многократные искусственные заражения растений мйлдью, приурачивая их к моментам после обильных поливов или после дождя,Искусственное заражение проводят в утренние часы .(4-5 ч утра) или в вечернее время 4-6 раз в сезон путем опрыскивания сеянцев суспенэией спор возбудителя,милдью, Суспензию приготавливают в стеклянной посуде эа полчаса до заражения, смывая свежий пушок возбудителя милдью с зараженных листьев дистиллированной водой. Через 15-20 мин проверяют под микроскопом каплю суспенэии на выход зооспор иэ эооспорангий и их подвижность. Если в поле зрения микроскопа наблюдается движение эооспор, то такая суспензия пригодна для заражения сеянцев. Сразу же после опрыскивания суспенэией растения покрывают полиэтиленовой пленкой для создания влажной камеры, Утром с появлени-. ем солнца пленку снимают во избежание ожогов листьев. Через несколько дней заражение повторяют. Цри частом выпадении осадков в период роста сеянцев искусственное заражение можно сократить до 3 раз в сезон, так как происходит естественное переэаражение растений уже имеющейся на участке инфекцией милдью.Признаки поражения милдью на листьях восприимчивых сеянцев винограда проявляются в виде больших маслянистых желтых пятен, покрытых с обратной сторо510 20 25 35 40 50 кы листа обильным белым пушком - спороношением гриба, а на листьях устойчивых к милдью растений - в виде отдельных некрозных мелких пятен с очень слабым спороношением грибаДля проведения отбора сеянцев, устойчивых одновременно к милдью и антракноэу - болезни, возбудитель которой для заражения требует условий, аналогичных с милдью, можно чередовать искусственное заражение обоими возбудителями виноградных сеянцев вшколке.Суспензию антракноэа из пораженных этим заболеванием листьев винограда готовят путем их погружения в дистиллированную воду на 10-20 мин с периодическим помешиванием и последующим фильтрованием для удаления тканей листовых пластинок, Искусственное заражение суспензией спор антракноза проводится так же, как и милдью, с обязательным сохранением влаги на листьях в течение 4 ч, Через неделю по; сле заражения появляются первые признаки антракноза на листьях и побегах в виде некрозкых коричневых пятен разных размеров (0,5 - 5 мм и более) с,темной каймой по .краям, Впоследствии пораженная тканьлистьев высыхает и выпадает, образуя дырчатую. пятнистость, При сильном поражении восприимчивых растений верхушечные 3 молодые листья полностью коричневеют и засыхают, На устойчивых сеянцах наблюдается только образование точечных некрозных пятен на фоне зеленых листовых пластинок.2, Отбор устойчивых к милдью растений в школке во второй половине августа - начале сентября в период интенсивного развития заболевания. При заражении антракнозом проводят отбор устойчивых к двум болезням одновременно устойчивых форм винограда по следующим шкалам балловых оценок (на высоком инфекционном фоне).Балловая шкала оценки степени пора жения листьев милдью.0 - листья без признаков поражения;1 балл - высокоустойчивые; на листьях единичные или групповые точечные нерозные пятна вдоль жилок без спороношения с нижней стороны листа;2 балла - устойчивые. Желто-бурые некроэные пятна между жилками листа, быстро некроэирующие размером до 2-3 мм с очень слабым спороношением гриба; 53 балла - относительно устойчивые или выносливые. На листьях желтые локальные пятна до 10. мм, ограниченные по краям нерозной тканью. С нижней стороны наблюдается редкое спороношение. 4 балла - восприимчивые. На листьях большие желтые локальные пятна с хорошим спороношением;5 баллов - сильно восприимчивые. Желтые сливающиеся пятна, охватывающие большую частьлиста с интенсивным споро- ношением с нижней стороны листа.Балловая шкала оценки степени поражения листьев антракнозом0 - признаки болезни отсутствуют;1 балл - высокоустойчивые, На листьях образуются единичные точечные темно-коричневые некрозные пятна;2 балла - устойчивые. Темные некрозные пятна размером 1-2 мм на листьях внебольшом количестве;3 балла - относительно устойчивые или выносливые, На листьях .много некрозных пятен разной величины, не сливающихся между собой. Пораженные участки тканейвысыхают;4 балла - восприимчивые. Много некрозных пятен, сливающихся, охватывающих большую площадьлиста. Верхушечные листья на молодых побегах чернеют и засыхают5 баллов - сильно восприимчивые. Листполностью покрыт темно-коричневыми,сливающимися некрозами, увеличивающимися в размерах. Листья усыхают и опадают. Верхушечные листья и молодые побеги, поражаются и усыхают.Отобранные сеянцы, оцененные баллами 1 и 2 по поражаемости милдью и антракнозом, относятся к устойчивым формам, Их отмечают и отбирают в пределах каждой гибридной комбинации,3. В то же время на отобранных мИлдьюустойчивых формах ведется проверка визуальным методом на вирускые и вирусоподобные заболевания с выбраковкой сеянцев, имеющих признаки деформациилистьев, мозаичные пятна, полосы хлоротичной или желтой окраски (типа короткоузлия), скручивание листьев по краям вниз,светло-зеленые полосы вдоль главных жилок листьев (прижилковая мозаика), пожелтение жилок(желтая мозаика), желтые пятна разной величины с зеленой окраской листьев вдоль жилок (инфекционный хлороз) идругие изменения листьев и побегов на отобранных милдьюустойчивых растениях,Более ценные формы проверяются дополнительно на скрытое латентное вирусоносительство в теплице методом заражения травянистых индикаторов и методом прививок на индикаторйые сорта различных видов винограда.50 В дальнейшем осенью после заморозков все отобранные формы укрывают землей на зиму в школке. Ранней весной производят открывку сеянцев, обрезку не- вызревшего прироста, а с началом сокадвижения у милдьюустойчивых растений производят отбор пасоки для тестирования ее на наличие бактерий - возбудителей бактериального рака. Пасоку от каждого тестируемого куста высевают на питательные среды; после б - 7 дней инкубирования при 28 С производят учет количества выросших кодоний и описание их культуральных признаков, искусственное заражение чистой культурой индикаторных растений в теплице для получения опухолей. При выявлении возбудителей рака растения, из пасоки которых выделена бактерия, выбраковываются из дальнейшего размножения.4, В школке сеянцев представляют интерес для дальйейшего изучения только милдью- и антракнозоустойчивые безвирусные и безбактериальные формы, которые выкапывают весной и пересаживают карнесабственными растениями на постоянное место в маточник гибридных форм. Во избежание повторного заражения вирусами и бактериальными болезнями выбирается участок, где никогда не возделывался виноград с. предварительным 1-2-летним выращиванием зерновых в качестве предшественников, Схема посадки 2, 5-3 х 0,8 - 1 м. Уход за молодыми насаждениямиосуществляется согласно агроуказаниям, на без проведения опрыскиваний .против заболеваний для создания высокого инфекционного фона и дальнейшего проведения отборов форм, устойчивых не только к милдью и антрзкнозу, но и к таким заболеваниям как оидиум, краснуха, серая гниль,При посадке карнесобственного участка устойчивых форм производится падреэка побега сеянцев на 2-3 глазка, а хороша развитую часть срезанного вызревшего прироста используют для прививки (простой копулировкой) на безвирусный и безбактериальный подвой, Саженцы подвоя высаживают в питомник. размножения предварительно за 2-3 года до прививок, В питомнике размножения молодой приросг необходимо защищать от болезней опрыскиванием двукратнымбордосскай жидкостью с темчтобы обеспечить нормзльное развитие и вызревание побегов. В дальнейшем на участке размножения продолжается отбор форм, кзк и в маточном корнесобственном гибридном питомнике. На этом участке растения не апрыскиваются в целях проведения отборов на инфекционном фоне не только к милдью и антрэкнозу, но и к 5 10 15 20 25 30 35 40 45 другим заболеваниям - оидиуму, краснухе. серой гнили,Растения в питомнике размножения уже на 2-3-й год позволяют заготовить лозу для размножения порядка 10-12 тыс. привайных черенков с 1 га, а также получать урожай на следующий год после прививки, т.е. на 2 - 3 года раньше па сравнению с корнесобственными растениями,Учеты поражземости и отбор устойчивых форм к оидиуму, крзснухе и серой гнили проводят в периоды массового развития болезней на высоком инфекционном фоне по следующим балловым шкалам,Балловая шкала. оценки степени поражения листьев оидиумомО - признаки болезни отсутствуют;1 балл - высокоустойчивые. На кусте поражены единичные листья, на которых абразуотся чуть обесцвеченные мелкие пятна. Конидии прорастают в слабо развивающуюся грибницу без формирования новых конидий;2 бала - устойчивые. На отдельных листьях растения видны небольшие блестящие более светлые пятна со слабо ветвящимся мицелием гриба и незначительным числом канидий;3 балла - устойчивые относительно. На большом количестве листьев с верхней стороны образуются небольшого размера пятна с хорошо развитым мицелием и формирующимися канидиями;4 балла - восприимчивые. На каждом иэ листьев обильно развивается мицелий гриба, покрывающий почти целиком листовую пластинку с обильным развитием на нем канидии;5 баллов - сильно восприимчивые. Листья полностью покрыты плотным бело-серым войлочным налетом мицелия с конидиями и образованием более темных пятен-клейстотеций гриба. Баллавая шкала степени поражения листьев винограда краснухой .О - листья без признаков поражения;1 балл - , поражение части листовой пластинки в виде желтой или красной высохшей некрозной ткани до 5;2 балда - поражение листа достигает 5 - 10;3 балла - поражение листа достигает 10 - 25;4 балла - поражение листа достигает 25- 50;5 баллов - поражение листа достигает 50- 100%.Балловая шкала поражения гроздей винограда милдью, аидиумам, антракнозом,серой гнилью на высоком инфекционномфоне0 - ягоды и грозди не поражены;1 балл - единичное поражение ягод вгрозди 1 - 5;2 балле - поражение ягод в грозди 10 -25;.3 балла - пораженных ягод в грозди 10 -25;4 балла - пораженных ягод в грозди 25 -50;5 баллов - пораженных ягод в грозди 50 -100.Оценку на устойчивость к корневой филлоксере проводят в полевых или тепличныхусловиях при посадке укороченных черенков на фоне искусственного заражения пометоду Недова П.Н.Корнесобственные и привитые растения не укрывают на зиму для проверки.ихзимостойкости и устойчивости к морозам всуровые зимы (по методике ЧерноморецМ.В.),Балловая шкала определения морозостойкости сортов и форм винограда в годы. после суровой морозной зимы при морозахниже -(25-27) С1 балл - высшая. Погибших глазков до20,2 балла - повышенная, Погибших глазков 20 - 40,3 балла - средняя. Погибших глазков 40 -60,. 4 бэлла - слабая. Погибших глазков 60 -80,5 баллов - неустойчивая. Погибшихглазков 80 - 100В зоне привитой культуры винограда(Молдавия, Украина, Северный Кавказ)метод прививки сильно поражаемых филлоксерой европейских сортов винограда наподвои (РипарияхРупестрис 101-14 Кобер5 ББ, Рипария Глуар и др.) применяется ввиноградном питомниководстве в целях сохранения долговечности кустов и защиты ихот филлоксеры.В способе селекции винограда прививка имеет новое назначение и преследуетследующие цели: сохранить отобраннуюформу от возможного дальнейшего заражения ее бактериальным раком и вируснымиболезнями; ускорение плодоношения; ускорение размножения (в 4-5 раэ) выделенныхперспективных устойчивых к грибным, ви. русным болезням и бактериальному ракуформ винограда,1 На ранних этапах селекции в первый жегод развития сеянцев винограда в школке проводится первая браковка и отбор растений (на фоне применения искусственных эа ражений) сразу к двум вредоноснымзаболеваниям - милдью и антракнозу. - и визуальная проверка вирусных заболеваний, а на второй год в школке милдьюустойчивые отборы проверяют на наличие 10 возбудителя бактериального рака.Применение способа получения комплексно-устойчивых сортов винограда дает возможность дополнительного отбора безвирусных и безбактериальных форм на 15 второй год жизни среди выделенных милдьюустойчивых форм винограда; надежное со.хранение этих свойств путем прививки на безвирусный и безбактериальный подвой; сокращение сроков выведения сортов эа 20 счет более раннего вступления в фазу плодоношения; увеличение коэффициента размножения кустов путем прививки на укорененные растения подвоя по сравнению с одновременно посаженными корнесобственными 25 растениями; снижение материально-денежных затрат эа счет сокращения сроков выведения; повышение долговечности кустов и улучшение хозяйственно-биологических свойств за счет дополнительного отбора на 30 отсутствие вирусных и бактериальных болезней,Фо р мул а изобретения35 Способ селекции винограда на устойчивость к заболеваниям, включающий отбор форм, устойчивых к милдью, в первый год выращивания сеянцев в школке и пересадку их в маточник для последующего отбора к 40 другим заболеваниям, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения эффективности способа эа счет получения более полной комплексной устойчивости и сокращения сроков селекции, иэ устойчивых к милдью 45 форм в этот же год отбирают сеянцы, свободные от вирусных болезней, на второй год отобранные сеянцы проверяют на наличие бактериального рака, пересаживают в маточник растения, свободные от вирусных 50 болезней и бактериального рака, одновременно с пересадкой корнесобственных растений осуществляют, прививку их на взрослые беэвирусные и безбактериальные кусты подвоя, а последующий отбор прово-55 Аят на корнесобственных,и привитых растениях,