Способ определения токсичности полимерного материала

(51)4 С 01 И 33/48 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТИЙ(71) Всесоюзный научно-исследовательский и испытательный институт медицинской техники(56) Ра 1 цсЬ "Тохдсду ой р 1 аяС 1 сяшайега 1 я ав еча 1 цайей Ьу шеапв ойЬи 11 вешеп Ро 1 двЬ. 1. оЕ рЬагшасо 1 ояу апд рЬаппасу, 1980, .32, 109-114(54) (51) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОС ТИ ПОЛИМЕРНОГО МАТЕРИАЛА путем приготовления водной вытяжки исследуемого полимера, воздействия этим экстрактом на суспензию подвижных клеток с последующей оценкой жизнедеятельности клеток, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повыиения точности способа, одновременно определяют концентрацию подвижных клеток и скорость их движения в динамике, далее вычисляют среднее время жизни по формуле с,ч,С,Ч., где 1, - среднее время жизни, С - концетрация клеток в данныймомент времени; Ч - скорость движения клеток в 1данный момент времени, 1 - время от канала исследовае ния до момента последующего измерения;1,2,3, и при снижении среднего времени жизни на 103 и более в сравнении с контрольиык определяют токсичность полимерного материала.1Контрольный обОпытный образец раэец 11 104 98 4 16 124 11,7 21 100 105 26 120 31 91 36 90 41 91 46 76 51 81 56 77 61 67 66 74 71 75 76 72 76 94 60 12 49 48 22 17 8652 18 91 19 20 53 40 101,10 106 Таблица 1 42 Р измерения мин 42 Контроль- Опытный ный об- образец 121 33 разец 126 0 80107 10095 131 27 Изобретение относится к биологиии медицине, а именно к определениютоксичности полимерных материалов,Цель изобретения - повышение точности способа определения токсичности полимерных материалов,П р и м е р 1. Испытанию на ток"сичность была подвергнута вытяжка изсистемы для переливания крови, разные детали которой изготовлены из 10полимерных материалов (поливинилхлоридного пластика, медицинской резиныи капронового полотна). Вытяжку готовили по известной методике.Для определения степени токсичности вытяжку сравнивали с контрольнымраствором, Контрольной пробой служила глюкозоцитратная среда (глюкоза4 г, цитрат натрия 0,58 г, вода дистиллированная 100 мл).10Опытным образцом в экспериментеслужила вытяжка, доведенная до изотонии. На 100 мл, вытяжки добавляли4 г глюкозы и 0,58 г цитрата натрия,В качестве клеточного тест-объек- дта определения токсичности вытяжкииспользовали замороженную в парахжидкого азота гранулированную спермубыка,Оттаивание каждой гранулы осуществляли в 0,5 мл глюкозоцитратнойосреды при 40 С, После оттаиваниясперму сливали в колбочку и тщательно перемешивали. Затем в 1 мл опытной пробы добавляли 0,3 мл оттаяннойспермы. Аналогично поступали и с35контрольной пробой.Определение токсичности вытяжкиосуществляли с помощью контрольнойустановки. Приготовленные опытный40и контрольный образцы помещали визмерительные кюветы, Проводилиизмерение произведения концентрацииподвижных клеток на среднюю скорость их движения в условных едини 43цах в динамике с интервалом 5 мин.Результаты измерения приведены втабл. 1. Произведение концентрации клеток на скорость Произведение концентрации клеток на скорость3Продолжение табл.1 1224723 мин В измерения рость Опытный образец Контрольный образец 28 О 29 30 31 32 33 Таблица 2 25 В измерения Зб 0 О37 Контроль- Опытный ный образец образец 38 39 1 239 6 203 11 325 130 О 40 35 167 40 4 52 21 180 26 161 31 . 192 36 198 41 295 46112 26 10 134 512 56 99 61 99 13 27 Произведение концентрации клеток на скорость 136 17 141 7 146 14 151 . 3 156 6 161 4 166 3 171 7 176 2 181 2 186 0 191 О 196 О Данные таблицы подставляют в формулу, с у,11где 1 - среднее время жизни,с - концентрация клеток в данный1момент времени;Ч, - скорость движения клетокв данный момент времени;- время от начала исследова 1ния до момента последующегоизмерения;12 у Зу аНуаеи вычисляют среднее время жизни клеток для опытного и контрольного образцовПолучали 1опытного образца составляет 36 мин, , контрольного образца - 59 мин.Определяли процент снижения среднего времени жизни опытного образца по отношению к среднему времени жизни контрольного образца.Получали: 38,8 Х.Вьт.эд: Поскольку процент снижениясреднего времени жизни опытного образца по отношению к среднему времени жизни контрольного образца более103, то вытяжка из системы для переливания крови является токсичной.1 О П р и м е р 2. Испытанию на токсичность была подвергнута вытяжка иэполимерного материала ортопласта, в, состав которого входят каучук, белаясажа,- катализатор 1-дибутилоловодистеарат, Вытяжку готовили по известной методике.Клеточный тест-объект, приготовление опытного и контрольного образцов,оттаивание гранул, измерение концентрации подвижных клеток и средней скорости их движения в динамике но примеруРезультаты измерения приведеныв табл. 2. Произведение концентрации клеток на скоростьКонтроль- Опытный иый об- образец разец 14 66 15 71 123 76 81 82 86 84 91 92 27 96 77101 62 20 3015 21 106 37 111 29 116 28 121 49 126 28 131 32 136 32 141 14 22 23 25 26 27 Таблица 3 У измерения мин 0 29 0 146 55 30 Контроль- Опытный ный об- образец разец О 151 18156 0 31 45 32 182 216 161 0 33 50 140 158 166 0 171 0 176 0 34 134 0 35 156 16 85 36 55 122 0 181 37 82 103 Произведение концентрации клеток на скорость Данные таблицы подставлены в формулу1и вычисляли среднее время жизни клеток для опытного и контрольного образцов,1 О Получили; , опытного образцасоставил 40 мин,контрольного образца - 48 мнн.Определяли процент снижения среднего времени жизни опытного образцапо отношению к среднему времени жизни контрольного образца,Получили: 17,37.Вывод; Поскольку процент снижениясреднего времени жизни опытного образца по отношению к среднему времени жизни контрольного образца более1 ОЕ, то вытяжка из ортопласта является токсичной,П р и м е р 3. Испытанию на токсичность была подвергнута вытяжкаиз полиэтиленовых гранул. Вытяжкуготовили при соотношении поверхностиизделия к объему модельной среды1:10 при 70 С. Время зкстрагирования 1 сутеКлеточный тест-объект, приготовление опытного и контрольного образцов,оттаивание гранул, измерение концентрации подвижных клеток и средней ско 35рости их движения в динамике попримеру 1.Результаты измерения приведеныв табл 3. Произвецение концентрации клеток на скорость8Продолжение табл, 3 1224723 Продолжение табл. 3 1 1мин У измерения В измерения мин Опытный образец Контроль- Опытный ный об- образец разец Контрольный образец О 104 23 156 7 32 96 31 161 33 78 99 36 5 34 12 41 16 35 82 52 46 10 176 81 50 20 1 О 37 48 12 186 8 38 61 65 191 25 39 66 14 196 6 40 75 64 15 201 2 3 41 63 21 76 16 30 206 10 42 81 418649 17 211 0 0 216 0 0 43 18 42 91 22 96 3336 21 101 18 106 11111 13 116 10 37 22 42 23 29 25 121 42 18 126 131 13 27 25 27 28 136 27 141 29 13 146 30 19 31 29 51 Произведение концентрации клеток на скорость Произведение концентрации клеток на скорость Данные таблицы подставляли.в форс. /.ср401,2,31 1и вычисляли реднее время жизни клеток для опытного и контрольного образцов.Получипи: 1 опытного образца сос 45 тарил 59 мин, р контрольного обсрразца - 53 мин,Определяли прсцент снижения среднего времени жизни опытного образцапо отношению к среднему времени жиз ни контрольного образца.Подучили: 11,13.Вывод:Поскольку процент снижения среднего времени жизни опытного образцапо отношению к среднему времени жизни 55 контрольного образца есть величина отрицательная,то вытяжка из полиэтиленовых гранул стимулирует жизнедеятельность клеток и не является токсичной.