Способ определения димедрола в биологических объектах

(5 Й) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИИЕДРОЛА В БИОЛОГИ 4 ЕСКИХ ОБЪЕКТАХ1Изобретение относится к аналити" ческой химии и касается определения димедрола,Известен способ определения димедрола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной ф серной кислотой с последующим фотометрированием.полученного раствора 11.Однако известный способ обладает недостаточно высокой чувствительнос.тью.1 Ю Цель изобретения - повышение чувствительности способа.Поставленная цель достигается тем,5 что согласно способу определения ди;. медрола в биологических объектах, осуществляемому путем обработки пробы концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием полученного раствора, в пробу дополнительно вносят диметилформамид:и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрацию димедрола. 2П р и м е р 1. Определение димедро ла в 1 Ф-ном растворе. К 1 мл 13-ного раствора из ампулы приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора осторожно приливают 9 мл диметилюрмамида, перемешивают переворачиванием и замеряют интенсивность, флуоресценции. Содержание димедрола . рассчитывают по стандартному образцу, для приготовления которого к 1 мл водного раствора димедрола с содержанием препарата 10000 мкг/мл) приливают осторожно 9 мл концентрированной .серной кислоты и 1 мл полученного раствора разбавляют 9 мп диметилформамида. Измеряют интенсив" ность флуоресценции одновременно с исследуемыми образцами. По результатам этих измерений рассчитывают содержание димедрола в анализируемой пробе. Результаты флуореметрическо" го определения димедрола в 1 Ф растворе представлены в табл. 1., 90 94 0,092 92 90 90 90 98 0,091 91 О, 090 90 Т а б л и ц а 2 айдено димедрола о калибровочномурафику, мкг/мл Из расчета на 1 таблетку, г 48,0,046 0,046 По калибровочному графику (мкгlмл) П р и м е р 2. Определение димедро.ла в таблетках 0,05.зо Точную навеску мелкоизмельченных таблеток, равную 0,15, растворяют в 10 мл дистиллированной "воды. К 1 мп данного раствора приливают осторож" но 9 мл концентрированной, серной кис- з лоты, тщательно перемешивают. К 1 мл полученного раствора добавляют 9 мл . диметилформамида и замеряют интенсивность флуоресценции. Содержание димедНавеска таблетокмелкоизмельченных, гр В 14-ном растворе (гр/мл) 0,090 0,090 0,088 .0,090 0,098 рола определяют по стандартному раствору, для приготовления которого кмл водного раствора димедрола с содержанием препарата 5000 мкгlмл приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл диметилформамида и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. Результаты флуориметрического определения димедрола в таблетках 0.,05 представлены в табл. 2,е Ю, 5 мл исследуемой оксалатной кро" ви помещают в центрифужную кювету и 2 центрифугируют в течение 20 мин при 8 тыс об/мин. К 1 мл. центрифугата в делительной воронке прибавляют 1 мп 53-ного раствора едкого натрия и 10 мл гексана и перемешивают в течение. 15 мин. Верхний слой отделяют в чашку для выпаривания. Зкстракционирование повторяют. Гексан выпаривают на водяной бане при температуре не выше 60 ОС. К сухому остатку приливают 1 мл концентрированной серной кисло" ты, перемешивают стеклянной палочкой, добавляют 9 мл диметилформамида и переносят в кювету флуориметра. ФлуоПо калибровочному графику,мкг/млриметрируют раствор одновременно состандартными образцами. Количестводимедрола в исследуемой пробе определяют по калибровочному графику,для построения которого к 1 мп вод"ного раствора димедрола с содержанием препарата 10 000 мкг/мл приливают9 мл концентрированной серной кислоты,перемешивают. К 1,0;0,5 и 0,1 мл дан"ного раствора соответственно приливают 9,0; 9,5 и 9,9 мл диметилформамида. Стандартные образцы флуориметрируют одновременно с исследуемымирастворами. По результатам флуори-.метрии строят калибровочный график.Результаты определения содержаниядимедрола в сыворотке крови отражено в тдбд-.0123 8со стандартными образцами. Количестводимедрола в моче определяют по калибровочному графику, для постРоениякоторого к 1 мл водного стандартногораствора димедрола, с содержанием препарата 10 000 мкг/мп, прибавляют 9мп концентрированной серной кислоты,перемешивают переворачиванием осторожно. К 1, 0,5 и 0,1 мл полученной 1 О смеси приливают соответственно 9,09,5 9,9 мл диметилформамида и Флуориментрировать одновременно с опытнымиобразцами. По результатам измеренийстроят калибровочный график. Результа 15 ты определения димедрола в моче приведены в табл. 4.Табл и ц а 4 93П р и м е р 4, Определение димедтрола в моче. Найдено димедрола в моче, мкг/млтПо калибровочному графику В 1 мл мочи 40,0 400,0 440,0 42,0 420,0 42 О,О 42,0 40,5 405,0 451, О 45,0 450,0 420,0 42,0 44,0 440,0 420,0 Формула изобретения Способ определения димедрола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной серной50 кислотой с последующим фотометрироввнием полученного Раствора, о т л и" ВНИИПИ Заказ 3457/56 Тираж ЯЯ Подписное иии ее иеще ееи т и т т а иаииефилиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,К 1 мл мочи в делительной воронке1приливают 10 мл гексана и встряхива" ют 1 О мин. Дают отстояться до полно" го разделения фаз. Верхний слой отделяют в фарфоровую чашку для выпари-. вания. Экстрагирование повторяют. Выпаривают гексан в чашке на водяной бане при температуре не более 60 С, К сухому остатку приливают 1 мл концентрированной серной кислоты, тщательно перемешивают стеклянной палочкой, добавляют 9 мл димегилформамида и флуориметрируют одновременно,42,0Предлагаемый способ позволяет по-.,:высить чувствительность до 1 мкг/млпо сравнению с известной 5 мкг/мл. 7 .ч а ю щ и й с я тем, что, с целью по"вышения чувствительности способа,в пробу дополнительно вносят диметилФормамид и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрациюдимедрола.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Государственная фармакопеяСССР И 1978, (Изд, 1 О-е), с. 25425 б.