Способ получения препарата витамина

)2 (57) Использо пенность, кор Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам(71) Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт антибиотиков и ферментов медицинского назначения(73) Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт антибиотиков и ферментов медицинского назначения(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ВИТАп 9) ЙтЗ (и) 20019 фз С 1(5 Ц 5 С 12 Р 19 42 ванне: микробиологическая промышмовой витамин В может быть ис 12льском хозяйстве. Сущность изобальную жидкость, полученную ферпродуцирующего штамма пт йепттапй М 82, концентрируют содержания сухих вществ 10 - 60 распылением при температуре 145 -пользован в се ретения: культур ментацией Ргор)оп)Ьасепц сгущением до мас.% и сушат 165 С, 2 таблИзобретение относится к микробиологической промышленности, а получаемый витамин В 12 может использоваться в сельском хозяйстве, в частности в рационах сельскохозяйственных животных для увеличения их продуктивности и как антианемический препарат.Известен способ. получения кормового витамина 8 12, предусматривающий концентрирование культурэльной жидкости до заданного содержания сухих веществ и сушку.Полученный известным способом кормовой витамин Вп содержит всего лишь 20-25 от суммы кобэламинов активной формы сульфитокобаламина, остальные 75- 80 кобаламинов являются биологически неактивными формами. Сульфитоформэ этого витамина 812, также как и другие не- природные формы, такие как цианокобаламин и оксикобалин, при применении имеет ряд противопоказаний при эритримии и эритрОцитозе, а также вызывает рост доброкачественных и злокачественных новообразований.Целью изобретения является повышение выхода и качества целевого продукта.Это достигается тем, что в способе получения препарата витамина В 12, предусматривающем концентрирование культуральной жидкости до заданного содержания сухих веществ и сушку. осуществляют концентрирование культуральной жидкости, полученной ферментацией продуцирующего шта а Ргор 1 ог Ьас 1 егЬт зЬеггпап 11 М 82, до содержания сухих веществ от 10 до 60 мас.о , а сушку проводят при температуре 145 - 165 С,Отличиями предлагаемого способа от известного являются следующие: использование в качестве продукта штамма Ргор 1 оп 1 Ьастег 1 ое збеппапИ, благодаря чему увеличивается выход биологически активной формы витамина 812-5-дезоксиаденозилкобамида (кофермента 812) за счет направленности биологического синтеза;концентрирование культуральной жидкости осуществляют до содержания сухих веществ от 10 до 60 мас, , а сушку проводят при температуре 145-165 С,Г 1 редлагаемый предел температуры сушки позволяет избежать тепловой деструкции целевого компонента (кофермента витамина В 12), следовательно, увеличить выход активной формы витамина В 12 от культуральной жидкости,При концентрировании культуральной жидкости до сухих веществ ниже 10 процесс нетехнологичен и экономически невыгоден из-за низкой кратности (2) обезвоживания биомассы Концентрирова 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ние до содержания сухих веществ свыше60 технически трудно осуществить из-завозможности аппаратуры.П р и м е р 1. В 1 О колб вместимостью700 мл загружают по 400 мл питательнойсреды следующего состава.к объему среды:Кукурузный экстракт. 6,0Глюкоза 2,0СоС 12 0,0065Вода ОстальноеСреду засевают 72-часовым посевным материалом витамина 812 Ргор 1 оп 1 Ьастег 1 огпзЬеггпапП Мв количестве 15 ф, к обьемусреды. Культивирование осуществляют ванаэробных условиях при 28-30 С при периодической подтитровке культуральнойжидкость 1 ДЬ рН 7,0, начиная с 18 ч ростачерез каждые 9 ч до конца ферментацииконцентрированным аммиаком. На 72 ч вносится предшественник 5,6-диметилбензимидазол и продолжают культивированиееще 48 ч. В период с 36 до 72 ч через каждые9 ч подается глюкоза в количестве 9 г наколбу в виде 25(-ного раствора по следующей программе,к объему среды;1 подача 0,242 подача 0,363 подача 0,484 подача 0,605 подача0,72В результате получают 5160 мл культуральной жидкости с концентрацией витаминаВ 12 (в коферментной форме) 23,8 мкг/мл.Съем витамина Вг 123 мг. Содержаниесухих веществ в культуральной жидкости5,66 (289 г),Полученную культуральную жидкостьсушили на распылительной сушилке типа"Ангидро" при следующих параметрах сушки;температура теплоносителя на входе 150 С,температура теплоносителя нэ выходе 80"С,расход раствора насушку 4,2 л/ч,Получили 272 г порошка витамина 812 свлажностью 6,7 и содержанием витаминаВ 1 р (в коферментнои форме) 103.5 мг. Массовая доля витамина 82 (в пересчете насухой вес) 408 мкгlг, Потери Вг:механический унос 12%,инактивация 43,П р и м е р 2. Культуральную жидкостьвитамина В 12 получают по методике, указанной в примере 1. Получено 5300 мл культуральной жидкости с концентрацией витамина812 в кофермемтной Форме) 25 1 мкг/мл.Съем витамина 8; ".,3 мг Г.одержание су(318 г). Культуральную жидкость уььариваютна пленочном испаритела в вакууме притемпературе 70 С и остаточносл давлении0,02 МПА до объема 1650 мл, Содержание 5сухих веществ в упаренной культуралыьойжидкости 19,3. Упаренную культуральнуюжидкость сушили на распылительцой с.шилке типа "Ангидро" при спедуьоьцих параметрах процесса: 10температура теплоносителя на входе 1 1,-л -.температура теплоносителя на выходе 75 С,расход раствора на 15сушку 1,0 л/ч.Получили 328 г порошка витамин 012 с содержанием влаги 7,8 О и содержаьььтем витамина В 12 (в пересчете на сухьй вег) 387мкг/г. Потери витамина В 12: 20Механический унос 5.";ъ,Инактивация 7.П р и м е р 3, Культуральцую жидкостьвитамина В 12 получают, как в примере 1,Получено 5020 мл культуральной жидкости 25с концентрацией витамина В 12 (в кофермецтной форме) 23,2 мкг/мл. Съем витаьли ьэ Вь.;116 мг. Содержание сухих л": .: ", в ь,нь гуральной жидкости 6,2,4 Р 11 г) ь,уль,г,ральную жидкость сеыарируют цл сапаратОГье 3(типа АСГ, Расход культурэльной жидкостина сепарирование 5 л/ч, Логу льли 650 млбиомассы с содержацие 11 сухи ле 11 естьь 181;, Ьс.ь 1 яь су суььь 11 ли ььа суьььилке с 111 вГьт цы 11 цостолем (гьсепдооьь,ижеььцнй сьой). Гемперагура воздуха ца входе 115 ь С 1 Ол. уьььл 11 116 г порошка витамина 012 с содержа ььием влаги 3,5 "(, и содержаььием г,палица 812 сь коферменть эи форме) 107 мг, Массовая Долл витамина В 1 ,в пересчете ца СуХОй Г,ЕС) 991 МКГ/Г, ПОтЕрИ ОгнтаМИц В 1Ггь.е (лыыческььй уцос 1;4,1 1 сььл иьация 1 сП 1: ьь м е р 4, Культуральыуьо жидкость ььоь аот по примеру 1. Получеььо 6070 мл ,.ул ььурал ыьой жидкости с коц цент рацией гцтамьпьа В 12 (в кофермеытной форме) 20,7 мкь,мл. Съем витамиььл В ц 126 мг, Содержаив сухих вещаств в культуральцой жидкости 1,9", 1297 г), Культуральную жидкость ььеььтр,: 1 угируют л центрифуге типа ОС-СМ, Гьалуьильл 300 мл биомассы витамина Вц с содержанием сухих веществ 56 оь. Биомассу сушии ца сушилке с инертным носителем. и.",;ь 1 ераьура воздуха на входе 165 С. Полу ь;ьли 165 г порошка витамина В 12 с содерьк; ььием вла;и 2,0 и содержанием влаги 2 л 1 г; и випллиььа Е 312 (в коферментой форме) 1 ь 0. 11 г. Массовал Долл витамиььа В 12 (в перес ье.ьеь сухой вес) 673 мкг/г, Потер1 а Г 1,1,1 ехаьььиесь 1 ий 1 ос 3,5 Я,Иьцьк 1 илэььил 10 у,ь 56) Авггьр кое соидеьельстло СССРГ,ь ььь),364, кл, С 12 Р 19/12, 1962,2001953 Таблица 2 Влияние значений содержания сухих веществ в сгущенной биомассе на выход витамина Вц Формула изобретения Составитель А. ПучковТехред М.Моргентал Корректор С. Патрушева Редактор Л. Павлова Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Заказ 3156 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ВИТАМИНА В 12, предусматривающий концентрирование культуральной жидкости до заданного содержания сухих веществ и сушку, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и качества целевого продукта, осуществляют концентрирование культуральной жидкости, полученной ферментацией продуцирую щего штамма РгоропЬэсебцв впегеап 11 Мдо содержания сухих веществ 10 - 60 мас. , а сушку проводят при 145 - 165 С,