Способ культивирования продуцента бацитрацина bacillus licheniformis

СПУБЛИ ТВОЕТЕНТ СССР) СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАВЕДОМСТВО СССР (ГО ОПИ ПАТЕН К ИЗОБР(71) Бердский завод биологических препаратов(72) Корнеев АД; Ломовская Т.ФБлинова ТА;Шашкина Н.И;, Замотайпова ЛП.; Пахуев АИЧе одаев ф.Н.(73) Бердский завод биологических препаратов, (И) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТА БАЦИТРАЦИНА ВАСШЮОСНЕЮРОВВН(87) Использование; в микробиологической промышленности при культивировании продуцентовантибиотиков. Процесс культивирования ведут приступенчатых режимах аэрации и температуры, в наочапе процесса при 38+1 С и скорости аэрации 500-800 м /ч, а начиная с момента антибиотикоЭобразования и достижения соотношения углерода и азота в среде 11 - 13, 1, температуру культивирования понижают на 3 - 4 С с одновременной корректировкой рН до значения 69 - 7,1 и скорость аэрации увеличивают до 1000-1800 м /ч. Купьтиэвирование проводят на питательной среде следующего состава мас%: соевая мука 9,0 - 98; крахмал 2,4 - 2,6; мел 0,36 - 0,40; Мд 50 7 Н О 0,3, вдда4водопроводная остальное. Активность бацитр,ци а увеличивается на 29 - 30%, а инактивация;менья на 3 - 4%. 1 табл.шаетсИзобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано в производстве бацитрацина.Цель изобретения - увеличение антибиотикообразования и уменьшение инактивации продукта,Способ культивирования продуцента бацитрацина Вас,ИсЬеп 11 оов 1 з 356 заключается в выращивании продуцента нэ жидкой питательной среде, содержащей компоненты при следующем соотношении, мас,7 ь:Соевая мука 9,0-9,8Крахмал 2,4-2,6Мел 0,36 - 0,40М 93047 Н 20 0,12-0,3Вода ОстальноеКультивирование ведут при температуре 38 .4-1 С и скорости аэрации 500-800 мз/ч, затем, начиная с момента антибиотикообразования и при достижении соотношения углерода и азота в среде 11 - 13:1, температуру понижают на 3 - 4 С, одновременно корректируют рН до значения 6,9-7,1 и скорость аэрации увеличивают до 1000- 1800 м /ч,П р и м е р 1. Посевной материал для засева питательной среды в ферментере готовят на питательной среде следующего состава, мас. о:Мука соевая 7,5Крахмал 1,8Мел 0,2Аммоний сернокислый 0,2Вода дистиллированная до 100%Среду разливают по 400 мл в трехлитровые колбы и стерилизуют при Т= 125+ 2 С в течение 5 мин, Засев стерильной среды осуществляют суспенэией, полученной с косяка смывом культуры 12-15 мл МПБ, в количестве 2,5 мл в каждую из 4-х колб. Выращивание культуры проводят в термостате на качалке с числом оборотов 180-220 в минуту при температуре 30 +1 С в течение 24 ч, рН конечное 6,4 +0,1, Полученным посевным материалом в количестве 0,002% засевают питательную среду в ферментере емкостью 63 м с объемом среды 30,5 м,з 3 состоящей, мас. О :Соевая мука 8,0Крахмал 2,2Мел 0,32МЯЯО 47 Н 20 0,1Вода до 100 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Культивирование начинают при температуре 38 +1 С с аэрацией 500 м /ч, Приданной температуре культивируют до начала антибиотикообрэзования и достижениясоотношения углерода к азоту С 1 1 ч = 10, чтосоответствует приблизительно 8 - 10 ч ростапродуцента. Затем температуру снижают нао3 С с одновременным поддержанием рН науровне 6,9 и увеличивают аэрацию до 1000м /ч. Продуктивность Вас.ИсбепИогв 1 з 356зсоставила 13900 мкг/мл,(см. табл,).П р и м е р 2. Способ культивирования.осуществляют аналогично примеру 1 (см,табл,) при 38 +1 С с азрацией 800 м /ч додостижения соотношения С/1 ч = 11, Затемтемпературу понижают на 4 С с одновременной корректировкой рН до значения6,95 и увеличивают аэрацию до 1800 м /ч,Продуктивность Вас. ИсЬепИогв 1 з 356 составила 15850 мкг/мл.П р и м е р 3, Способ осуществляют попримеру 1 (см, табл,) при 38 +1 С с эзрацией 800 м /ч до достижения соотношениязС/й = 12, затем температуру понижают на4 С с одновременной корректировкой рН дозначения 7,05 и аэрацией 1800 м /ч. Продуктивность Вас, ИсйепНогв 1 з штамма 356 составила 16100 мкг/мл,П р и м е р 4, Способ осуществляют попримеру 1 (см, табл.1) при 38 +1 С и аэрации 600 м /ч до достижения соотношениязС/М = 13, затем температуру понижают на4 С с одновременной корректировкой рН дозначения 7,1 и аэрацией 1600 м /ч. Продуктивность Вас. ИсЬепПогвз шт. 356 составила 15900 мкг/мл.П р и м е р 5. Способ осуществляют пополимеру 1 при 38 .1 С и азрацией 700м /ч (см, табл,) до достижения соотношения С/й = 14, затем температуру понижаютна 4 С с одновременной корректировкой рНдо значения 6,9 и аэрацией 1700 м /ч. Продуктивность Вас. ИсЬепПогв 1 з шт. 356 сос-зоила 14900 мкг/мл.Таким образом, предлагаемый способкультивирования Вас, ИсйепНогвз позволяет повысить продуктивность культуры на29 - 307 ь и снизить инактивацию на 3 - 4.(56) 1. Авторское свидетельство СССРМ 1280880, кл, С 12 Р 21/04, 1985,2. Авторское свидетельство СССРМ 497333, кл, С 12 Р 21/104, 1975.3, Промышленный регламент ПР104.180-8 на производство бэцитрацина вцехе 33, утв, 16.04.84. Директором БХЗБ.В. Прилепским.1839681 О О О О О О О О О О О О й сО- Й й м м СО со сй й сч 1 ЩЖ Щ й х Б ст о сч о гсч о о о - сг О) М) О) О СО Ф3о оо хо 01 1 л сс сс 1 лм м м с) м мЩ Щ Щ Ф Ф Щ- .О сЩ л а с СЧ СЧ М СО % ФФО о О оО О оо о Щ 2 СЧ СО СО О сГ м м с с ст О О О О О сч сй о в со о СЧ СЧ СЧ СЧ СЧ СЧ о о сс со ". о сО о) ю Оз Р ЯСС.Оьо оо5о щСо о ос Щ Х с Ф 1- Щ 1 С: щщоа уФ щСОо кХаФ Х оО ЩО Щ аа со о о сс Я Хо Що о о. Б з Х Ф а- СЧ М щ а а о.Ф Ф Ф Ф Б Б Е а а а ассс Ф 07г.а о.Ф о2 Еоо. о. аС" С: С:1839681 Составитель Т,БлиноваТехред М.Моргентал Корректор А, Козориз Редактор С. КулаковаЗаказ 3412 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113035. Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, У;кгород, ул,Гагарина, 101 Формула изобретенияСПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТА БАЦИТРАЦИНА ВАС 1 ЫБ1 СНЕИЕОВМ 15 356 путем засева в питательную среду, содержащую соевую муку, крахмал, мел, сернокислый магний, при перемешивании в условиях ступенчатого режима температуры и аэрации, отличающийся тем, что, с целью повышения антибиотикообразования и уменьшения инактивации продуцента, засев осуществляют в питательную среду при следующем соотношении компонентов, мас,: Соевая мука 9;0 - 9,8 Крахмал 2,4 - 2,6 Мел 0,36 - 0,40 5 Сернокислый магний 0,12 - 0,13 Водопроводная вода Остальное после засева культивирование ведут при температуре 38 1 С и скорости аэрации 500 - 800 м /ч, затем, начиная с момента 3"0 антибиотикообразования и по достижении соотношения углерода и азота в среде 1113: 1, температуру понижают на 3 - 4 С,одновременно корректируют рН до эначе ния 6,9 - 7,1 и скорость аэрации увеличива ют до 1000 - 1800 мз/ч,